| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| ·涡虫------脑发育和再生研究的模式动物 | 第10-12页 |
| ·涡虫简介 | 第10-11页 |
| ·涡虫神经系统的研究 | 第11-12页 |
| ·肌球蛋白研究进展 | 第12-14页 |
| ·肌球蛋白概述 | 第12-13页 |
| ·肌球蛋白轻链基因研究现状 | 第13-14页 |
| ·课题研究意义 | 第14-15页 |
| ·论文研究内容技术路线 | 第15-17页 |
| ·生物信息学分析 | 第15页 |
| ·涡虫DJELC基因水平的研究 | 第15页 |
| ·反转录RT-PCR技术 | 第15页 |
| ·涡虫DjElc基因生物学功能检测 | 第15页 |
| ·涡虫DjElc基因蛋白水平的研究 | 第15-16页 |
| ·论文研究技术路线 | 第16-17页 |
| 第二章 东亚三角涡虫DJELC基因的特征和进化分析 | 第17-29页 |
| 1.前言 | 第17页 |
| 2.材料和方法 | 第17-23页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·实验方法 | 第19-23页 |
| ·DjElc与pcDNA3载体的连接 | 第19-22页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第22-23页 |
| 3. 结果 | 第23-28页 |
| ·DjElc与pcDNA3载体的连接 | 第23-24页 |
| ·东亚三角涡虫DjElc基因的序列分析 | 第24-26页 |
| ·东亚三角涡虫DjElc基因的进化树分析 | 第26-28页 |
| 4. 讨论 | 第28-29页 |
| 第三章 涡虫DJELC基因的表达及分析 | 第29-40页 |
| 1.前言 | 第29页 |
| 2.材料和方法 | 第29-35页 |
| ·材料 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·Northern杂交 | 第30-33页 |
| ·涡虫DjElc基因的整体原位杂交 | 第33-35页 |
| 3.结果 | 第35-39页 |
| ·涡虫DjElc基因Northern杂交 | 第35-37页 |
| ·整体原位杂交技术检测DjElc基因在涡虫不同发育时期的时空表达 | 第37-39页 |
| 4. 讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 涡虫DJELC基因再生中的表达及定量分析 | 第40-46页 |
| 1.前言 | 第40页 |
| 2.材料和方法 | 第40-43页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·RNA探针的合成和标记效率检测 | 第41页 |
| ·再生涡虫中DjElc基因的整体原位杂交 | 第41页 |
| ·相对定量检测再生不同时期涡虫DjElc基因表达 | 第41-43页 |
| 3.结果 | 第43-44页 |
| ·整体原位杂交技术检测DjElc基因在涡虫不同再生阶段的时空表达 | 第43-44页 |
| ·相对定量检测DjElc基因在涡虫不同再生阶段的表达 | 第44页 |
| 4.讨论 | 第44-46页 |
| 第五章 涡虫DJELC基因再生中的干扰及定量分析 | 第46-57页 |
| 1.前言 | 第46页 |
| 2.材料和方法 | 第46-52页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-52页 |
| ·干扰载体的构建 | 第47-50页 |
| ·含L4440-Elc的干扰载体的大肠杆菌L4440(DE3)中的诱导表达 | 第50页 |
| ·含有DjElc基因的dSRNA对切割后涡虫再生的影响 | 第50-51页 |
| ·相对定量检测再生过程中干扰不同时期涡虫DjElc基因表达量的变化 | 第51页 |
| ·免疫组化 | 第51-52页 |
| 3.结果 | 第52-55页 |
| ·L4440-Elc干扰载体的构建 | 第52-53页 |
| ·相对定量检测D/Elc基因干扰后在涡虫不同再生阶段的表达 | 第53-54页 |
| ·重组质粒L4440-Elc在大肠杆菌中的表达以及喂食涡虫 | 第54-55页 |
| 4.讨论 | 第55-57页 |
| 第六章 东亚三角涡虫ELC蛋白的融合表达及鉴定 | 第57-62页 |
| 1.前言 | 第57页 |
| 2.材料和方法 | 第57-58页 |
| ·材料 | 第57页 |
| ·方法 | 第57-58页 |
| ·PET-28a-DjElc重组质粒的构建 | 第57-58页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第58页 |
| ·western blot分析 | 第58页 |
| 3.结果 | 第58-60页 |
| ·原核表达载体的构建及Western blot鉴定 | 第58-60页 |
| ·PCR扩增Elc基因 | 第58-59页 |
| ·PET-28a-DjElc重组质粒的双酶切鉴定 | 第59-60页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第60页 |
| 4.讨论 | 第60-62页 |
| 总结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69-75页 |
