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耐盐基因胆碱单加氧酶基因和甜菜碱醛脱氢酶基因转化大豆的研究

前言第1-25页
第一部分 大豆遗传转化研究第25-67页
 1 农杆菌介导法的遗传转化第25-61页
   ·试验材料第25页
     ·转化受体材料第25页
     ·非转化受体材料第25页
   ·试剂第25页
   ·培养基第25-26页
   ·菌株和质粒第26-27页
   ·主要仪器设备第27页
   ·PCR引物第27-28页
   ·实验方法第28-34页
     ·质粒的提取第28-30页
     ·质粒携带基因的鉴定第30-32页
     ·大肠杆菌感受态的制备和转化第32-33页
     ·转化农杆菌第33-34页
   ·农杆菌介导的大豆的遗传转化研究方法第34-45页
     ·大豆子叶节选择压的确定第34页
     ·农杆菌工程菌液的制备第34-35页
     ·大豆子叶节培养和处理第35页
     ·大豆子叶节的转化第35页
     ·大豆转基因植株分子生物学检测第35-45页
   ·结果与分析第45-59页
     ·大豆子叶节抗生素选择压的确定第45-49页
     ·不同大豆品种子叶节NaCl选择压的确定第49-52页
     ·农杆菌转化胆碱单加氧酶基因和甜菜碱醛脱氢酶基因条件的优化第52-55页
     ·抗性大豆子叶节的分化、出苗第55页
     ·T_0代转耐盐基因大豆再生植株的分子生物学检测第55-59页
     ·T_0代转耐盐基因大豆再生植株的NaCl耐盐试验第59页
   ·讨论第59-61页
 2. 大豆花粉管通道的遗传转化第61-67页
   ·材料与操作方法第61-63页
     ·材料第61页
     ·外源 DNA制备、导入及检测第61-63页
   ·结果与分析第63-66页
     ·大豆苗期NaCl选择压的确定第63-65页
     ·T_0代转耐盐基因大豆再生植株的分子生物学检测第65-66页
     ·T_0代转耐盐基因大豆再生植株的NaCl耐盐试验第66页
   ·讨论第66-67页
第二部分 转基因大豆耐盐相关的生理生化指标检测第67-77页
 1. 试验材料与方法第67-69页
   ·供试材料第67页
   ·试验方法第67-69页
     ·田间T_0代转耐盐基因大豆的生理生化指标测定第67页
     ·转基因大豆耐盐相关的生理生化检测指标与方法第67-69页
 2. 结果与分析第69-75页
   ·成活的转耐盐基因PCR阳性大豆植株统计第69页
   ·转基因大豆耐盐相关的生理生化检测结果第69-75页
     ·相对电导率的测定第69-73页
     ·大分子渗漏值的测定第73-74页
     ·甜菜碱含量的测定第74页
     ·BADH活性的测定第74页
     ·丙二醛(MDA)含量的测定第74页
     ·脯氨酸的测定第74-75页
 3 讨论第75-77页
第三部分 结论第77-78页
附录第78-79页
参考文献第79-85页
图版说明第85-93页
作者简历第93-94页
致谢第94页

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