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抗口蹄疫病毒单克隆抗体的制备和抗原模拟表位的筛选

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
文献综述第12-22页
1 引言第22-23页
2 材料与方法第23-32页
   ·材料第23-24页
     ·病毒、细胞系、试验动物、菌株第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器与设备第23-24页
   ·方法第24-32页
     ·FMDV抗原制备第24页
       ·FMDV抗原的制备及纯化第24页
       ·FMDV抗原纯度及反应性鉴定第24页
     ·间接ELISA检测方法的建立第24-25页
     ·间接免疫荧光(IFA)检测第25页
     ·动物免疫程序第25页
     ·杂交瘤细胞株的建立第25-27页
       ·SP2/0骨髓瘤细胞的复苏第25页
       ·细胞融合第25-27页
     ·单克隆抗体腹水的制备及纯化第27-28页
       ·腹水的制备第27页
       ·腹水的纯化第27-28页
     ·单克隆抗体的鉴定第28-29页
       ·杂交瘤细胞培养上清及腹水效价的测定第28页
       ·单克隆抗体型特异性鉴定第28页
       ·单克隆抗体免疫球蛋白亚类的鉴定第28页
       ·单克隆抗体相对亲和力测定第28页
       ·微量细胞中和试验第28-29页
       ·单克隆抗体识别抗原表位初步鉴定第29页
     ·单抗3E11的纯化第29-30页
     ·噬菌体展示肽库的生物淘洗第30页
     ·亲和捕获噬菌体ELISA第30页
     ·噬菌体单链DNA模板的制备与测序第30页
     ·肽ELISA第30-31页
     ·肽竞争抑制ELISA第31-32页
3 结果与分析第32-40页
   ·抗O型FMDV单克隆抗体的制备及生物学特性鉴定第32-35页
     ·抗原的制备及鉴定第32页
     ·间接ELISA检测方法的建立第32页
     ·杂交瘤细胞株的建立第32-33页
     ·单克隆抗体效价的测定第33页
     ·单克隆抗体免疫球蛋白亚类的鉴定第33页
     ·单克隆抗体型特异性鉴定第33-34页
     ·单克隆抗体相对亲和力指数测定第34页
     ·微量细胞中和试验第34页
     ·单克隆抗体抗原表位初步分析第34-35页
       ·全病毒Western blot分析第34-35页
       ·相加ELISA分析第35页
   ·利用噬菌体随机肽库技术对Asial型FMDV一个构象型中和表位的筛选第35-40页
     ·单抗3E11的纯化结果第35-36页
     ·淘选产率第36-37页
     ·亲和捕获噬菌体ELISA检测结果第37页
     ·单抗3E11识别模拟表位的基序为GSLxxL第37-38页
     ·P-S7肽对单抗3E11的反应活性第38页
     ·P-S7肽对单抗3E11的竞争抑制第38-39页
     ·P-S7的表位基序氨基酸均为关键性氨基酸第39-40页
4 讨论第40-43页
   ·单克隆抗体制备及应用价值分析第40-41页
   ·Asial型FMDV抗原位点第41页
   ·利用噬菌体展示技术研究抗原表位分析第41-42页
   ·FMDV细胞受体与中和位点的关系分析第42-43页
结论第43-44页
参考文献第44-49页
附录:各种培养液及溶液的配制第49-52页
致谢第52-53页
作者简介第53页

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