图形目录 | 第1-10页 |
表格目录 | 第10-11页 |
中文摘要 | 第11-14页 |
英文摘要 | 第14-18页 |
第一章 粗毛栓菌产木质纤维素降解酶发酵条件的研究 | 第18-45页 |
摘要 | 第19-20页 |
1 引言 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-28页 |
2.1 菌株 | 第22页 |
2.2 主要仪器和试剂 | 第22页 |
2.3 培养基 | 第22-24页 |
2.4 菌株培养方式和产酶实验类型 | 第24-25页 |
2.5 木质纤维素降解酶活力的测定 | 第25-27页 |
2.6 酶谱分析方法 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-37页 |
3.1 振荡和静置培养对T. gallica产锰过氧化物酶和漆酶的影响 | 第28-29页 |
3.2 不同氮源对粗毛栓菌产木质纤维素降解酶的影响 | 第29-31页 |
3.3 固态发酵条件对粗毛栓菌产木质纤维素降解酶的影响 | 第31-34页 |
3.4 粗毛栓菌木聚糖酶、纤维素酶和漆酶的酶谱分析 | 第34-37页 |
4 讨论 | 第37-40页 |
4.1 培养方式对粗毛栓菌产木质纤维素降解酶的影响 | 第37页 |
4.2 粗毛栓菌在麦草固态培养物中产过氧化物酶的特点 | 第37-38页 |
4.3 粗毛栓菌木聚糖酶、纤维素酶和漆酶的酶谱分析技术 | 第38-40页 |
小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
第二章 粗毛栓菌锰过氧化物酶和漆酶的纯化及部分性质研究 | 第45-75页 |
摘要 | 第46-47页 |
1 引言 | 第47-48页 |
2 材料与方法 | 第48-56页 |
2.1 主要仪器及试剂 | 第48页 |
2.2 菌株及培养方式 | 第48页 |
2.3 粗酶液的制备 | 第48-49页 |
2.4 层析方法 | 第49页 |
2.5 蛋白含量的测定 | 第49-50页 |
2.6 酶的电泳法制备 | 第50-52页 |
2.7 锰过氧化物酶和漆酶分子量的测定 | 第52页 |
2.8 锰过氧化物酶和漆酶等电点的测定 | 第52页 |
2.9 一种测定蛋白质等电点的新方法 | 第52-56页 |
3 结果 | 第56-68页 |
3.1 粗毛栓菌锰过氧化物酶和漆酶的柱层析纯化 | 第56-58页 |
3.2 MnP和漆酶的活性-PAGE法纯化 | 第58-59页 |
3.3 MnP和漆酶分子量的测定 | 第59-61页 |
3.4 MnP和漆酶的等电点 | 第61页 |
3.5 MnP和漆酶的部分性质分析 | 第61-64页 |
3.6 一种等电点测定新方法 | 第64-68页 |
4 讨论 | 第68-69页 |
4.1 粗毛栓菌木质纤维素降解酶的纯化 | 第68页 |
4.2 MnP和漆酶的鉴别 | 第68-69页 |
小结 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-75页 |
第三章 用基因芯片技术研究粗毛栓菌的差异表达基因 | 第75-100页 |
摘要 | 第76-77页 |
1 引言 | 第77-78页 |
2 材料与方法 | 第78-82页 |
2.1 主要仪器 | 第78页 |
2.2 菌株及培养方法 | 第78页 |
2.3 RNA的提取 | 第78-79页 |
2.4 RNA的电泳检测 | 第79页 |
2.5 荧光染料标记DNA的制备及杂交 | 第79-80页 |
2.6 成像和数据分析 | 第80-81页 |
2.7 DNA测序和序列同源性分析 | 第81-82页 |
3 结果 | 第82-93页 |
3.1 粗毛栓菌总RNA的分离与质量检测 | 第82-83页 |
3.2 cDNA微阵列杂交结果 | 第83-86页 |
3.3 杂交芯片上的基因列表 | 第86-89页 |
3.4 粗毛栓菌与黄抱原毛平革菌基因序列的同源性分析 | 第89-90页 |
3.5 差异表达基因的序列分析 | 第90-93页 |
4 讨论 | 第93-96页 |
4.1 T. gallica的差异表达基因 | 第93-95页 |
4.2 基因芯片技术的优缺点 | 第95-96页 |
小结 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-100页 |
第四章 粗毛栓菌锰过氧化物酶及热激蛋白cDNA的克隆和表达 | 第100-133页 |
摘要 | 第101-102页 |
1 引言 | 第102-103页 |
2 材料与方法 | 第103-114页 |
2.1 主要器材 | 第103页 |
2.2 分子克隆工具酶及生化试剂 | 第103页 |
2.3 菌株和质粒 | 第103-106页 |
2.4 培养基 | 第106-107页 |
2.5 E.coli质粒DNA的提取 | 第107页 |
2.6 引物设计 | 第107-109页 |
2.7 逆转录和总cDNA的 PCR扩增 | 第109页 |
2.8 PCR反应 | 第109-110页 |
2.9 PCR产物的纯化 | 第110页 |
2.10 限制性内切酶反应和DNA连接反应 | 第110-111页 |
2.11 大肠杆菌的转化 | 第111页 |
2.12 酵母菌转化 | 第111-112页 |
2.13 重组子的鉴定 | 第112-113页 |
2.14 DNA序列测定和分析 | 第113页 |
2.15 表型重组酵母的诱导表达 | 第113-114页 |
3 结果 | 第114-123页 |
3.1 T. gallica总cDNA的合成 | 第114页 |
3.2 T. gallica锰过氧化物酶cDNA的克隆与鉴定 | 第114-117页 |
3.3 T. gallica热激蛋白cDNA的克隆与鉴定 | 第117-121页 |
3.4 热激蛋白cDNA在毕赤酵母中的表达 | 第121-123页 |
4 讨论 | 第123-129页 |
4.1 T. gallica锰过氧化物酶cDNA片段的密码子偏爱性分析 | 第123-124页 |
4.2 T. gallica锰过氧化物酶cDNA序列的同源性分析 | 第124-127页 |
4.3 T. gallica热激蛋白cDNA的密码子偏爱性分析 | 第127页 |
4.4 T. gallica热激蛋白cDNA的同源性分析 | 第127-129页 |
小结 | 第129-130页 |
参考文献 | 第130-133页 |
文献综述 锰过氧化物酶基因表达调控研究进展 | 第133-158页 |
摘要 | 第134-135页 |
1 引言 | 第135页 |
2 锰过氧化物酶的来源 | 第135-137页 |
3 锰过氧化物酶及其基因的生物化学 | 第137-141页 |
3.1 锰过氧化物酶的化学组成和结构 | 第137-139页 |
3.2 锰过氧化物酶的催化反应 | 第139页 |
3.3 锰过氧化物酶基因的结构特点 | 第139-141页 |
4 锰过氧化物酶基因的表达调控 | 第141-147页 |
4.1 锰过氧化物酶基因表达研究概况 | 第141-143页 |
4.2 表达调控 | 第143-147页 |
5 锰过氧化物酶的应用 | 第147-148页 |
5.1 生物制浆 | 第147页 |
5.2 环境保护方面的应用 | 第147-148页 |
6 展望 | 第148-149页 |
参考文献 | 第149-158页 |
致谢 | 第158-159页 |
在读期间的研究成果 | 第159-160页 |
声明 | 第160页 |