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一个新型假病斑水稻T-DNA插入突变体的研究

内容提要第1-5页
英文缩写词表第5-9页
第一篇 文献综述第9-43页
 第一章 T-DNA 标签在水稻功能基因组学研究中的应用第9-25页
   ·突变体构建的方法第10-11页
   ·水稻T-DNA 插入标签技术第11-18页
     ·T-DNA 标签原理及基因敲除第11-14页
     ·T-DNA 插入标签的研究策略第14-17页
     ·水稻T-DNA 插入突变技术的研究进展第17-18页
   ·T-DNA 插入侧翼序列获得的主要方法第18-25页
     ·质粒拯救法第19页
     ·反向PCR第19-20页
     ·PCR-Walking第20页
     ·交错式热不对称PCR第20-25页
 第二章 水稻细胞程序性死亡的相关研究第25-41页
   ·高等植物早衰的研究第25-32页
     ·植物衰老的本质第25-26页
     ·物质代谢与植物衰老第26-27页
     ·衰老的几种假说第27-30页
     ·高等植物衰老的研究方法和策略第30-31页
     ·水稻早衰的研究现状和意义第31-32页
   ·植物假病斑突变体的研究第32-37页
     ·假病斑突变体的发生机理及类型第35-36页
     ·水稻假病斑突变体的研究第36-37页
   ·与生物体代谢相关的单加氧酶的初步研究第37-41页
     ·血红素类单加氧酶在植物中的功能第38-39页
     ·黄素类单加氧酶第39-41页
 第三章 本论文的研究目的和意义第41-43页
第二篇 研究内容第43-85页
 第一章 水稻突变体的获得及遗传分析第43-59页
  1 材料和方法第43-48页
   ·材料第43-45页
   ·方法第45-48页
     ·转基因水稻T1 代基因组DNA 的小量提取第45-46页
     ·T0 代种子的潮霉素抗性筛选实验第46页
     ·T1 代植株的表型鉴定第46页
     ·T1 代表型性状与T-DNA 插入事件共分离关系的确定第46-48页
  2 结果与分析第48-53页
   ·T0 代种子潮霉素抗性筛选第48页
   ·假病斑突变体的获得和T1 代表型分析第48-51页
   ·突变体T1 代叶片的潮霉素抗性实验第51-52页
   ·突变性状与T-DNA 共分离的PCR 分析第52-53页
   ·T1 代转基因植株插入位点数的初步研究第53页
  3 讨论第53-57页
   ·关于假病斑突变体分析第53-54页
   ·转基因水稻叶片潮霉素抗性检测的可靠性分析第54-55页
   ·T-DNA 插入事件和突变体共分离关系的分析第55-56页
   ·关于T-DNA 插入引起的致死突变的初步分析第56-57页
  4 小结第57-59页
 第二章 突变体T-DNA 侧翼序列的克隆第59-83页
  1 材料和方法第59-70页
   ·材料第59-61页
   ·方法第61-70页
     ·转基因水稻T1 代基因组DNA 的大量提取第61页
     ·大肠杆菌感受态的制备第61-62页
     ·T-DNA 插入侧翼序列的TAIL-PCR第62-65页
     ·扩增产物的回收、克隆和测序第65-68页
     ·T-DNA 侧翼序列分析第68-69页
     ·具有单加氧酶特征基因的PCR 克隆第69-70页
  2 结果与分析第70-79页
   ·T-DNA 插入侧翼序列的获得第70-72页
   ·重组克隆载体pGEM T-easy 的酶切与PCR 鉴定第72-73页
   ·TAIL-PCR 产物测序结果及初步分析第73-76页
   ·具有单加氧酶特征的基因生物信息学分析第76-78页
   ·具有单加氧酶特征基因的PCR 克隆第78-79页
  3 讨论第79-82页
   ·TAIL-PCR 扩增条件的优化第79页
   ·假病斑突变体发生机制的推测第79-81页
   ·关于后续的工作第81-82页
  4 小结第82-83页
 结论第83-85页
参考文献第85-94页
详细摘要第94-99页
导师简介第99-100页
作者简介第100-101页
CURRICULUM VITAE第101-102页
致谢第102页

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