| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略语 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-22页 |
| 1.文昌鱼—发育生物学和进化生物学的模式生物 | 第8-10页 |
| 2.文昌鱼发育及分子生物学研究 | 第10-15页 |
| ·文昌鱼功能基因的分类 | 第11-12页 |
| ·文昌鱼部分发育相关基因的研究概况 | 第12-15页 |
| 3.S—腺苷高半胱氨酸水解酶研究进展 | 第15-20页 |
| ·SAHH的发现 | 第16页 |
| ·SAHH的生理功能 | 第16-17页 |
| ·SAHH的基本结构 | 第17-18页 |
| ·SAHH的晶体结构 | 第18页 |
| ·基于SAHH晶体结构提出的催化机制 | 第18-19页 |
| ·SAHH抑制剂的作用机制 | 第19-20页 |
| 4.本论文的主要内容及技术路线 | 第20-22页 |
| 第二章 青岛文昌鱼SAHH基因的特征、基因组结构及进化分析 | 第22-36页 |
| 1.前言 | 第22页 |
| 2.材料和方法 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·青岛文昌鱼cDNA文库的构建与测序 | 第23页 |
| ·序列比较与系统进化分析 | 第23页 |
| ·文昌鱼SAHH基因组DNA的PCR扩增和序列分析 | 第23-27页 |
| ·AmphiSAHH的空间结构分析 | 第27页 |
| 3.结果 | 第27-34页 |
| ·文昌鱼SAHH cDNA的确定和序列分析 | 第27-31页 |
| ·青岛文昌鱼SAHH蛋白的进化分析 | 第31页 |
| ·文昌鱼SAHH基因在基因组DNA中的存在情况及分析 | 第31-33页 |
| ·AmphiSAHH空间结构 | 第33-34页 |
| 4.讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 青岛文昌鱼SAHH基因的表达及实时定量检测 | 第36-53页 |
| 1.前言 | 第36页 |
| 2.材料和方法 | 第36-46页 |
| ·材料 | 第36-38页 |
| ·实验方法 | 第38-46页 |
| ·Northern blot | 第38-43页 |
| ·文昌鱼胚胎SAHH基因的整体原位杂交 | 第43-44页 |
| ·实时定量技术 | 第44-46页 |
| 3.结果 | 第46-51页 |
| ·文昌鱼SAHH基因Northern杂交 | 第46-49页 |
| ·整体原位杂交技术检测SAHH基因在文昌鱼不同发育时期的时空表达 | 第49页 |
| ·实时定量检测结果 | 第49-51页 |
| 4.讨论 | 第51-53页 |
| 第四章 青岛文昌鱼SAHH蛋白的融合表达、纯化、鉴定及特性分析 | 第53-70页 |
| 1.前言 | 第53页 |
| 2.材料和方法 | 第53-61页 |
| ·材料 | 第53-55页 |
| ·实验方法 | 第55-61页 |
| ·表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·含pET-28-SAHH的表达载体的大肠杆菌BL21(DE3)中的诱导表达 | 第57-59页 |
| ·重组His-SAHH融合蛋白的纯化 | 第59页 |
| ·重组His-SAHH融合蛋白的酶活及NAD~+/NADH结合系统测定 | 第59-60页 |
| ·重组His-SAHH融合蛋白的Western blot检测 | 第60页 |
| ·文昌鱼SAHH蛋白的免疫组织化学检测 | 第60-61页 |
| 3.结果 | 第61-69页 |
| ·pET-28-SAHH表达载体的构建 | 第61-63页 |
| ·重组质粒pET-28-SAHH在大肠杆菌中的表达 | 第63-64页 |
| ·重组His-SAHH融合蛋白的纯化 | 第64-65页 |
| ·重组His-SAHH融合蛋白的酶活及NAD~+/NADH结合系统 | 第65-67页 |
| ·SAHH蛋白的Western blot检测 | 第67-68页 |
| ·文昌鱼SAHH蛋白的免疫组织化学分析 | 第68-69页 |
| 4.讨论 | 第69-70页 |
| 总结与展望 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-83页 |
