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菜籽肽的制备及其生物活性的研究

摘要第1-11页
英文摘要第11-14页
缩略语表第14-15页
前言第15-19页
 1 植物源多肽的研究和利用现状第15-16页
 2 研究菜籽肽的关键技术第16页
 3 肽的吸收及生理作用第16-18页
 4 本研究的目的及研究内容第18-19页
第一章 双低菜籽饼粕分离蛋白制备及理化性质第19-31页
 1 材料与方法第19-22页
   ·实验材料与主要试剂第19页
   ·主要仪器第19页
   ·测定方法第19-20页
   ·研究方法第20-22页
     ·操作方法第20页
     ·菜籽蛋白的凝胶电泳第20页
     ·蛋白质含量的测定第20页
     ·各分离蛋白氨基酸组成分析第20-21页
     ·菜籽分离蛋白各组分功能性质的研究方法第21-22页
       ·吸水性第21页
       ·吸油性第21页
       ·乳化性与乳化稳定性第21-22页
 2 结果与分析第22-27页
   ·华杂3号菜籽饼粕组成分析第22页
   ·分离蛋白中各组分蛋白质含量及比例第22页
   ·各组分蛋白质电泳结果第22-23页
   ·各组分蛋白氨基酸组成第23-25页
   ·功能性质第25-27页
 3 小结第27页
 4 讨论第27-30页
 参考文献第30-31页
第二章 菜籽清蛋白多肽的制备第31-49页
 1 材料与方法第31-34页
   ·材料第31-32页
     ·实验材料第31页
     ·主要试剂第31-32页
     ·主要仪器第32页
   ·实验方法第32-34页
     ·菜籽蛋白的酶解反应第32页
     ·蛋白质含量测定第32页
     ·蛋白质含量测定第32页
     ·氨基态氮测定第32页
     ·水解度(DH)的测定第32页
     ·复合酶水解菜籽清蛋白第32页
     ·对温度、酶用量和底物浓度的响应面实验第32-33页
     ·菜籽肽苦味的感官评价第33页
     ·测定凝胶柱的性质参数并测量各组分的分子量第33页
     ·氨基酸组成分析第33页
     ·菜籽肽各级分的紫外光谱第33-34页
     ·菜籽肽各级分的红外光谱第34页
 2 结果与分析第34-46页
   ·原料前处理对水解度的影响第34页
   ·酶水解条件的试验结果第34-39页
     ·工艺参数对水解度的影响第34-37页
       ·起始反应的pH值对酶解的影响第34-35页
       ·底物浓度的影响第35页
       ·酶浓度的影响第35-36页
       ·温度的影响第36-37页
     ·响应曲面法分析第37-39页
   ·复合酶分步水解实验第39-40页
   ·菜籽肽的分离纯化第40-41页
   ·菜籽肽级分分子量的测定第41-42页
   ·菜籽肽的基本理化性质第42-46页
     ·多肽各级分中蛋白质和总糖含量分析第43页
     ·多肽各级分中氨基酸含量分析第43-44页
     ·菜籽肽紫外光谱第44页
     ·菜籽肽各级分的红外光谱第44-46页
 3 结论第46页
 4 讨论第46-48页
 参考文献第48-49页
第三章 菜籽肽抗氧化活性第49-57页
 1 材料与方法第49-51页
   ·材料第49-50页
     ·实验材料第49页
     ·主要试剂第49页
     ·主要仪器第49-50页
   ·实验方法第50-51页
     ·体内实验方法第50页
     ·菜籽肽还原能力的测定第50页
     ·大豆肽清除.OH效果的测定第50页
     ·菜籽肽对活性氧的影响第50页
     ·菜籽肽对红细胞自氧化溶血的影响第50-51页
     ·菜籽肽对小鼠肝组织匀浆丙二醛生成的影响第51页
 2 结果与分析第51-55页
   ·血清中的MDA值第51-52页
   ·菜籽肽的还原能力第52页
   ·菜籽肽对.OH的清除作用第52页
   ·菜籽肽对活性氧的影响第52-53页
   ·菜籽肽对红细胞自氧化溶血的影响第53-54页
   ·菜籽肽对小鼠肝组织匀浆丙二醛生成的影响第54-55页
 3 小结第55页
 4 讨论第55-56页
 参考文献第56-57页
第四章 菜籽肽抗肿瘤活性的研究第57-67页
 1 材料与方法第57-60页
   ·材料第57-58页
     ·实验材料第57页
     ·主要试剂第57-58页
     ·主要仪器第58页
   ·实验方法第58-60页
     ·接种方法第58页
     ·实验方法第58-59页
     ·肿瘤抑制实验第59页
     ·巨噬细胞吞噬实验第59页
     ·迟发型超敏反应(DTH)第59页
     ·血清溶血素含量测定第59页
     ·菜籽多肽对小鼠血清MDA的影响第59页
     ·菜籽多肽对小鼠血清SOD的影响第59-60页
     ·统计方法第60页
     ·组织切片病理学观察第60页
 2 实验结果与分析第60-64页
   ·菜籽肽对荷S_(180)瘤小鼠的抑瘤作用荷对小鼠免疫器官的影响第60-61页
