中文摘要 | 第1-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
1. 综述 | 第10-48页 |
1.1 解毒酶及其应用 | 第10-18页 |
1.1.1 HC-毒素(HC-toxin)与HC-毒素还原酶(HC-toxin reductase) | 第11页 |
1.1.2 烟草野火毒素(tabtoxin)与ttr基因 | 第11-12页 |
1.1.3 菜豆菌毒素与argK基因 | 第12-13页 |
1.1.4 草酸毒素与草酸氧化酶/germin | 第13-18页 |
1.1.4.1 草酸毒素 | 第13-15页 |
1.1.4.2 草酸氧化酶/germin | 第15-18页 |
1.2 抗菌肽与抗菌蛋白 | 第18-27页 |
1.2.1 昆虫抗菌肽 | 第19-20页 |
1.2.2 防御素(defensin) | 第20-22页 |
1.2.3 硫堇(thionin) | 第22-23页 |
1.2.4 核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating proteins,RIPs) | 第23-25页 |
1.2.5 溶菌酶(lysozyme) | 第25-27页 |
1.2.6 其它抗菌肽 | 第27页 |
1.3 病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PR蛋白) | 第27-32页 |
1.3.1 几丁质酶与葡聚糖酶 | 第28-30页 |
1.3.2 PR-1蛋白 | 第30-31页 |
1.3.3 PR-5蛋白 | 第31页 |
1.3.4 PR-9蛋白 | 第31-32页 |
1.4 R基因介导产生的抗性 | 第32-38页 |
1.4.1 R基因产物的结构 | 第34-37页 |
1.4.2 R基因的利用 | 第37-38页 |
1.5 活性氧类(active oxygen species,AOS) | 第38-42页 |
1.6 其它抗菌技术路线 | 第42-46页 |
1.6.1 植保素(phytoalexin) | 第42-44页 |
1.6.2 人为诱导的HR | 第44-45页 |
1.6.2.1 Harpins蛋白 | 第44页 |
1.6.2.2 Barnase和barstar基因 | 第44-45页 |
1.6.2.3 细菌视蛋白基因(Bacterio-opsin gene,bO基因) | 第45页 |
1.6.3 人为诱导的SAR | 第45页 |
1.6.4 抗体的应用 | 第45-46页 |
1.7 本论文的目的意义 | 第46-48页 |
2. Germin基因的克隆及其在烟草中的表达 | 第48-59页 |
2.1 材料方法 | 第48-52页 |
2.1.1 材料 | 第48-49页 |
2.1.2 方法 | 第49-52页 |
2.2 结果与分析 | 第52-58页 |
2.2.1 Germin基因的克隆 | 第52-55页 |
2.2.2 Germin基因植物表达载体的构建 | 第55-57页 |
2.2.3 烟草的遗传转化及转基因烟草的Southern分析 | 第57页 |
2.2.4 转基因植株中草酸氧化酶活性的定性检测 | 第57-58页 |
2.3 小结 | 第58-59页 |
3. 人溶菌酶基因的修饰、合成及其在酵母和烟草中的表达 | 第59-79页 |
3.2 材料方法 | 第59-66页 |
3.2.1 材料 | 第59-60页 |
3.2.2 方法 | 第60-66页 |
3.3 结果与分析 | 第66-77页 |
3.3.1 HL基因的设计 | 第66-68页 |
3.3.2 HL基因寡核苷酸片段的连接和测序 | 第68-70页 |
3.3.3 HL基因在酵母中的表达 | 第70-73页 |
3.3.3.1 酵母表达载体pYHL的构建 | 第70-73页 |
3.3.3.2 HL基因在酵母中的表达 | 第73页 |
3.3.4 HL基因在烟草中的表达 | 第73-77页 |
3.3.4.1 HL基因与信号肽的连接 | 第74页 |
3.3.4.2 植物表达载体pBTH的构建 | 第74-76页 |
3.3.4.3 pBTH转化烟草及Southern检测 | 第76页 |
3.3.4.4 pBTH转基因烟草的Western分析 | 第76-77页 |
3.4 小结 | 第77-79页 |
4. Germin基因与HL基因双价植物表达载体的构建及对烟草和油菜的转化 | 第79-85页 |
4.1 材料与方法 | 第79-81页 |
4.1.1 材料 | 第79页 |
4.1.2 方法 | 第79-81页 |
4.2 结果与分析 | 第81-83页 |
4.2.1 双价植物表达载体pBHG的构建 | 第81-82页 |
4.2.2 烟草的遗传转化 | 第82页 |
4.2.3 双价转基因烟草中HL基因表达产物的Western分析 | 第82-83页 |
4.2.4 双价转基因烟草中的草酸氧化酶活性检测 | 第83页 |
4.2.5 双价转基因油菜的斑点杂交检测 | 第83页 |
4.3 小结 | 第83-85页 |
结论 | 第85-86页 |
讨论 | 第86-89页 |
本工作的意义及创新点 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-107页 |
致谢 | 第107页 |