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Germin基因的克隆和人溶菌酶基因的合成及其在烟草和油菜中的表达

中文摘要第1-8页
英文摘要第8-10页
1. 综述第10-48页
 1.1 解毒酶及其应用第10-18页
  1.1.1 HC-毒素(HC-toxin)与HC-毒素还原酶(HC-toxin reductase)第11页
  1.1.2 烟草野火毒素(tabtoxin)与ttr基因第11-12页
  1.1.3 菜豆菌毒素与argK基因第12-13页
  1.1.4 草酸毒素与草酸氧化酶/germin第13-18页
   1.1.4.1 草酸毒素第13-15页
   1.1.4.2 草酸氧化酶/germin第15-18页
 1.2 抗菌肽与抗菌蛋白第18-27页
  1.2.1 昆虫抗菌肽第19-20页
  1.2.2 防御素(defensin)第20-22页
  1.2.3 硫堇(thionin)第22-23页
  1.2.4 核糖体失活蛋白(ribosome-inactivating proteins,RIPs)第23-25页
  1.2.5 溶菌酶(lysozyme)第25-27页
  1.2.6 其它抗菌肽第27页
 1.3 病程相关蛋白(pathogenesis-related proteins,PR蛋白)第27-32页
  1.3.1 几丁质酶与葡聚糖酶第28-30页
  1.3.2 PR-1蛋白第30-31页
  1.3.3 PR-5蛋白第31页
  1.3.4 PR-9蛋白第31-32页
 1.4 R基因介导产生的抗性第32-38页
  1.4.1 R基因产物的结构第34-37页
  1.4.2 R基因的利用第37-38页
 1.5 活性氧类(active oxygen species,AOS)第38-42页
 1.6 其它抗菌技术路线第42-46页
  1.6.1 植保素(phytoalexin)第42-44页
  1.6.2 人为诱导的HR第44-45页
   1.6.2.1 Harpins蛋白第44页
   1.6.2.2 Barnase和barstar基因第44-45页
   1.6.2.3 细菌视蛋白基因(Bacterio-opsin gene,bO基因)第45页
  1.6.3 人为诱导的SAR第45页
  1.6.4 抗体的应用第45-46页
 1.7 本论文的目的意义第46-48页
2. Germin基因的克隆及其在烟草中的表达第48-59页
 2.1 材料方法第48-52页
  2.1.1 材料第48-49页
  2.1.2 方法第49-52页
 2.2 结果与分析第52-58页
  2.2.1 Germin基因的克隆第52-55页
  2.2.2 Germin基因植物表达载体的构建第55-57页
  2.2.3 烟草的遗传转化及转基因烟草的Southern分析第57页
  2.2.4 转基因植株中草酸氧化酶活性的定性检测第57-58页
 2.3 小结第58-59页
3. 人溶菌酶基因的修饰、合成及其在酵母和烟草中的表达第59-79页
 3.2 材料方法第59-66页
  3.2.1 材料第59-60页
  3.2.2 方法第60-66页
 3.3 结果与分析第66-77页
  3.3.1 HL基因的设计第66-68页
  3.3.2 HL基因寡核苷酸片段的连接和测序第68-70页
  3.3.3 HL基因在酵母中的表达第70-73页
   3.3.3.1 酵母表达载体pYHL的构建第70-73页
   3.3.3.2 HL基因在酵母中的表达第73页
  3.3.4 HL基因在烟草中的表达第73-77页
   3.3.4.1 HL基因与信号肽的连接第74页
   3.3.4.2 植物表达载体pBTH的构建第74-76页
   3.3.4.3 pBTH转化烟草及Southern检测第76页
   3.3.4.4 pBTH转基因烟草的Western分析第76-77页
 3.4 小结第77-79页
4. Germin基因与HL基因双价植物表达载体的构建及对烟草和油菜的转化第79-85页
 4.1 材料与方法第79-81页
  4.1.1 材料第79页
  4.1.2 方法第79-81页
 4.2 结果与分析第81-83页
  4.2.1 双价植物表达载体pBHG的构建第81-82页
  4.2.2 烟草的遗传转化第82页
  4.2.3 双价转基因烟草中HL基因表达产物的Western分析第82-83页
  4.2.4 双价转基因烟草中的草酸氧化酶活性检测第83页
  4.2.5 双价转基因油菜的斑点杂交检测第83页
 4.3 小结第83-85页
结论第85-86页
讨论第86-89页
本工作的意义及创新点第89-90页
参考文献第90-107页
致谢第107页

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