| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| ·双分病毒科病毒 | 第14-20页 |
| ·双分病毒科病毒的总体特征 | 第14页 |
| ·双分病毒科病毒的研究进展 | 第14-19页 |
| ·植物潜隐病毒的研究进展 | 第15-16页 |
| ·双分病毒属病毒的研究进展 | 第16-17页 |
| ·RNA病毒RdRp的特点 | 第17-19页 |
| ·萝卜黄边病毒的概述 | 第19-20页 |
| ·获得dsRNA病毒全长序列克隆的方法 | 第20-22页 |
| ·研究内容及目标 | 第22-24页 |
| ·研究内容 | 第23页 |
| ·预期目标 | 第23-24页 |
| 第二章 病毒形态观察和田间样品检测 | 第24-33页 |
| ·材料与方法 | 第24-28页 |
| ·毒源采集与保存 | 第24页 |
| ·酶与试剂 | 第24页 |
| ·病毒粒子提纯 | 第24-25页 |
| ·从病毒粒子中提取基因组 | 第25页 |
| ·病毒基因组dsRNA的小量提取与分析 | 第25-26页 |
| ·病毒基因组dsRNA的PAGE胶电泳 | 第26-27页 |
| ·田间样品的斑点杂交检测 | 第27-28页 |
| ·点样 | 第27页 |
| ·预杂交 | 第27页 |
| ·~(32)P标记的DNA探针的制备 | 第27-28页 |
| ·杂交反应与洗膜 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·萝卜的田间样品观察 | 第28-29页 |
| ·病毒粒子观察与dsRNA分析结果 | 第29-31页 |
| ·田间样品的斑点杂交检测结果 | 第31-32页 |
| ·小结与讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 病毒基因组克隆及序列分析 | 第33-56页 |
| ·材料和方法 | 第34-42页 |
| ·病毒分离物 | 第34页 |
| ·酶与试剂 | 第34-35页 |
| ·接头及引物设计 | 第35页 |
| ·5％PAGE凝胶电泳条带的透析袋回收 | 第35-36页 |
| ·M-SPAT方法获得目的dsRNA条带的cDNA | 第36-37页 |
| ·dsRNA加接头 | 第36页 |
| ·模板末端补平 | 第36页 |
| ·反转录与cDNA第一链的合成 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增 | 第37页 |
| ·DNA凝胶回收试剂盒回收PCR产物 | 第37-38页 |
| ·DNA片段的连接反应 | 第38页 |
| ·CaCl_2法制备感受态细胞 | 第38-39页 |
| ·重组质粒的转化 | 第39页 |
| ·减法制备重组质粒DNA | 第39-40页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第40页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第40-41页 |
| ·重组质粒插入片段的测序与数据分析 | 第41页 |
| ·重组质粒身份的斑点杂交鉴定 | 第41-42页 |
| ·点样 | 第41页 |
| ·预杂交 | 第41页 |
| ·~(32)P标记的DNA探针的制备 | 第41页 |
| ·杂交反应与洗膜 | 第41-42页 |
| ·结果分析 | 第42-54页 |
| ·dsRNA条带的回收与M-SPAT结果 | 第42-43页 |
| ·质粒抽提和PCR及酶切鉴定结果 | 第43-44页 |
| ·RNA 1与RNA 2的测序与结果分析 | 第44-50页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第44-45页 |
| ·编码的蛋白质序列分析 | 第45-49页 |
| ·RasR 1与RasR 2重组质粒的鉴定结果 | 第49-50页 |
| ·RNA 3与RNA 4的测序与结果分析 | 第50-54页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第50-51页 |
| ·编码的蛋白质序列分析 | 第51-53页 |
| ·RasR 3、RasR 4与RasR 5重组质粒的鉴定结果 | 第53-54页 |
| ·小结与讨论 | 第54-56页 |
| 总讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 附件1：溶液配制 | 第63-66页 |
| 附件2：在读硕士期间发表的论文 | 第66页 |