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小麦盐胁迫响应基因TaERF4的克隆及功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
符号说明第11-12页
第一章 文献综述第12-32页
 1 盐渍土及转基因作物研究第12-13页
 2 非生物胁迫对植物的影响第13-20页
   ·盐胁迫对植物的影响第13-15页
     ·盐肋迫对植物种子萌发及生长发育的影响第13-14页
     ·盐胁迫对植物代谢过程的影响第14-15页
   ·盐胁迫对植物造成影响的作用机理第15-17页
     ·渗透胁迫第15页
     ·离子胁迫第15-16页
     ·氧化胁迫第16-17页
   ·植物的耐盐机制第17-20页
     ·植物自身组织结构及器官功能特性对盐分的适应第17页
     ·渗透调节第17-18页
     ·离子区隔化第18-19页
     ·植物体的拒盐机制第19页
     ·植物体内的活性氧清除机制第19-20页
     ·激素调节第20页
     ·碳代谢途径的改变第20页
 3 ERF转录因子第20-32页
   ·植物转录因子的结构第20-23页
     ·DNA结合结构域第20-21页
     ·转录调控区域第21-22页
     ·核定位信号第22页
     ·寡聚化功能域第22-23页
   ·AP2/EREBP转录因子第23-25页
     ·AP2基因的起源和进化第23-24页
     ·AP2/EREBP家族的分类第24-25页
   ·ERF转录因子第25-32页
     ·ERF家族转录因子的结构第25-28页
     ·ERF转录因子作用位点第28-29页
     ·ERF转录因子的功能第29-32页
       ·在植物防卫反应信号传递中的作用第29-30页
       ·参与植物应对外界胁迫的应答第30-32页
第二章 材料方法第32-60页
 引言第32页
 1 实验材料和试剂第32-38页
   ·植物材料第32页
   ·菌株和载体材料第32-33页
   ·试剂及药品第33-38页
     ·成品试剂及药品第33-34页
     ·各种实验用培养基及试剂的配制第34-38页
 2 实验方法第38-60页
   ·小麦TaERF4基因的cDNA全长克隆及测序第38-41页
     ·小麦TaERF4基因的克隆第38-39页
     ·PCR产物电泳检测及产物回收第39-40页
     ·连接测序载体第40页
     ·CaCl_2法制备E.coli感受态细胞第40-41页
     ·热激法转化E.coli DH10B第41页
     ·测序并获取cDNA全长第41页
   ·胁迫条件下基因表达分析(RT-PCR)第41-45页
     ·实验材料的处理第41-42页
     ·植物总RNA的提取第42-43页
     ·植物总RNA中DNA的去除第43页
     ·RNA反转录合成cDNA第43-44页
     ·RT-PCR反应第44-45页
   ·亚细胞定位研究分析第45-50页
     ·构建瞬时表达载体第45-48页
     ·瞬时表达载体质粒的提取第48-49页
     ·拟南芥原生质体制备及PEG介导的原生质体转化第49-50页
   ·体外转录活性的分析研究第50-53页
     ·酵母表达载体的构建第50-51页
     ·酵母感受态的制备及转化第51-52页
     ·阳性克隆鉴定及转录因子活性研究第52-53页
   ·转基因拟南芥的获取及研究第53-60页
     ·过表达载体的构建第53页
     ·农杆菌感受态的制备第53-54页
     ·农杆菌转化及阳性克隆鉴定第54页
     ·拟南芥的种植第54-55页
     ·拟南芥转化第55页
     ·阳性转基因拟南芥的筛选和鉴定第55-57页
     ·拟南芥表型相关实验第57-60页
第三章 实验结果与分析第60-76页
 1 小麦TaERF4基因的cDNA全长克隆及序列分析第60-63页
 2 小麦TaERF4基因表达模式的分析第63-76页
   ·TaERF4基因在基因芯片中的表达模式分析第63-64页
   ·TaERF4基因表达的RT-PCR分析第64页
   ·TaERF4基因的亚细胞定位研究第64-66页
   ·TaERF4基因酵母表达系统转录激活活性研究第66-67页
   ·拟南芥过表达TaERF4基因转基因株系的研究第67-76页
     ·转基因拟南芥的获取第67-69页
     ·表型分析第69-72页
     ·生理指标测定第72-73页
     ·钠离子含量的测定第73-74页
     ·Marker基因表达分析第74-76页
第四章 讨论第76-80页
参考文献第80-89页
致谢第89-90页
学位论文评阅及答辩情况表第90页

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