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西红花(Crocus sativus)7,8-二加氧酶基因(CsZCD)的克隆表达、西红花甙的药理作用及药材的鉴别研究

图片目录第1-13页
表格目录第13-15页
中文摘要第15-19页
英文摘要第19-23页
第一部分 文献综述—西红花的研究概况第23-58页
 1.西红花的形态特征、分类地位及国内外的应用历史第23-24页
 2.西红花的发育生物学研究第24-28页
  2.1 西红花根系的发育研究第24-26页
  2.2 西红花球茎的发育研究第26-27页
  2.3 西红花花器官的发育研究第27-28页
 3.西红花的栽培技术研究第28-31页
  3.1 露地越冬繁殖球茎技术第29-30页
  3.2 室内无土栽培技术第30-31页
 4.西红花的组织培养研究第31-36页
  4.1 快繁第31-34页
  4.2 花器官培养第34-36页
  4.3 细胞培养第36页
 5.西红花的化学成分及分离技术研究第36-38页
  5.1 柱头中化学成分第36页
  5.2 花被中化学成分第36-37页
  5.3 芽中的化学成分第37页
  5.4 氨基酸第37页
  5.5 西红花糖甙的分离、制备方法第37-38页
 6.西红花的药理药效及临床应用的研究第38-42页
  6.1 抗肿瘤的作用第39-40页
  6.2 对肝胆的作用第40-41页
  6.3 对肾脏的作用第41页
  6.4 对循环系统的作用第41页
  6.5 抗氧化作用第41-42页
  6.6 免疫调节作用第42页
 7.西红花药材的鉴别研究第42-44页
  7.1 性状鉴别第42-43页
  7.2 理化鉴别第43页
  7.3 显微特征第43页
  7.4 色谱鉴定第43-44页
  7.5 DNA分子遗传标记技术第44页
 8.西红花的分子生物学研究第44-46页
 9.国内外研究和解决西红花资源问题的主要途径第46-47页
 10.本实验室的研究现状及本论文拟进行的研究工作第47-50页
  10.1 西红花组织培养研究第47-48页
  10.2 西红花有效成分的分离纯化及西红花酸的化学合成方法研究第48-49页
  10.3 西红花分子生物学研究第49页
  10.4 西红花的鉴定研究第49页
  10.5 西红花甙治疗脑血管疾病的药理及药效研究第49-50页
 参考文献第50-58页
第二部分 西红花遗传转化体系的建立第58-65页
 第一章 西红花基因枪转化研究初报第58-65页
  1.材料与方法第58-60页
   1.1 材料第58-59页
   1.2 方法第59-60页
  2.结果与分析第60-62页
   2.1 GUS染色时间的确定第60页
   2.2 轰击前的预处理(高渗处理)第60-61页
   2.3 西红花愈伤组织对卡那霉素的反应第61页
   2.4 基因枪轰击条件的选择第61-62页
   2.5 转化受体轰击后的过渡培养第62页
  3.讨论第62-64页
  参考文献第64-65页
第三部分 西红花酸合成酶(7,8-二加氧酶)基因的研究第65-101页
 第二章 西红花7,8-二加氧酶基因(CsZCD)的克隆及植物表达型载体的构建第65-86页
  1.材料和方法第66-76页
   1.1 材料第66-68页
   1.2 方法第68-76页
  2.实验结果第76-84页
   2.1.柱头总RNA和幼叶DNA的质量分析第76-77页
   2.2 西红花7,8二加氧酶基因片段的克隆第77页
   2.3.PCR产物的大肠杆菌转化子的鉴定第77-78页
   2.4 西红花7,8-二加氧酶基因的测序结果第78-82页
   2.5 CsZCD基因的拷贝数分析第82-83页
   2.6 植物表达载体pB1121-CsZCD的鉴定第83-84页
  3.讨论第84页
  参考文献第84-86页
 第三章 西红花CsZCD基因在大肠杆菌中的表达和蛋白纯化第86-101页
  1 材料和方法第86-94页
   1.1 材料第86-88页
   1.2 方法第88-94页
  2 结果与分析第94-99页
   2.1 表达载体的构建第94-95页
   2.2 重组质粒表达的检测第95-99页
  3 讨论第99页
  参考文献第99-101页
第四部分 西红花有效成分的药理作用研究第101-133页
 第四章 西红花甙的毒理学实验研究第101-111页
  1 材料第101-102页
   1.1 受试药物第101页
   1.2 实验动物第101-102页
  2 方法第102-103页
   2.1 小鼠(口服)最大耐受量(MTD)测定第102页
