| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-49页 |
| ·结核病与结核疫苗 | 第15-39页 |
| ·结核病与结核杆菌 | 第15-18页 |
| ·结核病现状 | 第15-16页 |
| ·结核杆菌 | 第16-18页 |
| ·抗结核杆菌免疫作用机制 | 第18-29页 |
| ·免疫细胞 | 第18-25页 |
| ·免疫分子 | 第25-27页 |
| ·免疫记忆 | 第27-29页 |
| ·结核疫苗研究进展 | 第29-39页 |
| ·卡介苗 | 第29-31页 |
| ·新型结核疫苗 | 第31-34页 |
| ·Prime-boost免疫策略 | 第34-36页 |
| ·结核疫苗的治疗作用 | 第36-37页 |
| ·评价结核疫苗的动物模型 | 第37-39页 |
| ·结核杆菌抗原 | 第39-42页 |
| ·概述 | 第39-40页 |
| ·Ag85B | 第40-41页 |
| ·ESAT6 | 第41-42页 |
| ·病毒疫苗载体 | 第42-45页 |
| ·概述 | 第42页 |
| ·痘病毒疫苗载体 | 第42-43页 |
| ·腺病毒疫苗载体 | 第43-45页 |
| ·论文的立题依据及设计 | 第45-49页 |
| ·立题依据与创新点 | 第45-46页 |
| ·本论文要解决的问题 | 第46页 |
| ·实验思路与设计 | 第46-49页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第49-69页 |
| ·实验材料 | 第49-54页 |
| ·菌株、细胞、质粒、病毒和动物 | 第49-50页 |
| ·抗体 | 第50页 |
| ·肽合成 | 第50页 |
| ·引物 | 第50-52页 |
| ·主要试剂 | 第52-53页 |
| ·常规试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53-54页 |
| ·实验方法 | 第54-69页 |
| ·重叠延伸PCR法合成Ag85B-ESAT6 融合基因 | 第54-56页 |
| ·PCR合成目的片段 | 第54-55页 |
| ·目的片段回收 | 第55-56页 |
| ·目的片段鉴定和连接 | 第56页 |
| ·目的片段表达检测 | 第56页 |
| ·质粒的构建与制备 | 第56-57页 |
| ·pSC11-Ag85B-ESAT6 的构建与制备 | 第56页 |
| ·pDC316-Ag85B-ESAT6 的构建与制备 | 第56-57页 |
| ·蛋白表达、纯化及抗体制备 | 第57-58页 |
| ·pRSETB-ESAT6 表达质粒的构建 | 第57页 |
| ·ESAT6 原核表达、纯化和Western blot鉴定 | 第57页 |
| ·ESAT6 多克隆抗体制备 | 第57-58页 |
| ·Ag85B多克隆抗体制备 | 第58页 |
| ·检测用蛋白的制备 | 第58页 |
| ·细胞培养基本操作 | 第58-59页 |
| ·细胞复苏 | 第58页 |
| ·细胞冻存 | 第58页 |
| ·细胞培养与转染 | 第58-59页 |
| ·BCG与rBCG的构建、扩增、纯化及鉴定 | 第59页 |
| ·rBCG的构建 | 第59页 |
| ·BCG与rBCG的扩增 | 第59页 |
| ·BCG与rBCG的纯化 | 第59页 |
| ·BCG与rBCG的菌落数测定 | 第59页 |
| ·BCG与rBCG中Ag85B表达量分析 | 第59页 |
| ·MVA85B-E6 的构建、扩增、纯化及鉴定 | 第59-61页 |
| ·MVA85B-E6 的构建、筛选、扩增 | 第59-60页 |
| ·MVA85B-E6 的纯化 | 第60页 |
| ·MVA85B-E6 的滴度测定 | 第60-61页 |
| ·MVA85B-E6 的鉴定 | 第61页 |
| ·AD85B-E6 的构建、扩增、纯化及鉴定 | 第61-63页 |
| ·AD85B-E6 的构建、筛选、扩增 | 第61-62页 |
| ·AD85B-E6 的纯化 | 第62页 |
| ·AD85B-E6 的滴度测定 | 第62页 |
| ·AD85B-E6 的鉴定 | 第62-63页 |
| ·免疫效果评价 | 第63-67页 |
| ·脾细胞处理方案 | 第63页 |
| ·IFN-γ ELISOPT实验 | 第63-64页 |
| ·细胞杀伤（CTL）实验 | 第64-65页 |
| ·细胞因子检测（TH1/TH2）实验 | 第65页 |
| ·抗体检测实验 | 第65-66页 |
| ·流式细胞（Flow Cytometry, FCM）实验 | 第66页 |
| ·免疫及攻毒 | 第66页 |
| ·组织细菌载量实验 | 第66-67页 |
| ·病理实验 | 第67页 |
