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多花黑麦草遗传连锁图的构建及抗灰叶斑病基因的分子标记

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-14页
第一章 文献综述第14-39页
 1 多花黑麦草及其在畜牧业发展中的作用第14-15页
 2 多花黑麦草灰叶斑病及其研究进展第15-16页
 3 植物抗病的分子遗传学第16-17页
   ·Gene-gene假说第16页
   ·病原体的致病基因第16页
   ·植物的抗病基因第16-17页
   ·植物抗病基因的功能第17页
 4 R基因抗病机制第17-18页
   ·与病原菌非亲和因子有关的抗病机制(avr/R模式)第17-18页
   ·与病原菌亲和因子有关的抗病机制(vIR/R模式)第18页
 5 植物抗病基因标记及DNA分子标记在植物抗病性研究中的应用第18-25页
   ·植物抗病基因标记及抗病性筛选方法的发展概况第18-19页
   ·分子标记主要类型概述第19-22页
   ·分子标记在植物抗病研究中的应用第22-25页
     ·分子遗传图谱的构建第22-23页
     ·抗病基因的定位第23页
     ·分子标记辅助选择第23-25页
   ·分子标记技术存在的问题和应用展望第25页
 6 抗病基因的克隆方法第25-27页
   ·图谱克隆法第25-26页
   ·转座子标签法第26页
   ·R基因的其他克隆方法第26-27页
 7 抗病基因类似物(RGA)及其在抗病基因研究中的应用第27-31页
   ·抗病基因结构特点第27-28页
   ·抗病基因类似物的克隆及其应用研究第28-29页
   ·RGA与抗病基因的关系及RGA应用展望第29-31页
     ·RGA与抗病基因的关系第29-30页
     ·RGA克隆与定位抗病基因存在的问题与展望第30-31页
 8 本试验研究目的及拟解决的关键问题第31-32页
 参考文献第32-39页
第二章 多花黑麦草RGA克隆及其特性研究第39-55页
 1 材料与方法第40-43页
   ·材料第40页
   ·DNA抽提第40页
   ·引物设计和基因组DNA的PCR扩增第40-42页
   ·克隆和测序第42页
   ·序列分析第42页
   ·抗病基因类似物的STS引物设计和引物的扩增验证第42-43页
 2 结果与分析第43-49页
   ·克隆序列分析及引物设计第43-48页
   ·多花黑麦草RGA的STS引物设计及RGA的PCR扩增第48-49页
 3 讨论第49-50页
 4 结论第50-51页
 参考文献第51-55页
第三章 基于SSR、AFLP等标记的多花黑麦草遗传连锁图的构建第55-78页
 1 材料与方法第56-58页
   ·植物材料第56页
   ·基因组DNA提取第56页
   ·SSR分析第56-57页
   ·AFLP分析第57页
   ·EST—CAPS分析第57-58页
   ·RGA—CAPS分析第58页
   ·数据统计和连锁分析第58页
 2 结果与分析第58-72页
   ·SSR引物筛选与多态性分析第58-60页
   ·AFLP多态性的检测第60-61页
   ·EST—CAPS标记分析第61-64页
   ·RGA—CAPS标记分析第64-66页
   ·高密度连锁图的构建第66-72页
 3 讨论第72-74页
   ·SSR标记与连锁图构建第72-73页
   ·AFLP标记与连锁图的构建第73页
   ·RGA及RGA—CAPS标记效率第73-74页
   ·遗传连锁图的图距第74页
 4 结论第74-75页
 参考文献第75-78页
第四章 多花黑麦草抗灰叶斑病基因的分子标记第78-102页
 1 材料与方法第79-82页
   ·多花黑麦草灰叶斑病致病菌的分离及培养第79页
   ·试验材料及抗、感病亲本选择第79页
   ·F1接种鉴定和分离群体选择第79-80页
   ·多花黑麦草抗灰叶斑病基因的RGA-CAPS标记筛选第80-81页
     ·RGA—STS引物筛选和分子标记第80页
     ·RGA标记的克隆和STS引物设计第80-81页
   ·多花黑麦草抗叶斑病基因的EST—CAPS标记筛选第81-82页
     ·STS引物筛选和EST—CAPS标记第81页
     ·EST标记的克隆、测序及序列分析第81-82页
   ·多花黑麦草抗叶斑病基因的AFLP标记筛选第82页
   ·基因型分析和连锁图构建第82页
   ·抗病基因分子标记在抗病性选择中的验证第82页
 2 结果与分析第82-93页
   ·F1群体抗、感病性个体鉴定和F1分离群体的选择第82-83页
   ·多花黑麦草抗叶斑病基因的RGA—CAPS标记筛选第83页
   ·引物RG036G04-1扩增片段序列分析第83-85页
   ·多花黑麦草抗叶斑病基因的EST—CAPS标记筛选第85-90页
     ·STS引物的筛选和EST—CAPS标记第85-88页
     ·p56位点DNA片段序列分析第88-90页
   ·多花黑麦草抗灰叶斑病基因AFLP标记的筛选和区间连锁图构建第90-93页
   ·EST—CAPS标记p56在抗病基因识别中应用第93页
 3 讨论第93-97页
 4 结论第97页
 参考文献第97-102页
第五章 总结第102-105页
 1 论文研究总结论第102-103页
   ·多花黑麦草RGA的克隆及其特性研究第102页
   ·多花黑麦草遗传连锁图的构建第102-103页
   ·多花黑麦草抗灰叶斑病基因的分子标记第103页
 2 研究创新点及展望第103-105页
附录一:缩略词第105-107页
附录二:RGA引物序列及PCR扩增退火温度第107-113页
附录三:攻读博士期间发表的论文第113-114页
致谢第114页

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