| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-37页 |
| ·神经酰胺 | 第15-19页 |
| ·神经酰胺的合成与代谢 | 第15-16页 |
| ·神经酰胺的生物学作用 | 第16-17页 |
| ·神经酰胺与细胞凋亡的关系 | 第17-18页 |
| ·神经酰胺与结肠癌 | 第18-19页 |
| ·谷胱甘肽硫转移酶 | 第19-24页 |
| ·GSTs一般特性 | 第19-21页 |
| ·hGSTA一般特性 | 第21-22页 |
| ·GSTs与肿瘤的关系 | 第22-24页 |
| ·细胞凋亡研究进展 | 第24-27页 |
| ·Caspase-3与细胞凋亡 | 第24-25页 |
| ·Bcl-2家族与细胞凋亡 | 第25-26页 |
| ·Caspase-3与Bcl-2关系 | 第26-27页 |
| ·细胞凋亡与肿瘤 | 第27页 |
| ·RNA干扰技术的研究进展 | 第27-35页 |
| ·RNAi的发现和发展 | 第27-28页 |
| ·RNAi的基本原理 | 第28页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第28-29页 |
| ·RNAi的作用特点 | 第29页 |
| ·siRNA的设计 | 第29-30页 |
| ·siRNA的制备方法 | 第30-32页 |
| ·siRNA转染方法 | 第32-33页 |
| ·RNAi的应用 | 第33-35页 |
| ·研究的目的和意义 | 第35-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-53页 |
| ·试验材料 | 第37-40页 |
| ·细胞系 | 第37页 |
| ·药品与试剂 | 第37-38页 |
| ·主要仪器设备 | 第38-39页 |
| ·主要溶液配制 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40-53页 |
| ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响 | 第40-45页 |
| ·结肠癌细胞不同生长时期GSTA1的表达与活性 | 第45-46页 |
| ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1表达和活性的影响 | 第46-47页 |
| ·GSTA1 siRNA的设计合成及转染条件优化 | 第47-48页 |
| ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响 | 第48-49页 |
| ·GSTA1-pcDNA3.1/V5-His TOPO真核表达载体的构建及转染条件优化 | 第49-51页 |
| ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响 | 第51-52页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第52-53页 |
| 3 结果 | 第53-79页 |
| ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响 | 第53-60页 |
| ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖的影响 | 第53-55页 |
| ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞凋亡的影响 | 第55-60页 |
| ·结肠癌细胞不同生长时期GSTAl表达和活性的变化 | 第60-64页 |
| ·GSTA1蛋白表达变化 | 第60-62页 |
| ·GSTA1 mRNA表达变化 | 第62-64页 |
| ·GSTA1酶活性变化 | 第64页 |
| ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1表达和活性的影响 | 第64-67页 |
| ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1蛋白表达影响 | 第64-66页 |
| ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1 mRNA表达影响 | 第66页 |
| ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1酶活性的影响 | 第66-67页 |
| ·GSTA1 siRNA设计合成及转染条件的优化 | 第67-69页 |
| ·siRNA设计合成 | 第67页 |
| ·siRNA转染条件的优化 | 第67-69页 |
| ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响 | 第69-71页 |
| ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞增殖的影响 | 第69-70页 |
| ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞凋亡的影响 | 第70-71页 |
| ·pcDNA3.1/V5-His-GSTA1真核表达载体的构建及转染条件优化 | 第71-75页 |
| ·GSTA1-pcDNA3.1/V5-His TOPO真核表达载体的构建 | 第71-73页 |
| ·质粒转染条件的优化 | 第73-75页 |
| ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响 | 第75-79页 |
| ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的细胞增殖的影响 | 第75-76页 |
| ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的细胞增殖的影响 | 第76-79页 |
| 4 讨论 | 第79-89页 |
| ·Caco-2与HT-29结肠癌细胞系 | 第79页 |
| ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响 | 第79-84页 |
| ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖的影响 | 第79-80页 |
| ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞凋亡的影响 | 第80-83页 |
| ·外源性神经酷胺对结肠癌细胞调亡影响的探讨 | 第83-84页 |
| ·结肠癌细胞不同生长时期GSTA1表达与活性变化 | 第84-85页 |
| ·GSTA1表达的变化 | 第84页 |
| ·GSTA1酶活性变化 | 第84-85页 |
| ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1表达和酶活性的影响 | 第85页 |
| ·GSTA1 siRNA转染条件的优化 | 第85-86页 |
| ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响 | 第86-87页 |
| ·真核表达载体的构建及转染条件优化 | 第87-88页 |
| ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的结肠癌细胞增殖和凋亡的影响 | 第88-89页 |
| 5 结论 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-107页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第107页 |