摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-13页 |
第一章 绪论 | 第13-43页 |
1. 固氮蓝藻 | 第13-18页 |
2. 乙酰乳酸合酶抑制剂 | 第18-24页 |
3. 乙酰乳酸合酶 | 第24-34页 |
4. 生物信息学方法与蛋白质功能研究 | 第34-40页 |
5. 论文选题依据及意义 | 第40-43页 |
第二章 ALS 抑制剂对固氮鱼腥藻的毒性研究 | 第43-64页 |
1. 材料与方法 | 第43-47页 |
2. 结果与分析 | 第47-63页 |
·丙酮对固氮鱼腥藻的生长效应 | 第47-49页 |
·苄嘧磺隆对固氮鱼腥藻的生长效应 | 第49-53页 |
·不同光照条件下苄嘧磺隆对固氮鱼腥藻的生长效应 | 第53-63页 |
3. 小结与讨论 | 第63-64页 |
第三章 固氮鱼腥藻 ALS 基因的克隆与测序 | 第64-80页 |
1. 材料与方法 | 第64-71页 |
2. 结果与分析 | 第71-79页 |
·总 DNA 的提取检测 | 第71-72页 |
·固氮鱼腥藻 A. azotica ALS 基因的 PCR 扩增 | 第72页 |
·PCR 产物的胶回收 | 第72-73页 |
·ALS 基因的连接克隆及重组子的检测 | 第73-74页 |
·固氮鱼腥藻 A. azotica ALS 基因(ilvB)的测序分析 | 第74-77页 |
·ilvB 序列信息递交 | 第77-79页 |
3. 小结与讨论 | 第79-80页 |
第四章 ALS 酶蛋白生物信息学分析 | 第80-97页 |
1. 材料与方法 | 第80-81页 |
2. 结果与分析 | 第81-96页 |
·A. azotica ALS 基因的核苷酸序列分析 | 第81-82页 |
·A. azotica ALS 理化性质及二级结构预测 | 第82-85页 |
·A. azotica ALS 氨基酸序列的比对 | 第85-87页 |
·A. azotica ALS 系统进化树分析 | 第87-89页 |
·A. azotica ALS 蛋白功能结构域的预测 | 第89页 |
·A. azotica ALS 蛋白三维结构的预测 | 第89-91页 |
·蛋白质结构模型合理性评估 | 第91-96页 |
3. 小结与讨论 | 第96-97页 |
第五章 固氮鱼腥藻 ALS 的外源表达与检测 | 第97-114页 |
1. 材料与方法 | 第97-105页 |
2. 结果与分析 | 第105-112页 |
·去终止子 ALS 基因的克隆 | 第105页 |
·重组表达载体的构建与鉴定 | 第105-106页 |
·IPTG 诱导表达产物的检测 | 第106-109页 |
·重组菌诱导表达条件的优化 | 第109页 |
·表达产物的纯化 | 第109-110页 |
·蛋白质浓度与 OD 值的相关性 | 第110-111页 |
·Acetoin 浓度与 OD 值的相关性 | 第111-112页 |
·ALS 酶活性测定结果 | 第112页 |
3. 小结与讨论 | 第112-114页 |
第六章 ALS 酶活性部位分析及敏感性缺失突变体的研究 | 第114-134页 |
1. 材料与方法 | 第114-116页 |
2. 结果与分析 | 第116-133页 |
·A. azotica ALS 与抑制剂的分子对接 | 第116-131页 |
·A. azotica ALS PCR 定点突变研究 | 第131-133页 |
3. 小结与讨论 | 第133-134页 |
第七章 结论与展望 | 第134-138页 |
1. 结论 | 第134-135页 |
2. 展望 | 第135-138页 |
参考文献 | 第138-146页 |
致谢 | 第146-147页 |
攻读硕士期间已发表或录用的论文及专利 | 第147-149页 |