| 中英文摘要 | 第1-9页 |
| 第一部分 文献综述 | 第9-26页 |
| 1．1 几丁质与几丁质酶 | 第9-18页 |
| 1．1．1 几丁质 | 第9-11页 |
| 1．1．2 几丁质酶 | 第11-15页 |
| 1．1．2．1 微生物几丁质酶 | 第12-14页 |
| 1．1．2．2 植物几丁质酶 | 第14-15页 |
| 1．1．2．3 动物及人的几丁质酶 | 第15页 |
| 1．1．3 几丁质酶的作用 | 第15-17页 |
| 1．1．4 问题与展望 | 第17-18页 |
| 1．2 报告基因 | 第18-24页 |
| 1．2．1 β-半乳糖苷酶基因（Lac Z） | 第18-19页 |
| 1．2．2 β-—葡萄苷酸酶（GUS）基因 | 第19-20页 |
| 1．2．3 绿色荧光蛋白（GFP） | 第20页 |
| 1．2．4 氯霉素乙酰转移酶（Cat）基因 | 第20-21页 |
| 1．2．5 cobA基因 | 第21-22页 |
| 1．2．6 其它报告基因 | 第22-24页 |
| 1．3 未能培养的微生物 | 第24-26页 |
| 第二部分 前言 | 第26-28页 |
| 第三部分 从Aeromonas SUWA-9菌株中克隆几丁质酶基因 | 第28-46页 |
| 3．1 材料、试剂与设备 | 第29-30页 |
| 3．1．1 菌株与质粒 | 第29页 |
| 3．1．2 主要试剂 | 第29-30页 |
| 3．1．3 主要培养基 | 第30页 |
| 3．1．4 主要设备 | 第30页 |
| 3．1．5 主要软件 | 第30页 |
| 3．2 方法 | 第30-32页 |
| 3．2．1 几丁质酶基因的克隆 | 第30-31页 |
| 3．2．2 活性染色 | 第31页 |
| 3．2．3 克隆片段的内切酶谱分析 | 第31页 |
| 3．2．4 Clone-5的亚克隆 | 第31页 |
| 3．2．5 clone-5重组质粒插入片段的核苷酸序列测定 | 第31-32页 |
| 3．2．6 clone-5插入片段核苷酸序列的分析 | 第32页 |
| 3．3 结果与分析 | 第32-43页 |
| 3．3．1 基因组DNA片段的制备 | 第32-33页 |
| 3．3．2 与质粒连接并转入大肠杆菌 | 第33页 |
| 3．3．3 产几丁质酶的重组克隆的筛选 | 第33-34页 |
| 3．3．4 各单克隆菌株的底物检测 | 第34页 |
| 3．3．5 克隆片段的内切酶谱 | 第34-35页 |
| 3．3．6 SDS-PAGE活性染色结果 | 第35-36页 |
| 3．3．7 clone-5的亚克隆 | 第36-37页 |
| 3．3．8 clone-5插入片段的核苷酸序列的测定分析 | 第37-43页 |
| 3．4 讨论 | 第43-46页 |
| 第四部分 从土壤细菌中克隆红色基因 | 第46-56页 |
| 4．1 材料与方法 | 第46-48页 |
| 4．1．1 土样的采集 | 第46页 |
| 4．1．2 土壤细菌DNA样品的制备及基因的克隆 | 第46-47页 |
| 4．1．3 红色细菌的筛选与确证 | 第47页 |
| 4．1．4 重组质粒酶切特性的分析、插入片段的亚克隆及核苷酸序列的测定分析 | 第47页 |
| 4．1．5 红色基因与几丁质酶基因的连接 | 第47-48页 |
| 4．2 结果与分析 | 第48-55页 |
| 4．2．1 土壤细菌DNA样品的制备 | 第48-49页 |
| 4．2．2 土壤细菌DNA片段的制备 | 第49页 |
| 4．2．3 与载体质粒连接并转入大肠杆菌表达 | 第49页 |
| 4．2．4 红色细菌的筛选与确证 | 第49-50页 |
| 4．2．5 重组质粒的酶切特性 | 第50页 |
| 4．2．6 重组质粒插入片段的亚克隆 | 第50-51页 |
| 4．2．7 核苷酸序列的测定分析 | 第51-53页 |
| 4．2．8 与几丁质酶基因的连接 | 第53-55页 |
| 4．3 讨论 | 第55-56页 |
| 第五部分 小结 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录： 撰写及发表的论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
