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红豆杉体细胞杂交及其紫杉醇合成关键酶基因DBTNBT启动子功能分析

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-16页
符号说明第16-17页
第一章 文献综述第17-44页
 1 紫杉醇开发研究进展第17-27页
   ·紫杉醇的研发历史第17-18页
   ·紫杉醇的结构、性质及其作用机制第18-19页
   ·红豆杉在国内外的分布和种植状况第19-20页
   ·紫杉醇开发研究近况第20-24页
   ·紫杉醇生物合成途径研究进展第24-27页
 2 植物体细胞杂交技术的研究进展第27-33页
   ·体细胞杂种重要性状的转移第27-29页
   ·体细胞杂交技术在药用植物中的研究进展第29-30页
   ·体细胞杂种的鉴定方法第30-31页
   ·药用植物-柴胡的研究进展第31-33页
 3 启动子及转录因子研究进展第33-42页
   ·真核启动子的特点第33-34页
   ·植物基因工程中常用的启动子第34-35页
   ·启动子的克隆方法第35-37页
   ·启动子功能分析方法第37-39页
   ·转录因子的研究进展第39-42页
 4 研究背景及立题意义第42-44页
第二章 柴胡与南方红豆杉不对称体细胞融合第44-68页
 1 材料与方法第44-56页
   ·柴胡与南方红豆杉的原生质体融合第44-46页
   ·同工酶分析第46-48页
   ·染色体制片及观察第48-49页
   ·RAPD分析第49-51页
   ·SSR分析第51-54页
   ·半定量RT-PCR第54-55页
   ·HPLC测定药效含量第55-56页
 2 结果与分析第56-66页
   ·红豆杉培养条件的优化第56-59页
     ·红豆杉(种胚)愈伤组织的诱导第56-57页
     ·愈伤组织的继代培养第57-59页
   ·柴胡与红豆杉体细胞杂交第59-65页
     ·融合产物的生长第59页
     ·融合再生愈伤组织的鉴定第59-65页
   ·齐墩果酸合成途径基因的半定量RT-PCR分析第65页
   ·柴胡及部分杂种克隆齐墩果酸含量分析第65-66页
 3 讨论第66-68页
   ·杂种中核基因组组成的影响因素第66-67页
   ·杂种齐墩果酸合成相关基因的表达模式及与齐墩果酸含量的关系第67-68页
第三章 DBNTBT启动子的功能分析第68-105页
 1 材料与方法第68-82页
   ·植物表达载体的构建第68-71页
   ·农杆菌介导的烟草遗传转化第71-74页
   ·启动子的瞬时表达分析第74-76页
   ·基因枪法介导的目的蛋白的细胞定位第76页
   ·酵母单杂交第76-82页
 2 结果与分析第82-102页
   ·启动子的分离第82-83页
   ·DBTNBT启动子的结构分析第83-85页
   ·DBTNBT启动子全长及5’端和3’端缺失植物表达载体构建第85-87页
   ·DBTNBT启动子启动GFP蛋白在洋葱表皮细胞中瞬时表达第87-88页
   ·DBTNBT启动子启动GUS基因在烟草叶片中的瞬时表达第88-89页
   ·含有不同长度DBTNBT启动子转基因烟草的获得第89-90页
   ·DBTNBT启动子的组织表达模式第90-91页
   ·MeJA对启动子的诱导作用分析第91-92页
   ·启动子上游结合蛋白的克隆第92-102页
 3 讨论第102-105页
   ·DBTNBT启动子可能的调控方式第102页
   ·DBTNBT启动子的功能缺失研究第102-103页
   ·启动子瞬时表达与稳定表达出现差异的原因分析第103-104页
   ·酵母单杂交试验中的假阳性和假阴性第104-105页
参考文献第105-112页
致谢第112-113页
学位论文评阅及答辩情况表第113页

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