| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-24页 |
| 1 启动子概述 | 第9-11页 |
| ·组成型启动子 | 第10页 |
| ·组织或器官特异性启动子 | 第10页 |
| ·诱导型启动子 | 第10-11页 |
| 2 植物抗寒机理研究进展 | 第11-22页 |
| ·植物抗寒生理 | 第11-13页 |
| ·植物抗寒基因工程 | 第13-20页 |
| ·植物抗冻基因表达的调节 | 第20-22页 |
| 3 GUS报告基因概述 | 第22-23页 |
| 4 存在问题与展望 | 第23-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-26页 |
| 第三章 材料与方法 | 第26-34页 |
| 1 材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·载体、质粒与菌株 | 第26页 |
| ·分子生物学试剂 | 第26-27页 |
| ·部分试剂配置 | 第27页 |
| 2 主要仪器 | 第27页 |
| 3 实验方法 | 第27-34页 |
| ·农杆菌的培养与活化 | 第27-28页 |
| ·农杆菌介导的叶盘法转化烟草 | 第28页 |
| ·Kan抗性植株的PCR检测 | 第28-30页 |
| ·GUS活性组织化学染色检测 | 第30-31页 |
| ·转基因植株的抗寒生理指标测定 | 第31-32页 |
| ·烟草保卫细胞叶绿体形态、数目观察 | 第32页 |
| ·用电导法配合Logistic方程测定半致死温度 | 第32-34页 |
| 第四章 结果与分析 | 第34-44页 |
| 1 转基因烟草抗性植株的获得 | 第34页 |
| 2 RD29a启动子活性分析 | 第34-37页 |
| ·转RD29a-GUS基因烟草植株的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·GUS活性组织的化学染色分析 | 第35页 |
| ·RD29a启动子组织表达特性分析 | 第35-36页 |
| ·RD29a启动子活性表达起始温度的确定 | 第36-37页 |
| 3 COR15a和CBF_3转基因植株抗寒性分析 | 第37-44页 |
| ·转COR15a和CBF_3基因烟草植株的PCR检测 | 第37页 |
| ·转基因植株低温抗寒性能检测 | 第37-39页 |
| ·转基因植株的部分抗寒生理指标测定 | 第39-42页 |
| ·转基因烟草植株的田间露地越冬栽植 | 第42页 |
| ·转基因烟草的遗传分离规律分析 | 第42-43页 |
| ·烟草保卫细胞叶绿体形态、数目分析 | 第43-44页 |
| 第五章 讨论 | 第44-47页 |
| 1 RD29a启动子对植株生长状况的影响 | 第44页 |
| 2 报告基因的选择 | 第44-45页 |
| 3 烟草中CBF_3基因对COR15a基因的调控 | 第45页 |
| 4 生理生化指标与抗寒性的关系 | 第45-46页 |
| ·低温处理对电导率的影响 | 第45页 |
| ·低温处理对POD活性的影响 | 第45页 |
| ·低温处理对可溶性糖含量的影响 | 第45页 |
| ·低温处理对Pro含量的影响 | 第45-46页 |
| 5 低温处理对叶绿体的影响 | 第46-47页 |
| 第六章 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-56页 |
| 缩写词 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 发表论文 | 第58页 |