| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| ·山核桃研究进展 | 第10-11页 |
| ·植物花发育分子机制研究进展 | 第11-13页 |
| ·春化作用分子机理研究现状 | 第13-18页 |
| ·春化作用与光周期的关系 | 第13-14页 |
| ·春化作用与 GA 途径的关系 | 第14-15页 |
| ·春化作用与 FLC 的组蛋白修饰 | 第15页 |
| ·FLC 与 DNA 甲基化的关系 | 第15-16页 |
| ·FLC 在植物春化过程中的调控 | 第16-18页 |
| ·植物成花基因表达分析技术 | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量 PCR 技术及应用 | 第18页 |
| ·荧光原位杂交技术及应用 | 第18-19页 |
| ·研究目的及意义 | 第19-20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| 2 山核桃春化作用关键基因 FLC 鉴定与特征分析 | 第21-42页 |
| ·材料及方法 | 第21-28页 |
| ·实验材料、试剂及仪器 | 第21-22页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·实验试剂 | 第22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-28页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·RNA 质量与浓度检测 | 第23页 |
| ·山核桃花芽 cDNA 的合成 | 第23-24页 |
| ·引物设计 | 第24页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第24-25页 |
| ·3'- RACE 检测其序列的完整性 | 第25-26页 |
| ·凝胶电泳条带纯化回收 | 第26页 |
| ·DNA 回收片段与 PMD19-T 载体的连接 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·连接产物转化 DH5α感受态细胞 | 第27页 |
| ·阳性克隆的筛选与序列测定 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-39页 |
| ·山核桃花芽 RNA 提取分析 | 第28-29页 |
| ·反转录 cDNA 的 Actin 检测 | 第29页 |
| ·山核桃 FLC 基因扩增与序列分析 | 第29-39页 |
| ·结论与讨论 | 第39-42页 |
| 3 山核桃 CcFLC mRNA 不同发育时期表达分析 | 第42-53页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·植物材料 | 第42-43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·山核桃总 RNA 的提取 | 第43页 |
| ·除去 RNA 中的基因组 DNA | 第43页 |
| ·引物设计与合成 | 第43-44页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第44页 |
| ·Real-time RT-PCR | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-50页 |
| ·采样 | 第44-46页 |
| ·山核桃总 RNA 提取分析 | 第46-47页 |
| ·CcFLC 在山核桃不同时期不同组织的表达分析 | 第47-50页 |
| ·结论与讨论 | 第50-53页 |
| 4 山核桃 CcFLC 基因组织原位杂交分析 | 第53-66页 |
| ·材料与方法 | 第53-60页 |
| ·植物材料 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53-54页 |
| ·仪器 | 第54页 |
| ·方法 | 第54-60页 |
| ·山核桃不同组织的固定与包埋 | 第54页 |
| ·RNA 探针的制备 | 第54-57页 |
| ·载玻片处理和切片 | 第57-58页 |
| ·杂交与显色 | 第58-60页 |
| ·拍照与处理 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-64页 |
| ·RNA 探针的 PCR 扩增 | 第60页 |
| ·质粒模板线性化 | 第60页 |
| ·地高辛 RNA 探针的体外转录合成结果 | 第60-61页 |
| ·探针质量的检测结果 | 第61页 |
| ·不同组织切片的制备 | 第61-62页 |
| ·CcFLC 不同组织原位杂交结果分析 | 第62-64页 |
| ·结论与讨论 | 第64-66页 |
| 5 结论与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 附录 本文中实验所用试剂的配制 | 第76-80页 |
| 作者简介 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82页 |