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集胞藻6803中S2P同源蛋白的定位与功能初探

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩略语表第8-12页
第一章 绪论第12-26页
   ·S2P 蛋白酶概述第12-15页
     ·S2P 蛋白酶参与的生理调节途径第13-14页
     ·S2P 蛋白酶的结构研究第14页
     ·总结及展望第14-15页
   ·蓝藻概述第15-16页
   ·蓝藻基因工程第16-18页
     ·蓝藻基因转移系统第16-17页
     ·蓝藻基因整合平台第17-18页
   ·集胞藻 PCC6803 概述第18-19页
   ·集胞藻 6803 的遗传操作第19-21页
     ·集胞藻 6803 转移系统的建立第19-20页
     ·集胞藻 PCC6803 突变体的获取第20-21页
   ·绿色荧光蛋白概述第21-24页
     ·GFP 的性质第21页
     ·GFP 的优点第21-22页
     ·GFP 的应用第22-23页
     ·GFP 的突变型第23页
     ·问题和展望第23-24页
   ·本论文研究意义和研究内容第24-26页
     ·研究背景及研究意义第24页
     ·主要研究内容第24-26页
第二章 集胞藻 6803 中 S2P 同源蛋白 SLR0643 和 SLL0862 的定位第26-62页
   ·引言第26页
   ·实验材料与仪器第26-30页
     ·实验材料第26-30页
     ·主要仪器第30页
   ·实验方法第30-44页
     ·培养条件第30-31页
     ·菌和藻的保存第31页
     ·感受态细胞的制备第31-32页
     ·质粒提取第32页
     ·集胞藻 PCC 6803 基因组 DNA 提取第32-33页
     ·PCR 引物的设计与合成第33页
     ·PCR 产物扩增第33-34页
     ·琼脂糖凝胶电泳第34-35页
     ·PCR 产物割胶回收纯化第35-36页
     ·PCR 产物与载体连接第36-38页
     ·转化第38页
     ·重组质粒鉴定第38-39页
     ·藻转化及转基因藻单藻落的获得第39页
     ·RT-PCR 反应第39-42页
     ·集胞藻 6803 总膜蛋白和可溶性蛋白的提取第42-43页
     ·SDS-PAGE 电泳第43页
     ·Western blot第43-44页
     ·激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在转基因藻中的表达第44页
   ·结果与讨论第44-60页
     ·EGFP 同源重组质粒的构建策略第44-45页
     ·目的基因获取第45-47页
     ·同源重组质粒 PsbA2-0643GFP 和 PsbA2-0862GFP 的构建流程第47-50页
     ·转基因藻的构建和分子鉴定第50-52页
     ·RT-PCR 鉴定 egfp 标记基因在转基因藻转录水平的表达第52-55页
     ·激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在转基因藻中的表达第55页
     ·Western blot 检测融合蛋白在转基因藻中的表达水平第55-60页
   ·本章小结第60-62页
第三章 集胞藻 6803 中 S2P 同源蛋白 SLL0862 的功能初探第62-80页
   ·引言第62页
   ·实验材料与仪器第62-66页
     ·实验材料第62-65页
     ·主要仪器第65-66页
   ·实验方法第66-68页
     ·生长曲线(growth curve)测定第66页
     ·细胞计数第66页
     ·全细胞吸收光谱的测定第66页
     ·叶绿素 a 和类胡萝卜素测定第66-67页
     ·藻蓝蛋白提取及测定第67页
     ·实际光量子产量(yield)和相对电子传递速率(ETR)的测量第67-68页
   ·结果与讨论第68-78页
     ·sll0862 缺失突变体的构建和鉴定第68-71页
     ·正常生长条件下 sll0862 突变体表型研究第71-74页
     ·逆境下 sll0862 突变体表型研究第74-78页
   ·本章小结第78-80页
结论与展望第80-83页
 1.结论第80-81页
 2.创新之处第81页
 3.展望第81-83页
参考文献第83-93页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第93-94页
致谢第94-95页
答辩委员会对论文的评定意见第95页

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