| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·实时荧光PCR的原理 | 第13页 |
| ·实时荧光PCR中几个重要参数 | 第13-14页 |
| ·荧光化学 | 第14-17页 |
| ·SYBR荧光染料 | 第14页 |
| ·TAQMAN探针 | 第14-16页 |
| ·分子信标 | 第16页 |
| ·荧光标记引物 | 第16页 |
| ·杂交探针 | 第16-17页 |
| ·复合探针 | 第17页 |
| ·实时荧光定量PCR的应用 | 第17-19页 |
| ·核酸浓度的定量 | 第17-18页 |
| ·基因表达研究 | 第18页 |
| ·单核苷酸多态性(SNP)及突变分析 | 第18页 |
| ·医学病原体的检测 | 第18-19页 |
| ·药物疗效考核 | 第19页 |
| ·肿瘤基因检测 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR的展望 | 第19-20页 |
| ·荧光PCR技术在水产病原微生物检测的应用现状 | 第20-23页 |
| ·水产动物病原微生物的检测 | 第20-21页 |
| ·总结与展望 | 第21-23页 |
| 第二章 TAQMAN实时荧光PCR快速检测斑点叉尾鲴病毒 | 第23-31页 |
| ·材料与方法 | 第23-26页 |
| ·毒株及细胞 | 第23-24页 |
| ·设备与试剂 | 第24页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第24-25页 |
| ·定量标准品的制备 | 第25页 |
| ·病毒DNA的抽提 | 第25页 |
| ·CCV荧光定量PCR的建立和条件优化 | 第25页 |
| ·CCV荧光定量PCR的特异性、敏感性和重复性试验 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-29页 |
| ·CCV荧光定量PCR反应优化条件 | 第26页 |
| ·CCV荧光定量PCR的特异性 | 第26-27页 |
| ·CCV荧光定量PCR的灵敏度 | 第27-28页 |
| ·绝对定量标准曲线的建立 | 第28页 |
| ·CCV荧光定量PCR的重复性和稳定性 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 虹彩病毒蛙病毒属病毒实时荧光PCR检测方法的建立 | 第31-39页 |
| ·材料与方法 | 第31-33页 |
| ·毒株及细胞 | 第31-32页 |
| ·设备和试剂 | 第32页 |
| ·引物和探针的设计与合成 | 第32页 |
| ·病毒DNA的抽提 | 第32页 |
| ·荧光定量PCR的建立和条件优化 | 第32-33页 |
| ·荧光定量PCR的特异性、敏感性和重复性实验 | 第33页 |
| ·标准曲线制作 | 第33页 |
| ·结果和分析 | 第33-37页 |
| ·荧光定量PCR反应条件的优化 | 第33-34页 |
| ·荧光定量PCR的特异性 | 第34-35页 |
| ·荧光定量PCR与普通PCR的灵敏度比较 | 第35-36页 |
| ·荧光定量PCR重复性实验 | 第36-37页 |
| ·标准曲线的建立 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 鱼类神经坏死病实时荧光RT-PCR检测方法的建立和应用 | 第39-46页 |
| ·材料与方法 | 第40-42页 |
| ·病毒和细胞 | 第40页 |
| ·引物、探针的设计与合成 | 第40页 |
| ·仪器、试剂盒及其它试剂 | 第40页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第40-41页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第41页 |
| ·常规RT-PCR | 第41页 |
| ·荧光RT-PCR检测方法的建立和条件优化 | 第41页 |
| ·荧光RT-PCR的特异性试验 | 第41页 |
| ·荧光RT-PCR与普通RT-PCR灵敏度比较 | 第41页 |
| ·荧光RT-PCR的重复性试验 | 第41-42页 |
| ·荧光RT-PCR的临床检测 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-44页 |
| ·荧光RT-PCR反应条件的优化 | 第42页 |
| ·荧光RT-PCR方法的特异性 | 第42-43页 |
| ·荧光RT-PCR与普通RT-PCR灵敏度比较 | 第43-44页 |
| ·荧光RT-PCR稳定性和重复性实验 | 第44页 |
| ·荧光RT-PCR方法的临床检测 | 第44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
