| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-17页 |
| ·背景介绍 | 第8页 |
| ·微小RNA的研究进展 | 第8-11页 |
| ·miRNA的发现 | 第8-9页 |
| ·miRNA的鉴别 | 第9-10页 |
| ·miRNA作用机制 | 第10页 |
| ·miRNA的靶点研究 | 第10-11页 |
| ·miRNA的表达和功能 | 第11页 |
| ·miRNA在肝病中的作用和应用进展 | 第11-13页 |
| ·miRNA与肝脏 | 第11-12页 |
| ·miRNA和肝癌 | 第12-13页 |
| ·miRNA-21在肝癌中的研究进展 | 第13-16页 |
| ·miRNA-21的定位与表达 | 第13-14页 |
| ·miRNA-21对靶基因的调控 | 第14-16页 |
| ·与肿瘤药物敏感性 | 第16页 |
| ·本研究的内容及目的 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·材料选择 | 第17页 |
| ·试剂与仪器 | 第17-21页 |
| ·主要试剂 | 第17-19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·试剂配制 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-29页 |
| ·RNA提取 | 第21-22页 |
| ·Total RNA的定量 | 第22页 |
| ·RNA的反转录 | 第22页 |
| ·荧光定量PCR | 第22-23页 |
| ·PAGE/Northern blot分析 | 第23页 |
| ·RNA干扰质粒的构建 | 第23-25页 |
| ·细胞的复苏及培养 | 第25页 |
| ·12%SDS-PAGE蛋白电泳 | 第25页 |
| ·蛋白免疫印记 | 第25-26页 |
| ·报告基因载体的构建及分析 | 第26页 |
| ·腺病毒过表达miRNA-21载体的构建及细胞感染 | 第26-27页 |
| ·流式细胞仪分析 | 第27页 |
| ·体外细胞侵袭实验 | 第27-28页 |
| ·统计学分析 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-39页 |
| ·miRNA-21的实时荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第29-30页 |
| ·miRNA-21在癌旁与癌组织中的表达 | 第30-31页 |
| ·miRNA-21在肝癌组织及肝癌细胞株中的表达 | 第31-32页 |
| ·miRNA-21的靶基因预测 | 第32-34页 |
| ·miRNA-21的靶基因确定 | 第34-37页 |
| ·体外细胞侵袭实验 | 第37-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-47页 |
| 附录 | 第47页 |