中文摘要 | 第1-19页 |
ABSTRACT | 第19-23页 |
符号说明 | 第23-24页 |
第一部分 生物单分子定量检测新方法 | 第24-142页 |
第一章 生物单分子光学检测 | 第24-48页 |
·单分子检测 | 第26-27页 |
·LIFM单分子检测 | 第27-38页 |
·共聚焦荧光显微术 | 第27-29页 |
·全内反射荧光显微术 | 第29-34页 |
·落射荧光显微术 | 第34-37页 |
·其它光学方法 | 第37-38页 |
·荧光标记物 | 第38-41页 |
·有机荧光染料探针 | 第38-39页 |
·纳米粒子探针 | 第39-40页 |
·其它荧光探针 | 第40-41页 |
·前景与展望 | 第41-42页 |
·文献 | 第42-48页 |
第二章 电化学吸附富集结合全内反射荧光显微术定量检测溶液中单分子 | 第48-72页 |
·引言 | 第48-49页 |
·实验部分 | 第49-52页 |
·材料与试剂 | 第49-50页 |
·仪器设备 | 第50-52页 |
·荧光分子电化学吸附富集至ITO导电玻片 | 第52页 |
·全内反射单分子成像 | 第52页 |
·结果和讨论 | 第52-65页 |
·R6G在ITO玻片上的电化学吸附富集 | 第52-55页 |
·利用全内反射荧光显微术对ITO玻片上富集的分子进行单分子成像 | 第55-57页 |
·Alexa-488标记的IgG(H+L)和R6G标记的DNA电化学吸附富集 | 第57-61页 |
·单分子计数定量检测 | 第61-65页 |
·结论 | 第65页 |
·参考文献 | 第65-72页 |
第三章 纳升样品单分子计数蛋白微阵列分析及其在检测活细胞蛋白质动力学表达中的应用 | 第72-92页 |
·引言 | 第72-73页 |
·实验部分 | 第73-78页 |
·材料与试剂 | 第73-74页 |
·实验仪器 | 第74-75页 |
·玻璃片的硅烷化 | 第75页 |
·玻璃片包被抗体 | 第75页 |
·封闭 | 第75页 |
·芯片阵列的点样与标记 | 第75-77页 |
·全内反射系统进行单分子芯片微阵列成像 | 第77页 |
·DSC细胞的提取 | 第77-78页 |
·细胞上清液的提取 | 第78页 |
·基于ELISA的人OPN蛋白酶联免疫检测 | 第78页 |
·结果与讨论 | 第78-88页 |
·图像的获取 | 第78-82页 |
·非特异性吸附 | 第82-83页 |
·测定CEA抗原的线性范围、检测限 | 第83-85页 |
·蜕膜基质细胞中OPN蛋白表达动力学研究 | 第85-88页 |
·小结 | 第88-89页 |
·文献 | 第89-92页 |
第四章 单分子计数微阵列分析测定单细胞内多基因表达 | 第92-112页 |
·引言 | 第92-95页 |
·实验部分 | 第95-101页 |
·材料与试剂 | 第95-97页 |
·实验仪器 | 第97页 |
·玻璃片包被DNA1 | 第97页 |
·制备量子点修饰的检测DNA2 | 第97页 |
·封闭 | 第97-98页 |
·tDNA的结合 | 第98页 |
·芯片阵列的标记 | 第98页 |
·细胞的培养和提取 | 第98页 |
·实时定量PCR检测细胞中基因表达 | 第98-99页 |
·利用SMCMA定量单个细胞中多种基因表达 | 第99-101页 |
·结果和讨论 | 第101-107页 |
·芯片制作 | 第101-102页 |
·测定合成的DNA | 第102-104页 |
·直接定量单细胞中单个基因表达 | 第104-107页 |
·结论 | 第107页 |
·文献 | 第107-108页 |
·附录 | 第108-112页 |
第五章 普通显微镜可见单分子检测方法及其在定量单细胞多基因表达中的应用 | 第112-130页 |
·前言 | 第112-115页 |
·实验部分 | 第115-116页 |
·材料与试剂 | 第115页 |
·实验仪器 | 第115页 |
·玻璃片硅烷化、封闭、cDNA的点样、细胞的培养、单分子荧光成像及获取单细胞cDNA | 第115页 |
·制备MBs修饰的DNA1 | 第115-116页 |
·MBs单分子标记 | 第116页 |
·普通光学显微扫描成像 | 第116页 |
·结果与讨论 | 第116-126页 |
·MBs的明场成像 | 第116-119页 |
·MBs的定量 | 第119-120页 |
