| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述——CED-9基因以及高等植物的PCD研究进展 | 第8-21页 |
| 1.CED-9基因与线虫PCD | 第8-11页 |
| ·CED-9基因与线虫PCD | 第8-9页 |
| ·CED-9的功能及蛋白质结构 | 第9-10页 |
| ·CED-9在线虫PCD核心途径中的调控机制 | 第10-11页 |
| 2.高等植物细胞死亡及PCD的形态特征 | 第11-12页 |
| 3.高等植物与环境相互作用中的PCD | 第12-19页 |
| ·环境胁迫因子的类型 | 第12-17页 |
| ·植物PCD与抗病性 | 第13-14页 |
| ·植物PCD与低温胁迫 | 第14页 |
| ·植物PCD与缺氧胁迫 | 第14-15页 |
| ·植物PCD与抗盐性 | 第15-16页 |
| ·植物PCD与金属离子胁迫 | 第16-17页 |
| ·环境胁迫诱导PCD的特点 | 第17-18页 |
| ·环境胁迫诱导PCD的重要信号分子 | 第18-19页 |
| 4.CED-9在高等植物PCD中的研究进展 | 第19-20页 |
| ·CED-9在植物中的作用 | 第19页 |
| ·CED-9基因在植物中的作用机制 | 第19-20页 |
| 5.植物PCD研究的几点思考 | 第20-21页 |
| 第二章 pER8-ced9诱导型表达载体的构建以及农杆菌介导下的拟南介转化 | 第21-31页 |
| 1.材料和方法 | 第21-27页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·菌株与植物材料 | 第21页 |
| ·质粒 | 第21页 |
| ·酶及主要试剂 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·质粒DNA的小量快速抽提 | 第21-22页 |
| ·质粒DNA的大量制备 | 第22-23页 |
| ·质粒DNA的纯化 | 第23页 |
| ·菌种保存 | 第23页 |
| ·PCR反应体系 | 第23-24页 |
| ·DNA酶切 | 第24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| ·DNA片段回收 | 第24-25页 |
| ·DNA连接 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第25页 |
| ·DNA转化大肠杆菌 | 第25-26页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
| ·DNA转化农杆菌 | 第26页 |
| ·真空浸润法转化拟南芥 | 第26-27页 |
| 2.结果和分析 | 第27-30页 |
| ·pBS-ced9表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·pER8-ced9诱导表达载体的构建 | 第28-29页 |
| ·真空浸润法转化拟南芥 | 第29-30页 |
| 3.讨论 | 第30-31页 |
| ·pER8-ced9诱导型表达载体的特点 | 第30页 |
| ·影响拟南芥真空浸润法转基因效率的因素 | 第30-31页 |
| 第三章 pBI-ced9表达载体的构建和农杆菌介导的烟草转化 | 第31-41页 |
| 1.材料与方法 | 第31-34页 |
| ·实验材料 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·农杆菌的培养及DNA的导入 | 第31页 |
| ·农杆菌介导的转化 | 第31-32页 |
| ·CTAB法大量提取基因组DNA | 第32页 |
| ·PCR检测转基因植株 | 第32-33页 |
| ·Sourthern杂交 | 第33-34页 |
| ·其它实验方法 | 第34页 |
| 2.结果和分析 | 第34-39页 |
| ·pBI-ced9质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·筛选压的确定 | 第35-36页 |
| ·转化植株的再生 | 第36页 |
| ·转化植株的PCR法鉴定 | 第36页 |
| ·转基因烟草的点杂交分析 | 第36页 |
| ·转基因烟草T1代筛选及鉴定 | 第36-39页 |
| 3.讨论 | 第39-41页 |
| ·植物对农杆菌浸染的反应 | 第39-40页 |
| ·抗生素对植株再生的影响 | 第40页 |
| ·CED-9基因整合、表达检测和遗传稳定性 | 第40-41页 |
| 第四章 转CED-9基因烟草抗逆境研究 | 第41-58页 |
| 1.材料和方法 | 第41-44页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-44页 |
| ·烟草总RNA的小量提取 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR基本方法 | 第42-43页 |
| ·筛选MS培养基的配制(1L) | 第43页 |
| ·烟草种子点种 | 第43-44页 |
| ·含铝培养基 | 第44页 |
| ·含盐培养基 | 第44页 |
| 2.结果和分析 | 第44-54页 |
| ·转基因烟草的CED-9表达检测 | 第44-45页 |
| ·烟草对Al胁迫反应 | 第45-48页 |
| ·Al抑制烟草小苗根生长 | 第45-46页 |
| ·CED-9基因可提高烟草对Al胁迫的抗性 | 第46-48页 |
| ·CED-9基因可促进烟草小苗次生根的生长 | 第48页 |
| ·烟草对盐胁迫反应 | 第48-52页 |
| ·盐胁迫抑制烟草生长 | 第48-49页 |
| ·CED-9基因可提高烟草对盐胁迫的抗性 | 第49-52页 |
| ·CED-9基因对烟草生长发育的影响 | 第52-54页 |
| ·CED-9基因对烟草早期生长无显著影响 | 第52-53页 |
| ·CED-9基因对烟草后期生长的影响 | 第53-54页 |
| 3.讨论 | 第54-58页 |
| ·烟草铝胁迫实验体系 | 第54-56页 |
| ·Al浓度梯度 | 第54-55页 |
| ·烟草受到Al胁迫后的表型特征 | 第55页 |
| ·Al对植物生长的影响 | 第55-56页 |
| ·植物抗Al机制 | 第56页 |
| ·烟草盐胁迫实验体系 | 第56-58页 |
| ·盐胁迫实验中浓度的确定 | 第56页 |
| ·CED-9转基因植物抗各种逆境可能的机理 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
