摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
第一章 综述 | 第14-27页 |
1 贝类常见原虫病的概述 | 第14-21页 |
·派琴虫 | 第14-17页 |
·派琴虫的种类及分布 | 第14页 |
·派琴虫的分类学地位 | 第14-15页 |
·派琴虫的生活史和传播途径 | 第15页 |
·派琴虫的流行病学 | 第15-16页 |
·派琴虫的危害 | 第16页 |
·派琴虫的防治 | 第16-17页 |
·包拉米虫 | 第17-18页 |
·包拉米虫的种类及分布 | 第17页 |
·包拉米虫的分类学地位及传播方式 | 第17页 |
·包拉米虫的流行病学 | 第17-18页 |
·包拉米虫的危害 | 第18页 |
·包拉米虫的防治 | 第18页 |
·单孢子虫 | 第18-19页 |
·单孢子虫的分类学地位 | 第18-19页 |
·单孢子虫的流行病学 | 第19页 |
·单孢子虫的危害及防治 | 第19页 |
·马尔太虫 | 第19-20页 |
·马尔太虫的种类及分类地位 | 第19-20页 |
·马尔太虫的形态及生活史 | 第20页 |
·马尔太虫的流行病学及危害 | 第20页 |
·马氏闭合孢子虫 | 第20-21页 |
2 常见贝类原虫检测方法的研究进展 | 第21-25页 |
·形态学检测方法 | 第21-22页 |
·组织印记法 | 第21页 |
·组织病理切片技术 | 第21页 |
·电镜技术 | 第21-22页 |
·免疫学检测方法 | 第22页 |
·分子生物学检测方法 | 第22-24页 |
·PCR 检测方法 | 第22-23页 |
·原位杂交检测技术 | 第23页 |
·实时荧光定量 PCR 技术 | 第23-24页 |
·派琴虫体外培养方法的研究 | 第24-25页 |
·液体巯基乙酸盐培养法(RFTM) | 第24页 |
·派琴虫其它体外培养方法 | 第24-25页 |
3 派琴虫种类变异研究进展 | 第25-27页 |
第二章 牡蛎派琴虫的培养和形态学观察 | 第27-34页 |
1 材料与方法 | 第27-29页 |
·材料 | 第27-28页 |
·材料来源 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要设备与耗材 | 第27页 |
·试剂的配制 | 第27-28页 |
·试验方法 | 第28-29页 |
·牡蛎样品石蜡切片的制备 | 第28页 |
·派琴虫休眠孢子的培养 | 第28-29页 |
·派琴虫休眠孢子染色镜检 | 第29页 |
·派琴虫休眠孢子分裂方式的观察 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-32页 |
·派琴虫滋养体的观察 | 第29页 |
·派琴虫休眠孢子的培养结果 | 第29-32页 |
·派琴虫休眠孢子分裂方式的观察结果 | 第32页 |
3 讨论 | 第32-34页 |
第三章 PCR 检测贝类常见原虫方法的建立与我国东南沿海贝类常见原虫的调查 | 第34-46页 |
1 材料与方法 | 第34-38页 |
·材料 | 第34-35页 |
·材料来源 | 第34页 |
·主要试剂 | 第34-35页 |
·试剂配制 | 第35页 |
·主要设备 | 第35页 |
·试验方法 | 第35-38页 |
·样品总 DNA 提取 | 第35页 |
·六种贝类常见原虫病 PCR 检测方法的建立 | 第35-37页 |
·派琴虫和包拉米虫种类鉴定方法的建立 | 第37-38页 |
·我国东南沿海几种常见贝类原虫的抽样调查与种类鉴定 | 第38页 |
2 结果 | 第38-44页 |
·六种贝类原虫 PCR 检测结果 | 第38-39页 |
·PCR 扩增阳性产物测序结果 | 第39-41页 |
·我国东南沿海六种常见贝类原虫的抽样调查结果 | 第41-42页 |
·派琴虫和包拉米虫种类鉴定结果 | 第42-44页 |
·派琴虫种类鉴定结果 | 第42-43页 |
·包拉米虫种类鉴定结果 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
第四章 奥尔森派琴虫和北海派琴虫 ITS 基因序列分析及同源性分析 | 第46-56页 |
1 材料与方法 | 第46-48页 |
·材料 | 第46-47页 |
·材料来源 | 第46页 |
·主要试剂与耗材 | 第46页 |
·试剂配制 | 第46-47页 |
·主要设备 | 第47页 |
·试验方法 | 第47-48页 |
·样品总 DNA 提取 | 第47页 |
·ITS 序列 PCR 扩增引物的设计与合成 | 第47页 |
·PCR 扩增体系及反应条件的优化 | 第47页 |
·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第47-48页 |
·目的片段的回收、克隆和质粒提取 | 第48页 |
·奥尔森派琴虫和北海派琴虫 ITS 序列及同源性分析 | 第48页 |
2 结果 | 第48-50页 |
·ITS 序列 PCR 反应条件优化及扩增结果 | 第48-49页 |
·重组质粒测序结果 | 第49页 |
·奥尔森派琴虫 ITS 序列分析与同源性分析 | 第49页 |
·北海派琴虫 ITS 序列分析与同源性分析 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-56页 |
第五章 多重 PCR 同时检测包拉米虫、奥尔森派琴虫和尼氏单孢子虫方法的建立和应用 | 第56-63页 |
1 材料和方法 | 第56-58页 |
·实验材料 | 第56页 |
·实验材料来源 | 第56页 |
·试剂 | 第56页 |
·实验设备 | 第56页 |
·方法 | 第56-58页 |
·样品总 DNA 的提取 | 第56页 |
·多重 PCR 引物的设计与合成 | 第56-57页 |
·PCR 扩增体系及反应条件的优化 | 第57-58页 |
·PCR 扩增产物电泳分析及克隆测序 | 第58页 |
·特异性试验 | 第58页 |
·敏感性试验 | 第58页 |
·临床样本的检测 | 第58页 |
2 结果 | 第58-62页 |
·多重 PCR 反应条件优化结果 | 第58-59页 |
·特异性试验结果 | 第59-60页 |
·敏感性实验结果 | 第60页 |
·测序结果与序列比对 | 第60-61页 |
·临床样品的检测结果 | 第61-62页 |
3 讨论 | 第62-63页 |
全文总结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录 | 第71-75页 |
致谢 | 第75页 |