| ·统计学处理方法 | 第67-69页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第69-107页 |
| ·Ag85B-ESAT6 融合基因的合成及鉴定 | 第69-72页 |
| ·重叠延伸PCR法合成Ag85B-ESAT6 融合基因 | 第69页 |
| ·Ag85B-ESAT6 融合基因的鉴定 | 第69-71页 |
| ·Ag85B-ESAT6 融合基因的表达分析 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| ·穿梭质粒的构建 | 第72-73页 |
| ·pSC11-Ag85B-ESAT6 的构建与鉴定 | 第72页 |
| ·pDC316-Ag85B-ESAT6 的构建与鉴定 | 第72-73页 |
| ·小结 | 第73页 |
| ·蛋白表达、纯化及抗体制备 | 第73-77页 |
| ·ESAT6 多克隆抗体制备 | 第73-76页 |
| ·Ag85B、ESAT6、Ag85B-ESAT6 重组蛋白制备 | 第76页 |
| ·小结 | 第76-77页 |
| ·BCG与rBCG的扩增、纯化及菌落数测定 | 第77-79页 |
| ·BCG的扩增、纯化及菌落数测定 | 第77页 |
| ·rBCG的扩增、纯化及菌落数测定 | 第77-78页 |
| ·Ag85B表达量比较 | 第78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| ·MVA85B-E6 的构建、扩增、纯化及鉴定 | 第79-81页 |
| ·MVA85B-E6 的构建、扩增、纯化及滴度测定 | 第79-80页 |
| ·MVA85B-E6 的鉴定 | 第80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| ·AD85B-E6 的构建、扩增、纯化及鉴定 | 第81-83页 |
| ·AD85B-E6 的构建、扩增、纯化及滴度测定 | 第81-82页 |
| ·AD85B-E6 的鉴定 | 第82页 |
| ·小结 | 第82-83页 |
| ·免疫效果评价 | 第83-104页 |
| ·BCG与rBCG的免疫原性研究 | 第83-85页 |
| ·BCG与rBCG的免疫原性 | 第83-84页 |
| ·动物种属对免疫原性的影响 | 第84页 |
| ·本部分实验结论 | 第84-85页 |
| ·MVA85B-E6 的免疫原性研究 | 第85-87页 |
| ·MVA85B-E6 的免疫原性 | 第85页 |
| ·免疫剂量与途径对免疫原性的影响 | 第85-86页 |
| ·本部分实验结论 | 第86-87页 |
| ·AD85B-E6 的免疫原性研究 | 第87-89页 |
| ·AD85B-E6 的免疫原性 | 第87-88页 |
| ·免疫剂量对免疫原性的影响 | 第88页 |
| ·本部分实验结论 | 第88-89页 |
| ·各疫苗单次免疫引发的免疫反应及保护力研究 | 第89-92页 |
| ·各疫苗单次免疫引发的免疫反应比较 | 第89页 |
| ·各疫苗单次免疫产生的免疫保护力比较 | 第89-90页 |
| ·病理学评价 | 第90-91页 |
| ·本部分实验结论 | 第91-92页 |
| ·BCG Prime-boost免疫效果及保护力研究 | 第92-97页 |
| ·Prime-boost免疫方案 | 第92页 |
| ·体液免疫反应特征 | 第92-93页 |
| ·IFN-γ反应特征 | 第93页 |
| ·FCM T细胞亚群分析 | 第93-94页 |
| ·细胞杀伤反应特征 | 第94-95页 |
| ·免疫保护力研究 | 第95页 |
| ·组织病理分析 | 第95-96页 |
| ·本部分实验结论 | 第96-97页 |
| ·rBCG Prime-boost免疫效果及保护力研究 | 第97-101页 |
| ·Prime-boost免疫方案 | 第97页 |
| ·体液免疫反应特征 | 第97-98页 |
| ·FCM T细胞亚群分析 | 第98-99页 |
| ·免疫保护力研究 | 第99页 |
| ·组织病理分析 | 第99-100页 |
| ·本部分实验结论 | 第100-101页 |
| ·病毒疫苗治疗效果探索 | 第101-103页 |
| ·免疫治疗方案 | 第101页 |
| ·治疗模型的建立 | 第101-102页 |
| ·组织细菌载量变化 | 第102页 |
| ·组织病理分析 | 第102页 |
| ·本部分实验结论 | 第102-103页 |
| ·小结 | 第103-104页 |
| ·讨论 | 第104-107页 |
| 结论 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-115页 |
| 作者简历及攻读博士学位期间发表的论文 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
