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猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白原核表达及其抗体检测方法的建立

内容提要第1-8页
引言第8-10页
第一篇 文献综述第10-29页
 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展第10-21页
  1 PRRSV 的一般特性第10-11页
  2 PRRSV 的基因结构第11-12页
  3 病毒基因组所编码的蛋白第12-17页
  4 病毒变异与基因重组第17-18页
  5 基因工程疫苗的研究第18页
  6 分子生物学诊断第18-21页
 第二章 我国小型猪实验动物标准化研究进展第21-29页
  1 我国小型猪的主要品系第21-22页
  2 我国小型猪的生物学特性第22-23页
  3 小型猪在医学研究中的应用第23-26页
  4 SPF 小型猪的实验动物质量检测第26-29页
第二篇 研究内容第29-64页
 第一章 PRRSV 核衣壳蛋白的原核表达第29-50页
  1 材料和方法第29-41页
   ·材料第29-32页
   ·方法第32-41页
  2 结果第41-48页
   ·Marc-145 细胞病变结果第41-43页
   ·RT-PCR第43页
   ·T-ORF7 的鉴定第43-45页
   ·重组表达载体pGEX-4T -1-ORF7 的筛选与鉴定第45页
   ·IPTG 诱导浓度及时间的确定第45-46页
   ·SDS-PAGE第46页
   ·薄层扫描分析结果第46-47页
   ·Western-blotting 检测第47-48页
  3 讨论第48-49页
   ·N 基因的克隆第48页
   ·N 蛋白在原核表达系统中的表达第48页
   ·表达系统及表达菌第48-49页
   ·诱导时间的确定第49页
  4 小结第49-50页
 第二章 重组N 蛋白检测PRRSV 抗体间接ELISA 方法的研究第50-63页
  1 材料和方法第50-55页
   ·材料第50-52页
   ·方法第52-55页
  2 结果第55-60页
   ·抗原最佳包被浓度与血清最佳稀释度的确定第55-56页
   ·抗原最佳包被时间的确定第56-57页
   ·封闭液的选择和封闭时间的确定第57页
   ·血清最佳作用时间的确定第57-58页
   ·酶标二抗作用时间的确定第58-59页
   ·底物作用时间的选择第59页
   ·判定标准的确定第59页
   ·特异性试验第59-60页
   ·敏感性试验第60页
   ·重复性试验第60页
  3 讨论第60-62页
   ·ELISA 方法的特异性第60-61页
   ·ELISA 操作温度的确定第61页
   ·ELISA 的检测抗原的选择第61页
   ·对河北、吉林两省PRRSV 血清抗体水平监测第61-62页
  4 小结第62-63页
 结论第63-64页
参考文献第64-74页
中文摘要第74-77页
ABSTRACT第77-80页
致谢第80-81页
导师及作者简介第81-83页
CURRICULUM VITAE第83页

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