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GSTA1对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响研究

摘要第1-12页
Abstract第12-15页
1 前言第15-37页
   ·神经酰胺第15-19页
     ·神经酰胺的合成与代谢第15-16页
     ·神经酰胺的生物学作用第16-17页
     ·神经酰胺与细胞凋亡的关系第17-18页
     ·神经酰胺与结肠癌第18-19页
   ·谷胱甘肽硫转移酶第19-24页
     ·GSTs一般特性第19-21页
     ·hGSTA一般特性第21-22页
     ·GSTs与肿瘤的关系第22-24页
   ·细胞凋亡研究进展第24-27页
     ·Caspase-3与细胞凋亡第24-25页
     ·Bcl-2家族与细胞凋亡第25-26页
     ·Caspase-3与Bcl-2关系第26-27页
     ·细胞凋亡与肿瘤第27页
   ·RNA干扰技术的研究进展第27-35页
     ·RNAi的发现和发展第27-28页
     ·RNAi的基本原理第28页
     ·RNAi的作用机制第28-29页
     ·RNAi的作用特点第29页
     ·siRNA的设计第29-30页
     ·siRNA的制备方法第30-32页
     ·siRNA转染方法第32-33页
     ·RNAi的应用第33-35页
   ·研究的目的和意义第35-37页
2 材料与方法第37-53页
   ·试验材料第37-40页
     ·细胞系第37页
     ·药品与试剂第37-38页
     ·主要仪器设备第38-39页
     ·主要溶液配制第39-40页
   ·试验方法第40-53页
     ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响第40-45页
     ·结肠癌细胞不同生长时期GSTA1的表达与活性第45-46页
     ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1表达和活性的影响第46-47页
     ·GSTA1 siRNA的设计合成及转染条件优化第47-48页
     ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响第48-49页
     ·GSTA1-pcDNA3.1/V5-His TOPO真核表达载体的构建及转染条件优化第49-51页
     ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响第51-52页
     ·数据处理与统计分析第52-53页
3 结果第53-79页
   ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响第53-60页
     ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖的影响第53-55页
     ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞凋亡的影响第55-60页
   ·结肠癌细胞不同生长时期GSTAl表达和活性的变化第60-64页
     ·GSTA1蛋白表达变化第60-62页
     ·GSTA1 mRNA表达变化第62-64页
     ·GSTA1酶活性变化第64页
   ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1表达和活性的影响第64-67页
     ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1蛋白表达影响第64-66页
     ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1 mRNA表达影响第66页
     ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1酶活性的影响第66-67页
   ·GSTA1 siRNA设计合成及转染条件的优化第67-69页
     ·siRNA设计合成第67页
     ·siRNA转染条件的优化第67-69页
   ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响第69-71页
     ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞增殖的影响第69-70页
     ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞凋亡的影响第70-71页
   ·pcDNA3.1/V5-His-GSTA1真核表达载体的构建及转染条件优化第71-75页
     ·GSTA1-pcDNA3.1/V5-His TOPO真核表达载体的构建第71-73页
     ·质粒转染条件的优化第73-75页
   ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响第75-79页
     ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的细胞增殖的影响第75-76页
     ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的细胞增殖的影响第76-79页
4 讨论第79-89页
   ·Caco-2与HT-29结肠癌细胞系第79页
   ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响第79-84页
     ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞增殖的影响第79-80页
     ·外源性神经酰胺对结肠癌细胞凋亡的影响第80-83页
     ·外源性神经酷胺对结肠癌细胞调亡影响的探讨第83-84页
   ·结肠癌细胞不同生长时期GSTA1表达与活性变化第84-85页
     ·GSTA1表达的变化第84页
     ·GSTA1酶活性变化第84-85页
   ·外源性神经酰胺处理对结肠癌细胞GSTA1表达和酶活性的影响第85页
   ·GSTA1 siRNA转染条件的优化第85-86页
   ·GSTA1沉默对神经酰胺介导的细胞增殖和凋亡的影响第86-87页
   ·真核表达载体的构建及转染条件优化第87-88页
   ·GSTA1过表达对神经酰胺介导的结肠癌细胞增殖和凋亡的影响第88-89页
5 结论第89-90页
致谢第90-91页
参考文献第91-107页
攻读博士学位期间发表的学术论文第107页

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