| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 第一章 转基因植物检测的背景和发展概况 | 第12-30页 |
| 1.全球转基因植物的发展概况和商业化种植 | 第12-14页 |
| 2.转基因植物的安全性评价与管理及转基因产品的标签制 | 第14-19页 |
| ·转基因植物的安全性评价 | 第14-17页 |
| ·转基因生物产品安全性争论的焦点 | 第16-17页 |
| ·转基因安全评估的原则 | 第17页 |
| ·转基因生物安全管理和各国对转基因生物产品安全管理的要求 | 第17-18页 |
| ·转基因标签制度的实行和管理 | 第18-19页 |
| 3.目前转基因检测技术 | 第19-28页 |
| ·插入外源基因的检测 | 第21-26页 |
| ·定性PCR检测 | 第22页 |
| ·定量PCR检测 | 第22-25页 |
| ·SOUTHERN杂交 | 第25-26页 |
| ·基因芯片检测方法 | 第26页 |
| ·外源基因表达产物的检测 | 第26-28页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第26-27页 |
| ·试纸条方法 | 第27页 |
| ·WESTERN杂交方法 | 第27-28页 |
| ·其他新的检测技术 | 第28页 |
| 4.目前我国对转基因生物产品的管理方法 | 第28-29页 |
| 5.本研究内容与目的及意义 | 第29-30页 |
| 第二章 转基因生物产品定性PCR检测体系研究 | 第30-52页 |
| 1.材料 | 第30-31页 |
| ·试验材料 | 第30页 |
| ·药品试剂 | 第30-31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| 2.方法 | 第31-37页 |
| ·我国商业化转基因作物外源基因信息表 | 第31页 |
| ·常规基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·常见试样的CTAB法提取DNA | 第32页 |
| ·富含蛋白类试样DNA的提取 | 第32页 |
| ·DNA浓度和纯度的测定 | 第32-33页 |
| ·定性PCR检测的主要参数和引物的选用 | 第33-35页 |
| ·检测转基因抗草甘膦大豆的引物 | 第33页 |
| ·检测转基因玉米基因元件的引物 | 第33页 |
| ·检测转基因玉米转化事件的引物 | 第33-34页 |
| ·检测转基因棉花的引物 | 第34页 |
| ·检测转基因水稻的引物 | 第34-35页 |
| ·检测转基因甘蔗的引物 | 第35页 |
| ·PCR反应体系与程序及对照设置 | 第35-36页 |
| ·PCR扩增产物电泳检测 | 第36页 |
| ·PCR检测结果判断 | 第36-37页 |
| ·对照样品结果分析 | 第36页 |
| ·试样结果分析 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-49页 |
| ·不同商品化转基因植物的定性PCR检测 | 第37页 |
| ·转基因大豆的定性PCR检测 | 第37-39页 |
| ·外源基因定性PCR检测灵敏度分析 | 第37-39页 |
| ·转基因大豆的高通量PCR检测 | 第39页 |
| ·转基因玉米的定性PCR检测 | 第39-44页 |
| ·转基因抗虫水稻的定性PCR检测 | 第44-46页 |
| ·转基因棉花的定性PCR检测 | 第46-47页 |
| ·转基因甘蔗的定性PCR检测 | 第47-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| ·实验环境中污染物的控制 | 第49-50页 |
| ·转基因生物PCR定性检测的灵敏度 | 第50页 |
| ·实验过程中严格设立对照组 | 第50页 |
| ·转基因生物产品定性PCR检测的技术路线 | 第50-51页 |
| ·本研究今后进一步的工作计划 | 第51-52页 |
| ·与实际相结合,应当继续深入研究转基因食品中定性PCR的检测方法 | 第51页 |
| ·加大转基因生物产品检测的覆盖面 | 第51-52页 |
| ·建立更加快速、准确、稳定的检测方法 | 第52页 |
| 第三章 转基因生物产品定量PCR检测体系研究 | 第52-68页 |
| 1 材料 | 第53页 |
| ·转基因标准物质 | 第53页 |
| ·菌株与质粒 | 第53页 |
| ·酶及试剂 | 第53页 |
| ·仪器 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-56页 |
| ·核酸提取 | 第53页 |
| ·非同源对照模板构建 | 第53-55页 |
| ·PCR产物与载体的连接 | 第54页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第54页 |
| ·克隆的筛选 | 第54-55页 |
| ·插入片段的序列测定及同源性分析 | 第55页 |
| ·确定与含1%转基因成分大豆相对应的非同源模板的量 | 第55页 |
| ·荧光定量基因组DNA模板的准备 | 第55页 |
| ·转基因大豆DNA模板的制备 | 第55页 |
| ·转基因玉米TC1507DNA模板的制备 | 第55页 |
| ·定量PCR反应体系和引物 | 第55-56页 |
| 3 结果与分析 | 第56-64页 |
| ·竞争定量PCR的原理 | 第56-59页 |
| ·非同源对照模板构建 | 第56-57页 |
| ·插入片段的序列测定及同源性分析 | 第57-58页 |
| ·确定与含1%转基因成分大豆相对应的非同源模板的量 | 第58-59页 |
| ·竞争定量PCR的校正 | 第59页 |
| ·构建非同源模板对转基因大豆35S启动子定量检测 | 第59页 |
| ·荧光定量PCR检测体系建立 | 第59-64页 |
| ·定量检测标准曲线建立 | 第60页 |
| ·转基因抗草甘膦除草剂大豆(40-3-2)的定量检测 | 第60-62页 |
| ·转基因抗除草剂玉米TC1507的定量检测 | 第62-64页 |
| ·检测精密度 | 第64页 |
| 4 讨论 | 第64-68页 |
| ·荧光探针和荧光染料的优缺点 | 第65-66页 |
| ·影响定量检测的几个因素 | 第66-67页 |
| ·定量检测存在的问题 | 第67页 |
| ·本研究未来的计划 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-73页 |
| 附表 | 第73-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