   ·菜籽多肽对荷S_(180)瘤小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响第61页
   ·菜籽肽对荷S180小鼠迟发型超敏反应的影响第61-62页
   ·菜籽肽对荷S180小鼠血清溶血素含量的影响第62页
   ·菜籽肽对荷S_(180)瘤小鼠血清SOD的影响第62-63页
   ·菜籽多肽对荷S180瘤小鼠血清MDA的影响第63页
   ·肿瘤组织病理学观察第63-64页
 3 小结第64-65页
 4 讨论第65-66页
 参考文献第66-67页
第五章 菜籽肽与宫颈癌Hela细胞凋亡的研究第67-90页
 1 材料与方法第67-73页
   ·材料第67-68页
     ·实验材料第67页
     ·主要试剂第67-68页
     ·主要仪器第68页
   ·实验方法第68-73页
     ·样品制备第68页
     ·细胞培养第68页
     ·MTT法检测多肽对Hela细胞的生长抑制第68-69页
     ·形态学观察第69-70页
       ·可见光下的形态观察第69页
       ·电镜观察第69页
       ·Hela细胞荧光下的凋亡形态观察第69-70页
         ·受检细胞的收集第69-70页
         ·吖啶橙/溴乙锭双染色及荧光显微镜观察第70页
     ·菜籽肽对Hela细胞DNA的损伤第70-72页
       ·DNA提取及电泳第70页
       ·单细胞电泳检测RSP-2对Hela细胞DNA的损伤作用第70-72页
         ·试剂与配制第71页
         ·细胞培养第71页
         ·样品处理第71页
         ·制片第71-72页
         ·电泳第72页
         ·镜检及结果评价第72页
     ·原位(缺口)末端标记法(TUNEL)检测Hela细胞凋亡第72-73页
       ·细胞培养第72页
       ·样品处理及涂片第72页
       ·细胞凋亡染色观察第72-73页
     ·流式细胞仪检测菜籽肽对Hela细胞细胞周期的影响第73页
     ·RT-PCR检测菜籽肽对Hela细胞的bcl-2基因表达的影响第73页
 2 结果与分析第73-82页
   ·MTT法实验结果第73-74页
   ·Hela细胞形态学观察第74-78页
     ·可见光观察人宫颈癌细胞形态学变化第74-75页
     ·透射电镜观察人宫颈癌细胞形态学变化第75-76页
     ·吖啶橙/溴乙锭双染法观察菜籽肽对Hela细胞凋亡的影响第76-77页
     ·不同浓度菜籽肽对Hela细胞凋亡的影响第77-78页
   ·RSP-2对人宫颈癌Hela细胞细胞周期的影响第78-79页
   ·菜籽肽对Hela细胞DNA的损伤作用第79-80页
     ·DNA电泳第79页
     ·单细胞电泳检测菜籽肽对Hela细胞DNA的损伤作用第79-80页
   ·TUNEL检测Hela细胞凋亡第80-82页
   ·菜籽肽对人宫颈癌细胞Hela的bcl-2基因表达的影响第82页
 3 讨论第82-87页
   ·关于细胞凋亡检测方法学的几个问题第82-84页
   ·菜籽肽与细胞增殖周期之间的关系第84-85页
   ·菜籽肽对Hela细胞的DNA损伤第85页
   ·菜籽肽与肿瘤细胞的基因表达的关系第85-86页
     ·RT-PCR检测中扩增β-actin目的片段第85页
     ·细胞凋亡的相关因素第85-86页
     ·菜籽肽对Hela细胞Bcl-2基因表达的影响第86页
   ·问题与展望第86-87页
     ·存在的问题第86-87页
     ·研究方向第87页
 4 结论第87-88页
 参考文献第88-90页
第六章 菜籽肽降血压活性研究第90-97页
 1 材料与方法第90-92页
   ·实验材料第90页
   ·主要仪器第90-91页
   ·实验方法第91-92页
     ·多肽对离体大鼠ACE活性的影响第91页
     ·专一性抑制实验第91页
     ·单酶及复合酶作用产物对ACE活性抑制的影响第91页
     ·不同浓度RSP-3对离体大鼠ACE活性的影响第91-92页
 2 结果与分析第92-94页
   ·单一酶作用产物对ACE活性抑制的影响第92页
   ·复合酶作用对产物ACE抑制活性的影响第92-93页
   ·菜籽多肽粗品及各级分对离体大鼠ACE活性的影响第93-94页
   ·不同浓度RSP-3对离体大鼠ACE活性的抑制第94页
   ·产品的氨基酸组成分析第94页
   ·产品分子量分布研究第94页
 3 讨论第94-96页
 参考文献第96-97页
第七章 结论第97-99页
第八章 文献综述:植物源活性多肽的研究进展第99-122页
参考文献第122-130页
致谢第130-131页
附录一 图表目录(按先后顺序排列)第131-133页
附录二 博士期间发表文章第133-134页

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