| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 1 前言 | 第14-38页 |
| ·鱼类的免疫系统 | 第14-20页 |
| ·鱼类免疫系统的组织和器官 | 第15-16页 |
| ·胸腺 | 第15页 |
| ·肾脏 | 第15页 |
| ·脾脏 | 第15-16页 |
| ·粘膜相关淋巴组织（MALT） | 第16页 |
| ·免疫细胞 | 第16-17页 |
| ·淋巴细胞 | 第16页 |
| ·吞噬细胞 | 第16-17页 |
| ·体液免疫因子 | 第17-19页 |
| ·特异性体液免疫因子 | 第17-18页 |
| ·非特异性体液因子 | 第18-19页 |
| ·鱼类的免疫应答 | 第19-20页 |
| ·先天性免疫应答及其影响因素 | 第19-20页 |
| ·获得性免疫应答及其影响因素 | 第20页 |
| ·母源性免疫 | 第20页 |
| ·细胞因子 | 第20-27页 |
| ·鱼类细胞因子介绍 | 第21-24页 |
| ·肿瘤坏死因子－α（TNF－α） | 第21页 |
| ·白介素（Interleukin） | 第21-22页 |
| ·干扰素（Interferon） | 第22-23页 |
| ·趋化因子（Chemokine） | 第23页 |
| ·诱导型－氧化氮合成酶（iNOS） | 第23-24页 |
| ·核因子－κB（NF－κB） | 第24页 |
| ·转化生长因子（TGF） | 第24页 |
| ·细胞因子和鱼类免疫细胞的关系 | 第24-25页 |
| ·鱼类细胞因子和非特异性免疫及内分泌-免疫的关系 | 第25-27页 |
| ·鱼类细胞因子和非特异性免疫系统的关系 | 第25-26页 |
| ·鱼类细胞因子和内分泌系统的关系 | 第26-27页 |
| ·趋化因子 | 第27-35页 |
| ·趋化因子家族 | 第27-33页 |
| ·CXC 趋化因子 | 第30-31页 |
| ·CC 趋化因子 | 第31-33页 |
| ·趋化因子的功能研究 | 第33-34页 |
| ·趋化因子在淋巴细胞的运输中的作用 | 第33页 |
| ·在炎症疾病中的作用 | 第33页 |
| ·对HIV 的影响 | 第33-34页 |
| ·在血管发生过程中的作用 | 第34页 |
| ·对肿瘤的抵抗作用 | 第34页 |
| ·趋化因子在脑中起着重要作用 | 第34页 |
| ·鱼类趋化因子的功能研究 | 第34-35页 |
| ·大菱鲆免疫抗病相关功能基因的研究现状 | 第35-36页 |
| ·论文研究目的及意义 | 第36-38页 |
| 2 大菱鲆五种趋化因子的克隆 | 第38-58页 |
| ·材料与方法 | 第39-47页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·RACE 和PCR 反应引物组合 | 第39-40页 |
| ·大菱鲆总RNA 的提取 | 第40-41页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第41-42页 |
| ·cDNA 3’和5’未知末端的克隆 | 第42-46页 |
| ·大菱鲆趋化因子cDNA 5'和3'末端的快速扩增（RACE） | 第42-43页 |
| ·大菱鲆趋化因子cDNA 5'和3'未知末端序列的回收 | 第43-44页 |
| ·连接反应 | 第44页 |
| ·感受态细菌的制备和连接产物的转化 | 第44-45页 |
| ·阳性克隆的检测 | 第45-46页 |
| ·大菱鲆趋化因子基因片段的克隆 | 第46-47页 |
| ·大菱鲆基因组的提取 | 第46页 |
| ·PCR 反应、产物克隆及测序 | 第46-47页 |
| ·巢式PCR | 第47页 |
| ·序列拼接 | 第47页 |
| ·结果及分析 | 第47-56页 |
| ·大菱鲆5 种趋化因子的筛选 | 第47-48页 |
| ·大菱鲆5 种趋化因子未知5'和3'末端扩增结果 | 第48-52页 |
| ·RACE 扩增及片段回收 | 第48-51页 |
| ·阳性克隆鉴定 | 第51-52页 |
| ·大菱鲆趋化因子基因片段的克隆结果与分析 | 第52-56页 |
| ·大菱鲆基因组DNA 的提取 | 第52页 |
| ·趋化因子S457 和S950 基因片段的克隆 | 第52-53页 |
| ·趋化因子SC70 基因片段的克隆 | 第53页 |
| ·趋化因子K1063 基因片段的克隆 | 第53-55页 |
| ·趋化因子KC70 基因片段的克隆 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 3 大菱鲆5 种趋化因子的序列分析及分类地位探讨 | 第58-73页 |
| ·分析方法 | 第59-61页 |
| ·序列分析 | 第59页 |
| ·系统发生分析 | 第59页 |
| ·使用的序列 | 第59-61页 |
| ·5 种大菱鲆趋化因子的序列分析 | 第61-65页 |
| ·大菱鲆5 种趋化因子的BLASTP 搜索分析 | 第65-67页 |
| ·系统发生分析 | 第67-71页 |
| ·大菱鲆2 种CXC 趋化因子系统发生分析 | 第67-68页 |
| ·大菱鲆3 种CC 趋化因子系统发生分析 | 第68-71页 |
| ·讨论 | 第71-73页 |
| 4 大菱鲆5 种趋化因子RT-PCR 表达分析 | 第73-85页 |
| ·材料与方法 | 第73-76页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·引物设计 | 第74-75页 |
| ·鳗弧菌感染大菱鲆和大菱鲆胚胎细胞系（TEC） | 第75页 |
| ·CXC 趋化因子的RT－PCR 表达分析 | 第75-76页 |
| ·总RNA 的提取 | 第75页 |
| ·cDNA 的合成 | 第75-76页 |
| ·RT－PCR 分析 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-84页 |
| ·大菱鲆2 种CXC 趋化因子的体内表达分析 | 第76-80页 |
| ·大菱鲆3 种CC 趋化因子的体内表达分析 | 第80-84页 |
| ·讨论 | 第84-85页 |
| 5 结论 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 发表论文 | 第100-101页 |
| 致谢 | 第101页 |