| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第8-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| ·S2P 蛋白酶概述 | 第12-15页 |
| ·S2P 蛋白酶参与的生理调节途径 | 第13-14页 |
| ·S2P 蛋白酶的结构研究 | 第14页 |
| ·总结及展望 | 第14-15页 |
| ·蓝藻概述 | 第15-16页 |
| ·蓝藻基因工程 | 第16-18页 |
| ·蓝藻基因转移系统 | 第16-17页 |
| ·蓝藻基因整合平台 | 第17-18页 |
| ·集胞藻 PCC6803 概述 | 第18-19页 |
| ·集胞藻 6803 的遗传操作 | 第19-21页 |
| ·集胞藻 6803 转移系统的建立 | 第19-20页 |
| ·集胞藻 PCC6803 突变体的获取 | 第20-21页 |
| ·绿色荧光蛋白概述 | 第21-24页 |
| ·GFP 的性质 | 第21页 |
| ·GFP 的优点 | 第21-22页 |
| ·GFP 的应用 | 第22-23页 |
| ·GFP 的突变型 | 第23页 |
| ·问题和展望 | 第23-24页 |
| ·本论文研究意义和研究内容 | 第24-26页 |
| ·研究背景及研究意义 | 第24页 |
| ·主要研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 集胞藻 6803 中 S2P 同源蛋白 SLR0643 和 SLL0862 的定位 | 第26-62页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料与仪器 | 第26-30页 |
| ·实验材料 | 第26-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-44页 |
| ·培养条件 | 第30-31页 |
| ·菌和藻的保存 | 第31页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·质粒提取 | 第32页 |
| ·集胞藻 PCC 6803 基因组 DNA 提取 | 第32-33页 |
| ·PCR 引物的设计与合成 | 第33页 |
| ·PCR 产物扩增 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
| ·PCR 产物割胶回收纯化 | 第35-36页 |
| ·PCR 产物与载体连接 | 第36-38页 |
| ·转化 | 第38页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第38-39页 |
| ·藻转化及转基因藻单藻落的获得 | 第39页 |
| ·RT-PCR 反应 | 第39-42页 |
| ·集胞藻 6803 总膜蛋白和可溶性蛋白的提取 | 第42-43页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第43页 |
| ·Western blot | 第43-44页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在转基因藻中的表达 | 第44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-60页 |
| ·EGFP 同源重组质粒的构建策略 | 第44-45页 |
| ·目的基因获取 | 第45-47页 |
| ·同源重组质粒 PsbA2-0643GFP 和 PsbA2-0862GFP 的构建流程 | 第47-50页 |
| ·转基因藻的构建和分子鉴定 | 第50-52页 |
| ·RT-PCR 鉴定 egfp 标记基因在转基因藻转录水平的表达 | 第52-55页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在转基因藻中的表达 | 第55页 |
| ·Western blot 检测融合蛋白在转基因藻中的表达水平 | 第55-60页 |
| ·本章小结 | 第60-62页 |
| 第三章 集胞藻 6803 中 S2P 同源蛋白 SLL0862 的功能初探 | 第62-80页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·实验材料与仪器 | 第62-66页 |
| ·实验材料 | 第62-65页 |
| ·主要仪器 | 第65-66页 |
| ·实验方法 | 第66-68页 |
| ·生长曲线(growth curve)测定 | 第66页 |
| ·细胞计数 | 第66页 |
| ·全细胞吸收光谱的测定 | 第66页 |
| ·叶绿素 a 和类胡萝卜素测定 | 第66-67页 |
| ·藻蓝蛋白提取及测定 | 第67页 |
| ·实际光量子产量(yield)和相对电子传递速率(ETR)的测量 | 第67-68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-78页 |
| ·sll0862 缺失突变体的构建和鉴定 | 第68-71页 |
| ·正常生长条件下 sll0862 突变体表型研究 | 第71-74页 |
| ·逆境下 sll0862 突变体表型研究 | 第74-78页 |
| ·本章小结 | 第78-80页 |
| 结论与展望 | 第80-83页 |
| 1.结论 | 第80-81页 |
| 2.创新之处 | 第81页 |
| 3.展望 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-93页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-95页 |
| 答辩委员会对论文的评定意见 | 第95页 |