摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-14页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第14-16页 |
第1章 文献综述 | 第16-35页 |
·马传染性贫血病病毒概述 | 第16-20页 |
·慢病毒属的构成 | 第16页 |
·EIAV的历史及分类地位 | 第16-17页 |
·EIAV的形态和理化特性 | 第17页 |
·EIAV的血凝性 | 第17页 |
·EIAV的细胞嗜性和体外培养 | 第17页 |
·EIAV的致病性 | 第17-18页 |
·EIAV检测技术的发展 | 第18-20页 |
·EIAV的分子生物学研究进展 | 第20-32页 |
·EIAV的基因组结构概述 | 第20-21页 |
·表面糖蛋白gp90 | 第21-22页 |
·穿膜蛋白gp45 | 第22-23页 |
·EIAV gp90和gp45的变异 | 第23-24页 |
·机体针对gp90和gp45的免疫应答 | 第24-25页 |
·EIAV gag蛋白概述 | 第25-27页 |
·机体针对gag的免疫应答 | 第27-28页 |
·非编码区LTR的序列特征 | 第28-29页 |
·LTR与细胞因子的相互作用 | 第29-30页 |
·LTR影响病毒的细胞嗜性 | 第30页 |
·LTR对病毒致病性影响的研究 | 第30-31页 |
·Tat蛋白对LTR启动子活性的影响 | 第31-32页 |
·反向遗传操作研究EIAV | 第32-33页 |
·慢病毒疫苗的研究进展 | 第33-35页 |
第2章 研究目的与意义 | 第35-36页 |
第3章 材料与方法 | 第36-55页 |
·试验材料 | 第36-41页 |
·毒株 | 第36页 |
·细胞 | 第36页 |
·试验动物 | 第36页 |
·质粒与菌株 | 第36-37页 |
·细胞培养用试剂 | 第37页 |
·细菌培养用试剂 | 第37-38页 |
·大肠杆菌感受态制备用试剂 | 第38页 |
·操作核酸用试剂 | 第38-39页 |
·寡核苷酸引物与探针 | 第39页 |
·ELISA缓冲液和包被蛋白 | 第39-40页 |
·β-gal和CAT定量检测试剂盒 | 第40页 |
·其他试剂 | 第40页 |
·仪器与器材 | 第40-41页 |
·生物软件 | 第41页 |
·试验方法 | 第41-55页 |
·细胞的制备与培养 | 第41页 |
·EIAV接种细胞 | 第41-42页 |
·EIAV接种试验马 | 第42页 |
·监测试验马临床症状 | 第42-43页 |
·定期采集试验马血液样品 | 第43页 |
·建立realtime PCR标准曲线 | 第43-44页 |
·建立realtime RT-PCR标准曲线 | 第44-45页 |
·测定EIAV前病毒DNA载量 | 第45-46页 |
·测定EIAV病毒RNA载量 | 第46页 |
·血清抗体检测 | 第46-47页 |
·测定EIAV前病毒gp90和LTR序列 | 第47-50页 |
·EIAV gp90和LTR的序列分析 | 第50页 |
·pLTR/CAT系列质粒的构建 | 第50-53页 |
·LTR启动子活性研究 | 第53-55页 |
第4章 结果与分析 | 第55-100页 |
·EIAV的免疫与攻毒 | 第55-57页 |
·免疫和攻毒期间的临床观察 | 第55-57页 |
·免疫和攻毒期间的病毒复制特性研究 | 第57-66页 |
·Realtime PCR标准曲线的建立 | 第57-58页 |
·免疫期和攻毒期试验马PBMC前病毒DNA载量的变化 | 第58-62页 |
·Realtime RT-PCR标准曲线的建立 | 第62页 |
·免疫期和攻毒期试验马血浆病毒RNA载量的变化 | 第62-66页 |
·免疫和攻毒期间试验马的体液免疫反应 | 第66-71页 |
·免疫期和攻毒期试验马血清抗EIAV gp45抗原的抗体变化 | 第66-67页 |
·免疫期和攻毒期试验马血清抗EIAV p26抗原的抗体变化 | 第67-68页 |
·免疫期和攻毒期试验马血清抗EIAV p15抗原的抗体变化 | 第68-69页 |
·免疫期和攻毒期试验马血清抗EIAV p11抗原的抗体变化 | 第69-70页 |
·免疫期和攻毒期试验马血清抗EIAV p9抗原的抗体变化 | 第70-71页 |
·免疫期和攻毒期EIAV gp90的进化分析 | 第71-86页 |
·PBMC前病毒gp90的扩增与克隆 | 第71-72页 |
·免疫期试验马体内gp90的变异分析 | 第72-76页 |
·攻毒期试验马体内gp90的变异分析 | 第76-80页 |
·攻毒期gp90种群的演化分析 | 第80-82页 |
·攻毒后不同时期gp90nt和aa的变异规律 | 第82-84页 |
·分析攻毒期间机体对病毒gp90的选择作用 | 第84-86页 |
·体内和体外感染过程中EIAV LTR的变异趋势 | 第86-97页 |
·体内或体外感染EIAV的细胞中前病毒LTR的扩增与克隆 | 第86-87页 |
·体内传代导致的EIAV LTR的序列变异 | 第87-88页 |
·体外传代导致的EIAV LTR的序列变异 | 第88-90页 |
·分析EIAV-L与其体内和体外衍生毒株之间的LTR进化关系 | 第90-92页 |
·EIAV-DLA LTR在动物体内感染过程中的种群纯化趋势 | 第92-93页 |
·攻毒前后未发病马PBMC前病毒LTR的序列分析 | 第93-95页 |
·攻毒后发病马PBMC前病毒LTR的序列分析 | 第95-97页 |
·LTR启动子活性的研究 | 第97-100页 |
·EIAV LTR启动CAT表达的质粒的构建 | 第97-98页 |
·不同LTR启动子在eMDM上启动活性的比较研究 | 第98-100页 |
第5章 讨论与结论 | 第100-110页 |
·讨论 | 第100-108页 |
·EIAV的复制动力学 | 第100-102页 |
·EIAV LTR的序列与启动子活性研究 | 第102-104页 |
·EIAV感染中病毒gp90的变异趋势 | 第104-106页 |
·感染EIAV后的机体反应 | 第106-108页 |
·结论 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-121页 |
致谢 | 第121-122页 |
附录 | 第122页 |