| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-30页 |
| 1 图位克隆 | 第11-12页 |
| 2 差异表达基因(片段)的获得 | 第12-18页 |
| ·扩增限制性片段长度多态性 | 第12-13页 |
| ·差异显示PCR | 第13页 |
| ·RNA指纹技术 | 第13页 |
| ·差减杂交与抑制性差减杂交 | 第13-14页 |
| ·cDNA代表性差异分析 | 第14-15页 |
| ·表达序列标签 | 第15页 |
| ·序列基因表达测定 | 第15-17页 |
| ·DNA芯片分析 | 第17页 |
| ·全长的cDNA测序 | 第17-18页 |
| 3 基因功能的研究 | 第18-28页 |
| ·计算机预测基因功能 | 第18-19页 |
| ·实验确认基因功能 | 第19-28页 |
| ·基因失活是功能分析的主要手段 | 第19-24页 |
| ·基因敲除 | 第20-21页 |
| ·突变库构建 | 第21-22页 |
| ·反义RNA | 第22页 |
| ·RNAi | 第22-23页 |
| ·内含子归巢突变 | 第23-24页 |
| ·基因的超表达用于功能检测 | 第24页 |
| ·基因捕捉 | 第24-25页 |
| ·激活标签方法 | 第25页 |
| ·噬菌体展示 | 第25-26页 |
| ·酵母双杂交 | 第26-27页 |
| ·蛋白质组 | 第27-28页 |
| 4 本研究的内容、目的 | 第28-30页 |
| 第二章 水稻高温胁迫的cDNA文库的构建 | 第30-45页 |
| 1 材料和方法 | 第30-39页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·材料的培养和处理 | 第30-31页 |
| ·总RNA提取 | 第31页 |
| ·构建cDNA文库 | 第31-39页 |
| ·合成第一链 | 第31-32页 |
| ·LD-PCR扩增cDNA合成第二链 | 第32页 |
| ·蛋白酶K消化 | 第32-33页 |
| ·Sfi I酶切 | 第33页 |
| ·酶切产物通过CHROMA SPIN~(TM)-400分子筛柱 | 第33-35页 |
| ·连接 | 第35页 |
| ·细菌培养物的复苏和准备 | 第35页 |
| ·cDNA文库的包装 | 第35-36页 |
| ·滴度测定 | 第36页 |
| ·计算文库的重组率 | 第36页 |
| ·计算文库cDNA片段的平均长度 | 第36-37页 |
| ·文库的扩增 | 第37-38页 |
| ·噬菌体文库(TriplEx)转化为质粒文库(pTriplEx) | 第38页 |
| ·测序 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-43页 |
| ·总RNA的提取 | 第39页 |
| ·LD-PCR合成的ds cDNA | 第39-40页 |
| ·过柱收集＞500bp的ds cDNA | 第40页 |
| ·未扩增的文库滴度测定 | 第40页 |
| ·计算文库的重组率 | 第40页 |
| ·cDNA文库平均长度 | 第40-41页 |
| ·测序结果 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 OsRwp34的克隆及其功能的初步分析 | 第45-67页 |
| 1 材料和方法 | 第45-58页 |
| ·序列分析 | 第45页 |
| ·Southern杂交 | 第45-50页 |
| ·水稻总DNA的抽提 | 第45-46页 |
| ·水稻总DNA限制性酶切和电泳 | 第46页 |
| ·转膜 | 第46-48页 |
| ·探针的制备 | 第48-49页 |
| ·杂交和洗膜 | 第49页 |
| ·放射自显影 | 第49页 |
| ·X光胶片的冲洗 | 第49-50页 |
| ·从杂交膜上除去探针 | 第50页 |
| ·Northern杂交 | 第50-52页 |
| ·材料及处理 | 第50页 |
| ·RNA抽提 | 第50-51页 |
| ·甲醛／琼脂糖凝胶电泳 | 第51页 |
| ·转膜 | 第51-52页 |
| ·探针的制备 | 第52页 |
| ·杂交和洗膜 | 第52页 |
| ·放射自显影和胶片的冲洗 | 第52页 |
| ·OsRwp34的融合表达重组质粒的构建 | 第52-57页 |
| ·插入片段的准备 | 第52-53页 |
| ·质粒的准备 | 第53-55页 |
| ·连接 | 第55页 |
| ·转化 | 第55-56页 |
| ·PCR筛选阳性菌落 | 第56页 |
| ·酶切鉴定及测序鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组质粒转化E Coli菌株BL21(DE3) | 第57页 |
| ·诱导表达和检测 | 第57页 |
| ·缺失体的构建、诱导表达和检测 | 第57-58页 |
| ·PCR引物设计 | 第57页 |
| ·缺失体的构建和筛选 | 第57页 |
| ·诱导表达和检测 | 第57-58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-64页 |
| ·OsRwp34 cDNA片段的分离和测序 | 第58-59页 |
| ·OsRwp34的同源性分析 | 第59页 |
| ·OsRwp34水稻染色体中的定位 | 第59-60页 |
| ·Southern blot分析 | 第60页 |
| ·OsRwp34蛋白性质预测 | 第60页 |
| ·OsRwp34在水稻不同品种中的存在表达差异 | 第60-61页 |
| ·pET(28a)OsRwp34表达载体的构建 | 第61-62页 |
| ·OsRwp34的表达产物对大肠杆菌具有毒性作用 | 第62-63页 |
| ·OsRwp34缺失体分析 | 第63-64页 |
| 3 讨论 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 硕士在读期间发表和待发表的论文: | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |