| 英文缩略语对照表 | 第1-18页 |
| 摘要 | 第18-20页 |
| Abstract | 第20-22页 |
| 第1章 前言 | 第22-48页 |
| ·真核基因转录的概述 | 第22-27页 |
| ·真核基因转录循环 | 第22-24页 |
| ·Pol II的结构 | 第24页 |
| ·CTD的磷酸化循环 | 第24-26页 |
| ·多种转录延伸因子及辅助因子参与调控Pol II的催化活性 | 第26-27页 |
| ·P-TEFb复合体的结构与功能以及活性调控方式 | 第27-36页 |
| ·P-TEFb复合体的组成简介 | 第27-28页 |
| ·活化态与非活化态P-TEFb复合体之间高度动态的转换平衡 | 第28-32页 |
| ·7SK snRNA和HEXIM1蛋白俘获P-TEFb复合体形成抑制态的7SK snRNP复合体 | 第28-29页 |
| ·Brd4蛋白结合的P-TEFb复合体具备转录活性 | 第29页 |
| ·P-TEFb复合体活性调控的多层性 | 第29-30页 |
| ·细胞严密维持活化态与非活化态P-TEFb复合体之间的比例平衡 | 第30-32页 |
| ·P-TEFb复合体在生理、病理等诸多方面的功能 | 第32-36页 |
| ·P-TEFb复合体在转录延伸和RNA剪辑过程中的作用 | 第32-34页 |
| ·P-TEFb复合体是宿主细胞中协同HIV-1转录的关键性因子 | 第34-35页 |
| ·P-TEFb复合体参与肿瘤发生以及心肌肥大等病理型病变 | 第35-36页 |
| ·参与心肌肥大信号调控的途径 | 第36-41页 |
| ·G蛋白耦联受体信号途径 | 第37-38页 |
| ·MAPK信号途径 | 第38页 |
| ·P13K-AKT信号途径 | 第38-39页 |
| ·Calcineur in(PP2B)-NFAT信号途径 | 第39-41页 |
| ·钙离子信号途径与基因转录的关联 | 第41-43页 |
| ·Calcineurin-NFAT信号途径调控基因转录的精细特征 | 第41页 |
| ·CaM依赖性激酶参与基因转录调控 | 第41-43页 |
| ·PP2B调控的其他转录因子 | 第43页 |
| ·PP2B的活性调控 | 第43-45页 |
| ·PP2B天然抑制蛋白 | 第43-44页 |
| ·调控PP2B活化的分子机制:CaM依赖/非依赖性途径 | 第44-45页 |
| ·本课题研究的目标、内容和意义 | 第45-48页 |
| ·研究背景和目标 | 第45-46页 |
| ·研究内容和意义 | 第46-48页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第48-67页 |
| ·实验药品、试剂与仪器 | 第48-50页 |
| ·细胞株、菌株和质粒资源 | 第48页 |
| ·主要试剂和材料 | 第48-49页 |
| ·主要实验仪器和耗材 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-67页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化 | 第50-52页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
| ·质粒转化 | 第51-52页 |
| ·质粒DNA的制备 | 第52-54页 |
| ·质粒DNA小量提取 | 第52-53页 |
| ·质粒大量提取(QIAGEN试剂盒法) | 第53-54页 |
| ·质粒DNA亚克隆相关操作 | 第54-58页 |
| ·DNA限制性内切酶酶切 | 第54页 |
| ·DNA样品琼脂糖凝胶电泳 | 第54-55页 |
| ·琼脂糖胶回收DNA片段(QIAGEN试剂盒) | 第55-56页 |
| ·DNA连接 | 第56页 |
| ·特异性ShRNA的构建 | 第56-57页 |
| ·普通PCR反应 | 第57页 |
| ·突变PCR反应(改进型QuikChange方案) | 第57-58页 |
| ·细胞学相关实验 | 第58-67页 |
| ·细胞培养 | 第59页 |
| ·细胞瞬时转染 | 第59-60页 |
| ·细胞的药物处理 | 第60-61页 |
| ·全细胞裂解液 | 第61页 |
| ·细胞核蛋白抽提(NE) | 第61-62页 |
| ·免疫共沉淀 | 第62-63页 |
| ·磷酸酶体外实验 | 第63页 |
| ·免疫印记实验(Western blot) | 第63-64页 |
| ·核酸杂交实验(Northern blot) | 第64-65页 |
| ·Luciferase转录活性分析(Promega) | 第65页 |
| ·钙离子内流荧光实验 | 第65-67页 |
| 第3章 实验结果与讨论 | 第67-114页 |
| ·结果 | 第67-106页 |
| ·P-TEFb复合体活性诱导模式以及活性调控的分子信号途径筛选 | 第67-73页 |
| ·P-TEFb复合体活性诱导模式筛选 | 第67-69页 |
| ·P-TEFb复合体活性调控分子机制的摸索 | 第69-73页 |
| ·胞内钙离子信号通路调控P-TEFb复合体的活性 | 第73-84页 |
| ·UV处理和HMBA辐射能引发的钙离子内流 | 第73页 |
| ·UV和HMBA处理触发的钙离子内流在7SK snRNP复合体解离及P-TEFb复合体活化上起关键性的作用 | 第73-76页 |
| ·培养基内含的钙离子是UV和HMBA处理造成7SK snRNP复合体解离的必备条件 | 第76-79页 |
| ·钙离子信号下游传导因子PP2B和calmodulin也是UV和HMBA处理引发的7SK snRNP复合体解离所必须的 | 第79-84页 |
| ·PP1 α在PP2B的协助下协同作用引发7SK snRNP复合体的解离并增强Tat激活的HIV-1转录 | 第84-94页 |
| ·磷酸酶PP1 α也参与了7SK snRNP复合体的解离 | 第84-89页 |
| ·PP2B与PP1 α在体内协同作用引发7SK snRNP复合体的解离并增强Tat激活的HIV-1转录 | 第89-92页 |
| ·PP2B协助PP1 α解离7SK snRNP复合体 | 第92-94页 |
| ·PP1 α去磷酸化CDK9 pT186是UV和HMBA处理引发7SK snRNP复合体解离的核心事件 | 第94-104页 |
| ·PP2B协助PP1 α去磷酸化CDK9 pT186导致7SK snRNP复合体的解离 | 第95-100页 |
| ·CDK9 pT186去磷酸化是UV和HMBA处理引发7SK snRNP复合体解离的核心事件 | 第100-104页 |
| ·补充数据 | 第104-106页 |
| ·讨论 | 第106-114页 |
| ·真核基因转录延伸过程调控的新分子机制:CDK9 T186位点磷酸化水平波动式的动态转换以调控P-TEFb复合体活性 | 第106-108页 |
| ·7SK snRNP复合体解离的分子模式图 | 第108-112页 |
| ·P-TEFb复合体的活性调控与相关的恶性疾病致病机理再认识 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
| 个人简历 | 第129页 |