·MBs单分子标记 | 第120-121页 |
·背景噪音的消除 | 第121-122页 |
·利用MBs标记cDNA单分子定量单细胞内多基因表达 | 第122-126页 |
·结论 | 第126页 |
·文献 | 第126-130页 |
第六章 多色微珠制备及编码单分子检测研究 | 第130-142页 |
·前言 | 第130-131页 |
·实验部分 | 第131-135页 |
·材料与试剂 | 第131-132页 |
·实验仪器 | 第132-133页 |
·制备MBs修饰的DNA2 | 第133页 |
·制备各色微球 | 第133页 |
·玻璃片的硅烷化 | 第133页 |
·DNA1的结合及基底封闭 | 第133-134页 |
·tDNA的结合 | 第134页 |
·MBs-DNA2单分子标记 | 第134页 |
·荧光编码 | 第134页 |
·荧光成像 | 第134-135页 |
·结果与讨论 | 第135-140页 |
·染料及滤色片的选择 | 第135-137页 |
·颜色混合及多色微球制备 | 第137-139页 |
·生物单分子检测 | 第139-140页 |
·结论 | 第140页 |
·文献 | 第140-142页 |
第二部分 电化学发光共振能量转移 | 第142-198页 |
第七章 共振能量转移 | 第144-158页 |
·荧光共振能量转移 | 第144-147页 |
·QD在共振能量转移中应用 | 第147-151页 |
·前景与展望 | 第151-152页 |
·文献 | 第152-158页 |
第八章 鲁米诺作供体量子点作受体的电化学发光共振能量转移理论及生物应用 | 第158-182页 |
·引言 | 第158-161页 |
·实验部分 | 第161-166页 |
·材料和试剂 | 第161-162页 |
·仪器设备 | 第162-163页 |
·电极的制作和表征 | 第163-164页 |
·蛋白质溶液去磷酸盐 | 第164页 |
·人IgG-ABEI及CEA-ABEI结合物的制备 | 第164页 |
·免疫反应 | 第164-165页 |
·Fn-QD结合物的制备 | 第165页 |
·ABEI-Fn-QD结合物的制备 | 第165页 |
·蛋白质的变性 | 第165页 |
·电化学发光共振能量转移光谱的检测 | 第165-166页 |
·结果与讨论 | 第166-177页 |
·鲁米诺荧光量子产率Φ_(Lum) | 第166页 |
·Forster半径R_0,共振能量转移效率η_E及供受体之间的距离r_n | 第166-167页 |
·ECRET测定DNA理论计算 | 第167-173页 |
·测定蛋白质之间的相互作用 | 第173-175页 |
·研究蛋白质构型的变化 | 第175-177页 |
·结论 | 第177-178页 |
·文献 | 第178-182页 |
第九章 量子点作供体Cy5作受体的电化学发光共振能量转移研究蛋白质构型的变化 | 第182-198页 |
·引言 | 第182页 |
·实验部分 | 第182-185页 |
·实验仪器、电极的制作和表征及蛋白质溶液去磷酸盐 | 第182页 |
·材料与试剂 | 第182-183页 |
·油溶性量子点羧基化 | 第183-184页 |
·QD-Fn-DNA1-DNA2-Cy5复合物的制备及蛋白质的变性 | 第184-185页 |
·ECL检测 | 第185页 |
·ECRET光谱检测 | 第185页 |
·结果与讨论 | 第185-196页 |
·CdSe/ZnS QDs ECL机理 | 第185-187页 |
·QDs-Fn-Cy5 ECRET体系的建立 | 第187-191页 |
·QDs与Fn比例选择 | 第191-192页 |
·电位对QDs-Fn-Cy5体系ECRET影响 | 第192-193页 |
·研究蛋白质构型的变化 | 第193-195页 |
·Forster半径R_0,共振能量转移效率η_E及供受体之间的距离r_n | 第195-196页 |
·结论 | 第196-197页 |
·文献 | 第197-198页 |
致谢 | 第198-200页 |
博士期间发表论文 | 第200-201页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第201-202页 |
英文论文 | 第202-248页 |
References | 第214-248页 |