摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
图和附表清单 | 第12-13页 |
英文縮略语 | 第13-14页 |
前言 | 第14-16页 |
材料方法 | 第16-39页 |
1 材料 | 第16-23页 |
·主要试剂 | 第16-17页 |
·主要仪器设备 | 第17-18页 |
·菌株质粒细胞基本情况 | 第18-20页 |
·常用试剂的配置 | 第20-23页 |
2 实验方法 | 第23-38页 |
·实验流程 | 第23-25页 |
·细菌实验及质粒提取鉴定 | 第25-28页 |
·细胞培养基本操作 | 第28-29页 |
·细胞瞬时转染 | 第29-30页 |
·RNA提取及其逆转录 | 第30-32页 |
·PCR扩增 | 第32-34页 |
·蛋白提取及定量 | 第34-35页 |
·WESTERN BLOT实验 | 第35-36页 |
·嘌呤霉素筛选浓度确定实验 | 第36-37页 |
·细胞稳定转染 | 第37页 |
·嘌吟霉素筛选稳定转染的细胞 | 第37-38页 |
·MTT实验细胞饥饿同步化细胞 | 第38页 |
3 统计学分析 | 第38-39页 |
结果 | 第39-53页 |
1 PLKO.1 质粒提取双酶切鉴定结果 | 第39页 |
2 PLKO.1 质粒序列测定及比对 | 第39-41页 |
3 质粒浓度测定及纯度分析 | 第41-42页 |
4 最佳沉默效率质粒的筛选 | 第42-47页 |
·Bradford方法测定瞬时转染细胞所得蛋白浓度 | 第42-43页 |
·瞬时转染细胞各组蛋白表达量比较 | 第43-45页 |
·瞬时转染细胞各组RNA提取 | 第45页 |
·总RNA定量 | 第45-46页 |
·CIP2A基因扩增 | 第46-47页 |
5 嘌呤霉素最佳筛选浓度的结果测定 | 第47页 |
6 稳定转染获得稳定表达的细胞株 | 第47-50页 |
·稳定转染细胞株提蛋白做WESTERN BLOT实验 | 第47-49页 |
·RT-PCR | 第49-50页 |
7 SIRNA沉默CIP2A基因之后对HEPG2细胞增殖活力的影响 | 第50-53页 |
讨论 | 第53-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
综述 | 第62-76页 |
1 CIP2A蛋白的结构和功能以及与肿瘤的关系 | 第62-63页 |
2 C-MYC蛋白的结构和功能以及与肿瘤的关系 | 第63-65页 |
3、PP2A蛋白的结构和功能以及与肿瘤的关系 | 第65-66页 |
4、CIP2A、PP2A和C-MYC之间相互作用关系 | 第66-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第76-77页 |
致谢 | 第77页 |