内容提要 | 第1-8页 |
引言 | 第8-10页 |
第一篇 文献综述 | 第10-29页 |
第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展 | 第10-21页 |
1 PRRSV 的一般特性 | 第10-11页 |
2 PRRSV 的基因结构 | 第11-12页 |
3 病毒基因组所编码的蛋白 | 第12-17页 |
4 病毒变异与基因重组 | 第17-18页 |
5 基因工程疫苗的研究 | 第18页 |
6 分子生物学诊断 | 第18-21页 |
第二章 我国小型猪实验动物标准化研究进展 | 第21-29页 |
1 我国小型猪的主要品系 | 第21-22页 |
2 我国小型猪的生物学特性 | 第22-23页 |
3 小型猪在医学研究中的应用 | 第23-26页 |
4 SPF 小型猪的实验动物质量检测 | 第26-29页 |
第二篇 研究内容 | 第29-64页 |
第一章 PRRSV 核衣壳蛋白的原核表达 | 第29-50页 |
1 材料和方法 | 第29-41页 |
·材料 | 第29-32页 |
·方法 | 第32-41页 |
2 结果 | 第41-48页 |
·Marc-145 细胞病变结果 | 第41-43页 |
·RT-PCR | 第43页 |
·T-ORF7 的鉴定 | 第43-45页 |
·重组表达载体pGEX-4T -1-ORF7 的筛选与鉴定 | 第45页 |
·IPTG 诱导浓度及时间的确定 | 第45-46页 |
·SDS-PAGE | 第46页 |
·薄层扫描分析结果 | 第46-47页 |
·Western-blotting 检测 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-49页 |
·N 基因的克隆 | 第48页 |
·N 蛋白在原核表达系统中的表达 | 第48页 |
·表达系统及表达菌 | 第48-49页 |
·诱导时间的确定 | 第49页 |
4 小结 | 第49-50页 |
第二章 重组N 蛋白检测PRRSV 抗体间接ELISA 方法的研究 | 第50-63页 |
1 材料和方法 | 第50-55页 |
·材料 | 第50-52页 |
·方法 | 第52-55页 |
2 结果 | 第55-60页 |
·抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度的确定 | 第55-56页 |
·抗原最佳包被时间的确定 | 第56-57页 |
·封闭液的选择和封闭时间的确定 | 第57页 |
·血清最佳作用时间的确定 | 第57-58页 |
·酶标二抗作用时间的确定 | 第58-59页 |
·底物作用时间的选择 | 第59页 |
·判定标准的确定 | 第59页 |
·特异性试验 | 第59-60页 |
·敏感性试验 | 第60页 |
·重复性试验 | 第60页 |
3 讨论 | 第60-62页 |
·ELISA 方法的特异性 | 第60-61页 |
·ELISA 操作温度的确定 | 第61页 |
·ELISA 的检测抗原的选择 | 第61页 |
·对河北、吉林两省PRRSV 血清抗体水平监测 | 第61-62页 |
4 小结 | 第62-63页 |
结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-74页 |
中文摘要 | 第74-77页 |
ABSTRACT | 第77-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
导师及作者简介 | 第81-83页 |
CURRICULUM VITAE | 第83页 |