   2.2 小鼠(腹腔注射)半数致死量(LD_(50))测定第102页
   2.3 长期毒理学实验检测项目及方法第102-103页
  3 实验结果第103-110页
   3.1 小鼠(口服)最大耐受量(MTD)测定第103-104页
   3.2 小鼠(腹腔注射)半数致死量(LD_(50))测定第104页
   3.3 对动物——般状况及体重的影响第104页
   3.4 对血液学指标的影响第104-106页
   3.5 对血液生化指标的影响第106-108页
   3.6 对动物脏器指数的影响第108-109页
   3.7 病理检查结果第109-110页
  4 结论第110页
  参考文献第110-111页
 第五章 西红花甙对大鼠局灶性脑缺血的影响第111-120页
  1 材料第111-112页
   1.1 试验药物第111页
   1.2 试验动物第111-112页
   1.3 试验仪器第112页
  2 方法第112-113页
  3 结果第113-115页
   3.1 对大鼠神经症状的影响第113页
   3.2 对脑梗塞范围的影响第113-114页
   3.3 对血清SOD活性及MDA含量的影响第114页
   3.4 病理学检查第114-115页
  4 讨论第115页
  5 小结第115-116页
  参考文献第116-120页
 第六章 西红花甙的一般药理学研究——对麻醉犬呼吸、血压、心率及心电图的影响第120-127页
  1 材料第120页
   1.1 药物第120页
   1.2 动物第120页
  2 方法第120-121页
  3 结果第121页
   3.1 对呼吸频率平口呼吸幅度的影响第121页
   3.2.对动脉血压、心率的影响第121页
   3.3.对标准Ⅱ导心电图的影响第121页
  4 小结第121页
  参考文献第121-127页
 第七章 RP-HPLC法测定家免血浆中西红花甙-1浓度及其药代动力学研究第127-133页
  1 材料和方法第128-129页
   1.1 仪器第128页
   1.2 药品与试剂第128页
   1.3 标准溶液的配制第128页
   1.4 实验动物第128页
   1.5 色谱条件第128页
   1.6 血浆样品处理第128-129页
  2 结果第129-131页
   2.1 方法学研究第129页
   2.2 标准曲线及最低检测浓度测定第129页
   2.3 方法回收率试验第129-130页
   2.4 方法精密度实验第130页
   2.5 样品稳定性考察第130页
   2.6 家兔体内药代动力学试验第130-131页
  3 讨论第131页
  参考文献第131-133页
第五部分西红花药材、近源种及商品易混种的化学及分子鉴别第133-161页
 第八章 不同产地西红花及其近源品种西红花甙-1的化学指纹图谱研究第133-145页
  1 材料和方法第134-137页
   1.1 材料第134-136页
   1.2 方法第136-137页
  2 结果与分析第137-143页
   2.1 薄层层析(TLC)分析第137-139页
   2.2 紫外检测(UV-spectrometry)第139-141页
   2.3 高效液相色谱(HPLC)测定第141-143页
  3 讨论第143-144页
  参考文献第144-145页
 第九章 西红花与其易混品的ITS序列分析第145-155页
  1.材料和方法第146-147页
   1.1 材料第146页
   1.2 试剂第146页
   1.3 仪器第146页
   1.4 总DNA提取第146页
   1.5 DNA扩增第146-147页
   1.6 ITS测序第147页
  2.结果第147-152页
  3.讨论第152-153页
  参考文献第153-155页
 第十章 ISSR标记在西红花及其近源品种鉴别中的应用第155-161页
  1 材料和方法第155-157页
   1.1 材料第155-156页
   1.2 试剂第156页
   1.3 主要仪器第156页
   1.4 方法第156-157页
  2 结果与分析第157-159页
   2.1 ISSR引物筛选及实验条件研究第157-158页
   2.2 ISSR标记对西红花及其近缘种的鉴定第158页
   2.3 西红花及其近源品种遗传关系分析第158-159页
  3 讨论第159-160页
  参考文献第160-161页
致谢第161-162页
在读期间发表和待发表论文及获奖情况第162-163页
声明第163页

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