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粗毛栓菌的木质纤维素降解酶及其基因克隆

图形目录第1-10页
表格目录第10-11页
中文摘要第11-14页
英文摘要第14-18页
第一章 粗毛栓菌产木质纤维素降解酶发酵条件的研究第18-45页
 摘要第19-20页
 1 引言第20-22页
 2 材料与方法第22-28页
  2.1 菌株第22页
  2.2 主要仪器和试剂第22页
  2.3 培养基第22-24页
  2.4 菌株培养方式和产酶实验类型第24-25页
  2.5 木质纤维素降解酶活力的测定第25-27页
  2.6 酶谱分析方法第27-28页
 3 结果第28-37页
  3.1 振荡和静置培养对T. gallica产锰过氧化物酶和漆酶的影响第28-29页
  3.2 不同氮源对粗毛栓菌产木质纤维素降解酶的影响第29-31页
  3.3 固态发酵条件对粗毛栓菌产木质纤维素降解酶的影响第31-34页
  3.4 粗毛栓菌木聚糖酶、纤维素酶和漆酶的酶谱分析第34-37页
 4 讨论第37-40页
  4.1 培养方式对粗毛栓菌产木质纤维素降解酶的影响第37页
  4.2 粗毛栓菌在麦草固态培养物中产过氧化物酶的特点第37-38页
  4.3 粗毛栓菌木聚糖酶、纤维素酶和漆酶的酶谱分析技术第38-40页
 小结第40-41页
 参考文献第41-45页
第二章 粗毛栓菌锰过氧化物酶和漆酶的纯化及部分性质研究第45-75页
 摘要第46-47页
 1 引言第47-48页
 2 材料与方法第48-56页
  2.1 主要仪器及试剂第48页
  2.2 菌株及培养方式第48页
  2.3 粗酶液的制备第48-49页
  2.4 层析方法第49页
  2.5 蛋白含量的测定第49-50页
  2.6 酶的电泳法制备第50-52页
  2.7 锰过氧化物酶和漆酶分子量的测定第52页
  2.8 锰过氧化物酶和漆酶等电点的测定第52页
  2.9 一种测定蛋白质等电点的新方法第52-56页
 3 结果第56-68页
  3.1 粗毛栓菌锰过氧化物酶和漆酶的柱层析纯化第56-58页
  3.2 MnP和漆酶的活性-PAGE法纯化第58-59页
  3.3 MnP和漆酶分子量的测定第59-61页
  3.4 MnP和漆酶的等电点第61页
  3.5 MnP和漆酶的部分性质分析第61-64页
  3.6 一种等电点测定新方法第64-68页
 4 讨论第68-69页
  4.1 粗毛栓菌木质纤维素降解酶的纯化第68页
  4.2 MnP和漆酶的鉴别第68-69页
 小结第69-70页
 参考文献第70-75页
第三章 用基因芯片技术研究粗毛栓菌的差异表达基因第75-100页
 摘要第76-77页
 1 引言第77-78页
 2 材料与方法第78-82页
  2.1 主要仪器第78页
  2.2 菌株及培养方法第78页
  2.3 RNA的提取第78-79页
  2.4 RNA的电泳检测第79页
  2.5 荧光染料标记DNA的制备及杂交第79-80页
  2.6 成像和数据分析第80-81页
  2.7 DNA测序和序列同源性分析第81-82页
 3 结果第82-93页
  3.1 粗毛栓菌总RNA的分离与质量检测第82-83页
  3.2 cDNA微阵列杂交结果第83-86页
  3.3 杂交芯片上的基因列表第86-89页
  3.4 粗毛栓菌与黄抱原毛平革菌基因序列的同源性分析第89-90页
  3.5 差异表达基因的序列分析第90-93页
 4 讨论第93-96页
  4.1 T. gallica的差异表达基因第93-95页
  4.2 基因芯片技术的优缺点第95-96页
 小结第96-97页
 参考文献第97-100页
第四章 粗毛栓菌锰过氧化物酶及热激蛋白cDNA的克隆和表达第100-133页
 摘要第101-102页
 1 引言第102-103页
 2 材料与方法第103-114页
  2.1 主要器材第103页
  2.2 分子克隆工具酶及生化试剂第103页
  2.3 菌株和质粒第103-106页
  2.4 培养基第106-107页
  2.5 E.coli质粒DNA的提取第107页
  2.6 引物设计第107-109页
  2.7 逆转录和总cDNA的 PCR扩增第109页
  2.8 PCR反应第109-110页
  2.9 PCR产物的纯化第110页
  2.10 限制性内切酶反应和DNA连接反应第110-111页
  2.11 大肠杆菌的转化第111页
  2.12 酵母菌转化第111-112页
  2.13 重组子的鉴定第112-113页
  2.14 DNA序列测定和分析第113页
  2.15 表型重组酵母的诱导表达第113-114页
 3 结果第114-123页
  3.1 T. gallica总cDNA的合成第114页
  3.2 T. gallica锰过氧化物酶cDNA的克隆与鉴定第114-117页
  3.3 T. gallica热激蛋白cDNA的克隆与鉴定第117-121页
  3.4 热激蛋白cDNA在毕赤酵母中的表达第121-123页
 4 讨论第123-129页
  4.1 T. gallica锰过氧化物酶cDNA片段的密码子偏爱性分析第123-124页
  4.2 T. gallica锰过氧化物酶cDNA序列的同源性分析第124-127页
  4.3 T. gallica热激蛋白cDNA的密码子偏爱性分析第127页
  4.4 T. gallica热激蛋白cDNA的同源性分析第127-129页
 小结第129-130页
 参考文献第130-133页
文献综述 锰过氧化物酶基因表达调控研究进展第133-158页
 摘要第134-135页
 1 引言第135页
 2 锰过氧化物酶的来源第135-137页
 3 锰过氧化物酶及其基因的生物化学第137-141页
  3.1 锰过氧化物酶的化学组成和结构第137-139页
  3.2 锰过氧化物酶的催化反应第139页
  3.3 锰过氧化物酶基因的结构特点第139-141页
 4 锰过氧化物酶基因的表达调控第141-147页
  4.1 锰过氧化物酶基因表达研究概况第141-143页
  4.2 表达调控第143-147页
 5 锰过氧化物酶的应用第147-148页
  5.1 生物制浆第147页
  5.2 环境保护方面的应用第147-148页
 6 展望第148-149页
 参考文献第149-158页
致谢第158-159页
在读期间的研究成果第159-160页
声明第160页

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