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Xa21基因通过农杆菌介导法转化北方粳稻的研究

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-8页
一、引言第8-19页
 1.1 水稻遗传转化的主要方法第9-11页
 1.2 水稻遗传转化应用的外植体第11-12页
 1.3 水稻遗传转化常用的培养基第12页
 1.4 水稻遗传转化的报告基因、标记基因及选择剂第12-14页
 1.5 外源基因在转基因水稻植株中的遗传特性第14-15页
 1.6 有益农艺性状基因在水稻改良方面的应用第15-16页
 1.7 转基因水稻现存问题第16-18页
 1.8 试验目的及意义第18-19页
二、实验材料与方法第19-37页
 2.1 北方粳稻品种组织培养体系的改良第19-20页
  2.1.1 实验材料第19页
  2.1.2 实验方法第19-20页
   2.1.2.1 水稻愈伤组织的诱导和继代培养第19-20页
   2.1.2.2 水稻植株的再生第20页
 2.2 Xa21基因与载体质粒pCAMBIA 1201的重组第20-28页
  2.2.1 实验材料第20-22页
  2.2.2 实验方法第22-28页
   2.2.2.1 pCAMBIA 1201和PB822质粒的提取第22-23页
   2.2.2.2 质粒pCAMBIA 1201转化大肠杆菌及鉴定第23-25页
   2.2.2.3 质粒pB82的限制性酶切第25-26页
   2.2.2.4 Xa21基因片段的分离及纯化第26-27页
   2.2.2.5 Xa21基因与载体pCAMBIA 1201重组第27页
   2.2.2.6 新构建质粒冷冻热激法转化农杆菌第27-28页
   2.2.2.7 插入片断Xa21基因的测续第28页
 2.3 Xa21基因的农杆菌介导法转化水稻第28-37页
  2.3.1 实验材料第28-29页
  2.3.2 实验方法第29-37页
   2.3.2.1 水稻愈伤组织对潮霉素敏抗测定第29-30页
   2.3.2.2 转化受体材料的制备第30页
   2.3.2.3 农杆菌介导法转化水稻胚性愈伤组织第30-31页
   2.3.2.4 潮霉素抗性转基因愈伤组织的筛选第31页
   2.3.2.5 转Xa21基因水稻植株的再生第31页
   2.3.2.6 转基因水稻植株的检测第31-37页
    2.3.2.6.1 水稻基因组DNA的SDS法提取及纯化第31-32页
    2.3.2.6.2 转基因水稻植株Gus基因的组织化学分析第32-33页
    2.3.2.6.3 转基因水稻植株PCR检测第33页
    2.3.2.6.4 转基因水稻植株Southern杂交第33-37页
三、结果与分析第37-49页
 3.1 吉林省主栽水稻品种再生培养方法的改良第37-41页
  3.1.1 不同基因型水稻成熟胚愈伤组织诱导及分化频率第37-38页
  3.1.2 继代培养基不同激素水平对水稻愈伤组织分化的影响第38-39页
  3.1.3 干燥处理对水稻愈伤组织分化能力的影响第39-41页
  3.1.4 水稻愈伤组织对潮霉素敏抗测定结果第41页
 3.2 Xa21基因与载体质粒pCAMBIA 1201的重组结果第41-44页
  3.2.1 质粒pCAMBIA 1201 DNA转化大肠杆菌第41页
  3.2.2 质粒PB822的 KpnI限制酶切第41页
  3.2.3 Xa21基因片段与载体pCAMBIA 1201的重组第41-44页
 3.3 Xa21基因的农杆菌介导法转化水稻结果第44-49页
  3.3.1 潮霉素抗性愈伤组织的筛选第44-45页
  3.3.2 转基因水稻植株的再生第45-47页
  3.3.3 转基因水稻植株的检测结果第47-49页
   3.3.3.1 转基因水稻植株Gus基因的组织化学分析结果第47页
   3.3.3.2 转基因水稻植株PCR检测结果第47-48页
   3.3.3.3 转基因水稻植株Southern杂交结果第48-49页
四、结论与讨论第49-51页
 4.1 讨论第49-50页
 4.2 结论第50-51页
五、参考文献第51-62页
致谢词第62页

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