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阿魏酸酯酶基因的克隆与表达及在植物纤维材料讲解中的应用

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
符号说明及缩略词表第11-12页
第一章 前言第12-28页
   ·阿魏酸酯酶的概述第12-19页
     ·阿魏酸酯酶的产生第12-15页
     ·阿魏酸酯酶的分类第15-17页
     ·阿魏酸酯酶的蛋白的结构与催化机理第17-19页
   ·阿魏酸酯酶的克隆与表达第19-20页
   ·纤维材料降解过程中阿魏酸酯酶与一些多糖降解酶的协同作用第20-21页
   ·阿魏酸酯酶的应用第21-25页
     ·释放阿魏酸第21-22页
     ·造纸行业第22-23页
     ·生物质的转化第23-25页
     ·用于生物合成第25页
     ·动物饲料行业第25页
   ·论文研究立题背景及内容第25-28页
第二章 斜卧青霉阿魏酸酯酶faeA基因在大肠杆菌中的表达第28-42页
   ·材料和方法第28-30页
     ·菌株和质粒第28页
     ·培养基和培养方法第28-29页
     ·常用储备液及缓冲液第29页
     ·试剂和仪器第29-30页
     ·引物设计第30页
   ·实验方法第30-36页
     ·斜卧青霉mRNA的提取与cDNA的合成第30-31页
     ·重组载体pET-faeA的构建第31-33页
     ·重组质粒pET-faeA转化大肠杆菌BL21第33-34页
     ·FaeA在重组大肠杆菌BL21/FaeA中的表达和检测第34-35页
     ·重组大肠杆菌BL21/FaeA诱导产酶条件优化第35-36页
     ·阿魏酸酯酶酶活力测定第36页
   ·结果与分析第36-41页
     ·斜卧青霉mRNA的质量第36-37页
     ·斜卧青霉阿魏酸酯酶faeA基因的克隆及序列分析第37-38页
     ·pET-22(b+)质粒与目的片段的酶切与连接第38页
     ·重组质粒pET-faeA转化大肠杆菌感受态细胞及转化子的筛选第38-39页
     ·重组质粒pET-faeA转化E.coil BL21及在大肠杆菌BL21中的表达结果第39-40页
     ·诱导条件优化第40-41页
   ·小结第41-42页
第三章 斜卧青霉faeA基因在斜卧青霉M12中表达第42-56页
 引言第42页
   ·实验材料第42-44页
     ·菌株和质粒第42页
     ·分子克隆用酶和试剂及仪器第42-43页
     ·培养基和溶液第43-44页
   ·实验方法第44-49页
     ·菌种的活化培养第44页
     ·质粒ANIp8的提取第44页
     ·目的基因faeA的PCR扩增第44-45页
     ·重组质粒ANIp8-faeA的构建第45-46页
     ·大肠杆菌转化子验证第46-47页
     ·重组质粒转化斜卧青霉M12第47-48页
     ·转化子的鉴定第48-49页
   ·结果与分析第49-54页
     ·斜卧青霉114-2faeA基因片段的克隆第49-50页
     ·表达载体ANIp-faeA的构建第50-52页
     ·重组质粒转化斜卧青霉M12及转化子的筛选第52-54页
   ·小结第54-56页
第四章 阿魏酸酯酶在植物纤维材料降解中的作用第56-68页
 引言第56页
   ·材料与方法第56-57页
     ·菌株和原材料第56页
     ·培养基及培养条件第56页
     ·主要仪器第56-57页
     ·主要药品及试剂第57页
   ·实验方法第57-61页
     ·阿魏酸酯酶的生产及纯化第57-58页
     ·酶活测定第58页
     ·植物纤维材料化学成分分析第58-60页
     ·麦秸秆预处理方法第60页
     ·糖化实验第60-61页
     ·红外光谱分析第61页
   ·结果与分析第61-67页
     ·粗酶液的纯化第61-62页
     ·阿魏酸酯酶在处理秸秆酶中的作用效果第62-67页
   ·小结第67-68页
全文总结及工作展望第68-70页
 令文总结第68页
 未来工作展望第68-70页
参考文献第70-76页
致谢第76-78页
学位论文评阅及答辩情况表第78页

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