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生物单分子定量检测新方法及电化学发光共振能量转移

中文摘要第1-19页
ABSTRACT第19-23页
符号说明第23-24页
第一部分 生物单分子定量检测新方法第24-142页
 第一章 生物单分子光学检测第24-48页
   ·单分子检测第26-27页
   ·LIFM单分子检测第27-38页
     ·共聚焦荧光显微术第27-29页
     ·全内反射荧光显微术第29-34页
     ·落射荧光显微术第34-37页
     ·其它光学方法第37-38页
   ·荧光标记物第38-41页
     ·有机荧光染料探针第38-39页
     ·纳米粒子探针第39-40页
     ·其它荧光探针第40-41页
   ·前景与展望第41-42页
   ·文献第42-48页
 第二章 电化学吸附富集结合全内反射荧光显微术定量检测溶液中单分子第48-72页
   ·引言第48-49页
   ·实验部分第49-52页
     ·材料与试剂第49-50页
     ·仪器设备第50-52页
     ·荧光分子电化学吸附富集至ITO导电玻片第52页
     ·全内反射单分子成像第52页
   ·结果和讨论第52-65页
     ·R6G在ITO玻片上的电化学吸附富集第52-55页
     ·利用全内反射荧光显微术对ITO玻片上富集的分子进行单分子成像第55-57页
     ·Alexa-488标记的IgG(H+L)和R6G标记的DNA电化学吸附富集第57-61页
     ·单分子计数定量检测第61-65页
   ·结论第65页
   ·参考文献第65-72页
 第三章 纳升样品单分子计数蛋白微阵列分析及其在检测活细胞蛋白质动力学表达中的应用第72-92页
   ·引言第72-73页
   ·实验部分第73-78页
     ·材料与试剂第73-74页
     ·实验仪器第74-75页
     ·玻璃片的硅烷化第75页
     ·玻璃片包被抗体第75页
     ·封闭第75页
     ·芯片阵列的点样与标记第75-77页
     ·全内反射系统进行单分子芯片微阵列成像第77页
     ·DSC细胞的提取第77-78页
     ·细胞上清液的提取第78页
     ·基于ELISA的人OPN蛋白酶联免疫检测第78页
   ·结果与讨论第78-88页
     ·图像的获取第78-82页
     ·非特异性吸附第82-83页
     ·测定CEA抗原的线性范围、检测限第83-85页
     ·蜕膜基质细胞中OPN蛋白表达动力学研究第85-88页
   ·小结第88-89页
   ·文献第89-92页
 第四章 单分子计数微阵列分析测定单细胞内多基因表达第92-112页
   ·引言第92-95页
   ·实验部分第95-101页
     ·材料与试剂第95-97页
     ·实验仪器第97页
     ·玻璃片包被DNA1第97页
     ·制备量子点修饰的检测DNA2第97页
     ·封闭第97-98页
     ·tDNA的结合第98页
     ·芯片阵列的标记第98页
     ·细胞的培养和提取第98页
     ·实时定量PCR检测细胞中基因表达第98-99页
     ·利用SMCMA定量单个细胞中多种基因表达第99-101页
   ·结果和讨论第101-107页
     ·芯片制作第101-102页
     ·测定合成的DNA第102-104页
     ·直接定量单细胞中单个基因表达第104-107页
   ·结论第107页
   ·文献第107-108页
   ·附录第108-112页
 第五章 普通显微镜可见单分子检测方法及其在定量单细胞多基因表达中的应用第112-130页
   ·前言第112-115页
   ·实验部分第115-116页
     ·材料与试剂第115页
     ·实验仪器第115页
     ·玻璃片硅烷化、封闭、cDNA的点样、细胞的培养、单分子荧光成像及获取单细胞cDNA第115页
     ·制备MBs修饰的DNA1第115-116页
     ·MBs单分子标记第116页
     ·普通光学显微扫描成像第116页
   ·结果与讨论第116-126页
     ·MBs的明场成像第116-119页
     ·MBs的定量第119-120页
     ·MBs单分子标记第120-121页
     ·背景噪音的消除第121-122页
     ·利用MBs标记cDNA单分子定量单细胞内多基因表达第122-126页
   ·结论第126页
   ·文献第126-130页
 第六章 多色微珠制备及编码单分子检测研究第130-142页
   ·前言第130-131页
   ·实验部分第131-135页
     ·材料与试剂第131-132页
     ·实验仪器第132-133页
     ·制备MBs修饰的DNA2第133页
     ·制备各色微球第133页
     ·玻璃片的硅烷化第133页
     ·DNA1的结合及基底封闭第133-134页
     ·tDNA的结合第134页
     ·MBs-DNA2单分子标记第134页
     ·荧光编码第134页
     ·荧光成像第134-135页
   ·结果与讨论第135-140页
     ·染料及滤色片的选择第135-137页
     ·颜色混合及多色微球制备第137-139页
     ·生物单分子检测第139-140页
   ·结论第140页
   ·文献第140-142页
第二部分 电化学发光共振能量转移第142-198页
 第七章 共振能量转移第144-158页
   ·荧光共振能量转移第144-147页
   ·QD在共振能量转移中应用第147-151页
   ·前景与展望第151-152页
   ·文献第152-158页
 第八章 鲁米诺作供体量子点作受体的电化学发光共振能量转移理论及生物应用第158-182页
   ·引言第158-161页
   ·实验部分第161-166页
     ·材料和试剂第161-162页
     ·仪器设备第162-163页
     ·电极的制作和表征第163-164页
     ·蛋白质溶液去磷酸盐第164页
     ·人IgG-ABEI及CEA-ABEI结合物的制备第164页
     ·免疫反应第164-165页
     ·Fn-QD结合物的制备第165页
     ·ABEI-Fn-QD结合物的制备第165页
     ·蛋白质的变性第165页
     ·电化学发光共振能量转移光谱的检测第165-166页
   ·结果与讨论第166-177页
     ·鲁米诺荧光量子产率Φ_(Lum)第166页
     ·Forster半径R_0,共振能量转移效率η_E及供受体之间的距离r_n第166-167页
     ·ECRET测定DNA理论计算第167-173页
     ·测定蛋白质之间的相互作用第173-175页
     ·研究蛋白质构型的变化第175-177页
   ·结论第177-178页
   ·文献第178-182页
 第九章 量子点作供体Cy5作受体的电化学发光共振能量转移研究蛋白质构型的变化第182-198页
   ·引言第182页
   ·实验部分第182-185页
     ·实验仪器、电极的制作和表征及蛋白质溶液去磷酸盐第182页
     ·材料与试剂第182-183页
     ·油溶性量子点羧基化第183-184页
     ·QD-Fn-DNA1-DNA2-Cy5复合物的制备及蛋白质的变性第184-185页
     ·ECL检测第185页
     ·ECRET光谱检测第185页
   ·结果与讨论第185-196页
     ·CdSe/ZnS QDs ECL机理第185-187页
     ·QDs-Fn-Cy5 ECRET体系的建立第187-191页
     ·QDs与Fn比例选择第191-192页
     ·电位对QDs-Fn-Cy5体系ECRET影响第192-193页
     ·研究蛋白质构型的变化第193-195页
     ·Forster半径R_0,共振能量转移效率η_E及供受体之间的距离r_n第195-196页
   ·结论第196-197页
   ·文献第197-198页
致谢第198-200页
博士期间发表论文第200-201页
学位论文评阅及答辩情况表第201-202页
英文论文第202-248页
 References第214-248页

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