| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 文献综述 EPSP合成酶的研究进展 | 第10-32页 |
| 1.莽草酸途径 | 第10-12页 |
| 2.除草剂草甘膦的性质和作用机理 | 第12-16页 |
| ·草甘膦的理化特性 | 第13页 |
| ·草甘膦的作用机理 | 第13-15页 |
| ·草甘膦抑制芳香族氨基酸的生物合成 | 第13-14页 |
| ·草甘膦抑制植物生长的三种机制 | 第14页 |
| ·草甘膦的靶标酶是EPSP合成酶 | 第14-15页 |
| ·草甘膦是PEP的竞争性抑制物 | 第15页 |
| ·草甘膦的代谢 | 第15-16页 |
| ·微生物对草甘膦的降解代谢 | 第15-16页 |
| ·高等植物对草甘膦的代谢 | 第16页 |
| 3.EPSP合成酶 | 第16-23页 |
| ·EPSP合成酶的物理性质 | 第17页 |
| ·EPSP合成酶的生化性质 | 第17-18页 |
| ·EPSP合成酶的分类 | 第18页 |
| ·植物中EPSP合成酶的定位和转运肽 | 第18-19页 |
| ·EPSP合成酶的三位结构 | 第19-21页 |
| ·EPSP合成酶的基因 | 第21-23页 |
| 4.草甘膦抗性农作物的获得 | 第23-30页 |
| ·培育草甘膦农作物的必要性和意义 | 第23-24页 |
| ·EPSPs的活性位点和抗草甘膦的突变EPSPs基因 | 第24-27页 |
| ·抗草甘膦农作物的获得 | 第27-29页 |
| ·自然界中产生的草甘膦抗性植物 | 第27页 |
| ·基因突变引起草甘膦抗性 | 第27页 |
| ·基因扩增引起草甘膦抗性 | 第27-28页 |
| ·代谢酶基因抗草甘膦转基因作物 | 第28页 |
| ·CP4 EPSP合成酶抗草甘膦转基因作物 | 第28-29页 |
| ·抗草甘膦转基因作物的安全性 | 第29-30页 |
| 5.结语 | 第30-32页 |
| 白菜型油菜(BraSsl’Ca Ca朋p郎打/5) Epsp合成酶全长cONA的克隆与原核表达 | 第32-60页 |
| 前言 | 第32-34页 |
| 第一部分 白菜型油菜EPSPs基因全长cDNA的提取、克隆和分析 | 第34-51页 |
| 1.材料和方法 | 第34-39页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·试剂及配方 | 第34-35页 |
| ·方法 | 第35-39页 |
| ·总RNA的提取和检测 | 第35-37页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第37页 |
| ·EPSP合成酶基因5’端cDNA的PCR | 第37-38页 |
| ·PCR产物的回收 | 第38页 |
| ·PCR回收产物的克隆 | 第38-39页 |
| ·阳性克隆的检测 | 第39页 |
| ·PCR产物的测序和分析 | 第39页 |
| 2.结果 | 第39-49页 |
| ·总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·EPSP合成酶基因cDNA 5’端的扩增 | 第40页 |
| ·白菜型油菜EPSPs基因全长cDNA的序列及推导蛋白质序列 | 第40-43页 |
| ·EPSP合成酶cDNA的核酸序列分析 | 第43-46页 |
| ·EPSP合成酶cDNA的推导蛋白质序列分析 | 第46-49页 |
| 3.讨论 | 第49-51页 |
| 第二部分 白菜型油菜EPSP合成酶编码区的原核表达 | 第51-60页 |
| 1.材料和方法 | 第51-56页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·试剂及配方 | 第51-52页 |
| ·方法 | 第52-56页 |
| ·EPSP合成酶基因全长cDNA的扩增 | 第52-53页 |
| ·表达载体EPSPs—GTK的构建 | 第53-55页 |
| ·融合蛋白EPSPS—GST的诱导表达 | 第55页 |
| ·EPSPS—GST融合蛋白的检测 | 第55-56页 |
| 2.结果 | 第56-57页 |
| ·白菜型油菜EPSP合成酶基因编码区的扩增 | 第56页 |
| ·表达载体EPSPs—GTK的构建和检测 | 第56-57页 |
| ·EPSPs—GST融合蛋白的SDS-PAGE检测 | 第57页 |
| 3.讨论 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-68页 |
| 在读硕士期间发表论文情况 | 第68-69页 |
| 声明 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
