| 项目来源 | 第1-3页 |
| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 缩写词 (Abbreviation) | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1 植物原生质体分离和培养研究进展 | 第14-17页 |
| ·原生质体分离材料 | 第14-15页 |
| ·原生质体分离方法 | 第15-16页 |
| ·原生质体培养方法 | 第16-17页 |
| 2 体细胞杂交研究进展 | 第17-22页 |
| ·体细胞杂交的方法 | 第17-19页 |
| ·融合体系的类型 | 第19-20页 |
| ·杂种细胞的筛选 | 第20-21页 |
| ·体细胞杂种的鉴定 | 第21-22页 |
| 3 紫花苜蓿体细胞杂交研究进展 | 第22-24页 |
| 4 立项背景 | 第24-26页 |
| 5 本研究的目的和意义 | 第26页 |
| 6 研究内容和技术路线 | 第26-28页 |
| 第二章 苜蓿原生质体分离和培养 | 第28-52页 |
| 1 材料和方法 | 第29-34页 |
| ·试验材料 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·愈伤组织诱导培养基 | 第29页 |
| ·原生质体培养基 | 第29页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-33页 |
| ·外植体处理和无菌苗培养 | 第30页 |
| ·愈伤组织的诱导和继代 | 第30-31页 |
| ·原生质体的分离和纯化 | 第31-33页 |
| ·酶解时间的选择 | 第32页 |
| ·酶液组合的选择 | 第32页 |
| ·渗透压稳定剂浓度的选择 | 第32页 |
| ·预处理措施的选择 | 第32-33页 |
| ·愈伤组织继代培养时间的选择 | 第33页 |
| ·原生质体培养和再生 | 第33页 |
| ·测定指标及方法 | 第33-34页 |
| ·愈伤组织的出愈率 | 第33页 |
| ·原生质体的产量 | 第33-34页 |
| ·原生质体的活力 | 第34页 |
| ·数据分析 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-45页 |
| ·苜蓿愈伤组织的诱导 | 第34-37页 |
| ·酶解时间对不同苜蓿品种原生质体分离效果的影响 | 第37-38页 |
| ·酶液组合对不同苜蓿品种原生质体分离效果的影响 | 第38-39页 |
| ·渗透压稳定剂浓度对不同苜蓿品种原生质体分离效果的影响 | 第39-41页 |
| ·预处理条件对不同苜蓿品种原生质体分离效果的影响 | 第41-42页 |
| ·继代培养时间对不同苜蓿品种原生质体分离效果的影响 | 第42-43页 |
| ·不同培养方法对苜蓿品种原生质体培养效果的影响 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-50页 |
| ·苜蓿愈伤组织的诱导 | 第45-46页 |
| ·不同苜蓿基因型材料对原生质体分离和培养效果的影响 | 第46页 |
| ·供体材料状态对苜蓿原生质体分离和培养效果的影响 | 第46-47页 |
| ·酶解时间和酶液组合对苜蓿原生质体分离和培养效果的影响 | 第47-48页 |
| ·渗透压稳定剂对苜蓿原生质体分离和培养效果的影响 | 第48-49页 |
| ·不同培养基和培养方法对苜蓿原生质体培养和再生效果的影响 | 第49-50页 |
| 4 小结 | 第50-52页 |
| 第三章 百脉根原生质体分离和培养 | 第52-68页 |
| 1 材料和方法 | 第53-55页 |
| ·试验材料 | 第53页 |
| ·材料 | 第53页 |
| ·培养基 | 第53页 |
| ·愈伤组织诱导培养基 | 第53页 |
| ·原生质体培养基 | 第53页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-55页 |
| ·外植体处理和无菌苗培养 | 第53页 |
| ·愈伤组织的诱导和继代 | 第53-54页 |
| ·原生质体的分离和纯化 | 第54页 |
| ·原生质体培养和再生 | 第54-55页 |
| ·测定指标及方法 | 第55页 |
| ·愈伤组织的出愈率 | 第55页 |
| ·原生质体的产量 | 第55页 |
| ·原生质体的活力 | 第55页 |
| ·数据分析 | 第55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-63页 |
| ·适于百脉根原生质体分离的愈伤组织细胞系的建立 | 第55-57页 |
| ·酶解时间对百脉根原生质体分离效果的影响 | 第57-58页 |
| ·酶液组合对百脉根原生质体分离效果的影响 | 第58-59页 |
| ·渗透压稳定剂浓度对百脉根原生质体分离效果的影响 | 第59-60页 |
| ·预处理条件对百脉根愈伤组织原生质体分离效果的影响 | 第60-61页 |
| ·继代培养时间对百脉根愈伤组织原生质体分离效果的影响 | 第61-62页 |
| ·百脉根原生质的培养及植株再生 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| ·百脉根愈伤组织的诱导 | 第63-64页 |
| ·不同供体材料对百脉根原生质体分离及培养效果的影响 | 第64-65页 |
| ·百脉根原生质体分离的酶液组成、酶解时间及渗透压的确定 | 第65页 |
| ·预处理措施和继代培养时间对百脉根愈伤组织原生质体分离效果的影响 | 第65-66页 |
| 4 小结 | 第66-68页 |
| 第四章 紫花苜蓿和百脉根原生质体融合及培养 | 第68-84页 |
| 1 材料和方法 | 第69-73页 |
| ·试验材料 | 第69页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·培养基 | 第69页 |
| ·愈伤组织诱导培养基 | 第69页 |
| ·原生质体融合产物培养基 | 第69页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第69页 |
| ·试验方法 | 第69-73页 |
| ·原生质体的分离与纯化 | 第69-70页 |
| ·原生质体的融合 | 第70-73页 |
| ·体细胞杂种细胞的筛选体系 | 第70页 |
| ·融合前原生质体的钝化处理 | 第70-71页 |
| ·PEG-高 Ca-高 pH 法诱导融合 | 第71-72页 |
| ·原生质体细胞核染色 | 第72页 |
| ·异源融合体的鉴别 | 第72-73页 |
| ·融合产物的培养 | 第73页 |
| ·指标测定 | 第73页 |
| ·原生质体的活力 | 第73页 |
| ·原生质体植板率的测定 | 第73页 |
| ·原生质体异源融合率的测定 | 第73页 |
| ·统计分析 | 第73页 |
| 2 结果与分析 | 第73-80页 |
| ·IOA 和 R-6G 预处理对紫花苜蓿和百脉根原生质体生长和再生的影响 | 第73-76页 |
| ·不同荧光染料对苜蓿原生质体细胞核染色效果的影响 | 第76-78页 |
| ·PEG 浓度对紫花苜蓿和百脉根细胞融合的影响 | 第78-79页 |
| ·融合细胞的培养和再生 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-83页 |
| ·代谢互补抑制剂对紫花苜蓿和百脉根原生质体生长和融合的影响 | 第80-81页 |
| ·不同荧光染色剂对苜蓿原生质体细胞核染色效果的影响 | 第81-82页 |
| ·PEG 浓度对紫花苜蓿和百脉根融合效果的影响 | 第82-83页 |
| 4 小结 | 第83-84页 |
| 第五章 结论 | 第84-86页 |
| 第六章 创新点与展望 | 第86-87页 |
| 附表Ⅰ | 第87-88页 |
| 附表Ⅱ | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 作者简介 | 第104-105页 |
| 导师简介 | 第105-106页 |
