| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-27页 |
| 0 大菱鲆养殖现状 | 第13-14页 |
| 1 大菱鲆细菌性病害 | 第14-16页 |
| ·主要致病弧菌 | 第15-16页 |
| ·迟缓爱德华氏菌 | 第16页 |
| 2 水产疾病检测技术 | 第16-23页 |
| ·选择性培养基 | 第17页 |
| ·细菌鉴定系统 | 第17-18页 |
| ·免疫学检测 | 第18-19页 |
| ·分子生物学检测技术 | 第19-22页 |
| ·水产疾病检测的实践需求 | 第22-23页 |
| 3 细菌检测常用基因 | 第23-25页 |
| ·细菌分类的靶基因 | 第23-25页 |
| ·细菌中其他用于快速检测的基因 | 第25页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 大菱鲆 4 种致病菌的多重 PCR 检测技术 | 第27-42页 |
| 1 实验材料 | 第27-28页 |
| ·菌株 | 第27-28页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第28页 |
| ·仪器和设备 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-35页 |
| ·实验菌株活化 | 第28-29页 |
| ·DNA 提取 | 第29页 |
| ·PCR 靶基因选择及引物设计 | 第29-33页 |
| ·四对引物特异性及通用性检测 | 第33-34页 |
| ·多重 PCR 的条件优化 | 第34页 |
| ·多重 PCR 灵敏度检测 | 第34-35页 |
| ·鱼体组织对多重 PCR 检测结果的影响 | 第35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-39页 |
| ·多重 PCR 引物设计 | 第35页 |
| ·四种引物的特异性检测 | 第35-37页 |
| ·多重 PCR 条件优化 | 第37-38页 |
| ·多重 PCR 灵敏度检测 | 第38-39页 |
| ·鱼体组织对多重 PCR 检测结果的影响 | 第39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 第三章 哈维氏弧菌荧光定量 PCR 检测技术的建立 | 第42-54页 |
| 1 实验材料 | 第42页 |
| ·菌株 | 第42页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第42页 |
| ·仪器和设备 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-45页 |
| ·哈维氏弧菌的荧光定量检测扩增条件优化 | 第42-43页 |
| ·引物特异性检测 | 第43页 |
| ·标准品的构建 | 第43-44页 |
| ·标准品的存在状态对标准曲线的影响 | 第44页 |
| ·标准曲线的重复性检测 | 第44-45页 |
| ·荧光定量与普通 PCR 灵敏度比较 | 第45页 |
| ·标准曲线的定量 | 第45页 |
| 3 实验结果及分析 | 第45-52页 |
| ·扩增条件优化 | 第45-46页 |
| ·特异性检测 | 第46页 |
| ·标准品的构建 | 第46-47页 |
| ·标准品的状态对标准曲线的影响 | 第47-50页 |
| ·标准曲线的重复性检测 | 第50-51页 |
| ·荧光定量 PCR 与普通 PCR 灵敏度比较 | 第51-52页 |
| ·标准曲线的定量 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 灿烂弧菌荧光定量 PCR 检测技术的建立 | 第54-61页 |
| 1 实验材料 | 第54页 |
| ·菌株 | 第54页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第54页 |
| ·仪器和设备 | 第54页 |
| 2 实验方法 | 第54-56页 |
| ·灿烂弧菌荧光定量 PCR 扩增条件优化 | 第54-55页 |
| ·灿烂弧菌引物特异性 | 第55页 |
| ·标准品的构建 | 第55页 |
| ·标准曲线的构建及其重复性 | 第55-56页 |
| ·荧光定量与普通 PCR 灵敏度比较 | 第56页 |
| 3 实验结果及分析 | 第56-59页 |
| ·扩增条件优化 | 第56页 |
| ·特异性检测 | 第56-57页 |
| ·标准品的构建 | 第57页 |
| ·标准曲线的构建及其重复性 | 第57-59页 |
| ·荧光定量与普通 PCR 灵敏度比较 | 第59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 迟缓爱德华氏菌荧光定量 PCR 检测技术的建立 | 第61-69页 |
| 1 实验材料 | 第61页 |
| ·菌株 | 第61页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第61页 |
| ·仪器和设备 | 第61页 |
| 2 实验方法 | 第61-63页 |
| ·引物设计 | 第61-62页 |
| ·扩增条件优化及引物特异性和通用性检测 | 第62页 |
| ·标准品的构建 | 第62-63页 |
| ·标准曲线的建立及其重复性 | 第63页 |
| ·荧光定量与普通 PCR 灵敏度比较 | 第63页 |
| 3 实验结果及分析 | 第63-67页 |
| ·条件优化及引物特异性和通用性检测 | 第63-64页 |
| ·标准品的构建 | 第64-65页 |
| ·标准曲线的建立及其重复性 | 第65-67页 |
| ·荧光定量 PCR 与普通 PCR 灵敏度比较 | 第67页 |
| 4 讨论 | 第67-69页 |
| 第六章 多重 PCR 和荧光定量 PCR 的临床应用 | 第69-73页 |
| 1 实验材料 | 第69页 |
| ·实验用鱼 | 第69页 |
| ·仪器设备 | 第69页 |
| 2 实验方法 | 第69-70页 |
| ·多重 PCR 检测方法 | 第69页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 | 第69-70页 |
| ·传统分离鉴定方法 | 第70页 |
| 3 结果 | 第70-72页 |
| ·多重 PCR 检测结果 | 第70-71页 |
| ·荧光定量 PCR 检测结果 | 第71页 |
| ·16S rDNA 检测结果 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-73页 |
| 结果与展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 附录 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 个人简历 | 第81页 |
| 学术成果 | 第81页 |
