| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-11页 |
| 文献综述 | 第11-34页 |
| 1 猪传染性胸膜肺炎的流行及其危害 | 第11-13页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎流行现状 | 第11-12页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎危害 | 第12-13页 |
| 2 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌病原学 | 第13-18页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌分类、理化性质及生长特性 | 第13页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌抗原与血清型 | 第13-14页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌主要毒力因子致病性及免疫原性研究进展 | 第14-17页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌致病机理 | 第17-18页 |
| 3 猪传染性胸膜肺炎防制 | 第18-19页 |
| 4 胸膜肺炎放线杆菌毒素研究进展 | 第19-24页 |
| ·毒素的名称和种类 | 第19页 |
| ·毒素分泌、基因结构、表达与调控及其作用 | 第19-24页 |
| 5 猪传染性胸膜肺炎疫苗研究进展 | 第24-30页 |
| ·商品化疫苗 | 第25-26页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎新型疫苗的研究现状 | 第26-30页 |
| 6 APP突变株构建方法的研究进展 | 第30-34页 |
| ·自然突变 | 第30页 |
| ·人工化学诱变 | 第30-31页 |
| ·分子生物学方法 | 第31-34页 |
| 研究的目的与意义 | 第34-36页 |
| 材料与方法 | 第36-48页 |
| 1 材料 | 第36-38页 |
| ·细菌菌株与细胞 | 第36页 |
| ·质粒与载体 | 第36页 |
| ·主要药品及试剂 | 第36页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-38页 |
| 2 方法 | 第38-48页 |
| ·PCR模板制备 | 第38-39页 |
| ·左同源臂、卡那霉素抗性基因和右同源臂的扩增 | 第39-40页 |
| ·左同源臂、卡那霉素抗性基因和右同源臂的TA克隆 | 第40-41页 |
| ·重组转移载体的构建 | 第41-43页 |
| ·重组转移载体的电转化 | 第43-44页 |
| ·基因缺失减毒株的筛选鉴定 | 第44-46页 |
| ·基因缺失减毒株的生物学特性研究 | 第46页 |
| ·基因缺失减毒株的免疫保护效力研究 | 第46-48页 |
| 结果 | 第48-63页 |
| 1 左同源臂、卡那霉素抗性基因和右同源臂的PCR扩增 | 第48-50页 |
| ·左同源臂的PCR扩增 | 第48页 |
| ·卡那霉素抗性基因的PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·右同源臂的PCR扩增 | 第49-50页 |
| 2 重组转移载体的构建 | 第50-54页 |
| ·左同源臂、卡那霉素抗性基因和右同源臂的TA克隆 | 第50-52页 |
| ·重组转移载体的拼接 | 第52-54页 |
| 3 突变株的筛选鉴定 | 第54-58页 |
| ·卡那霉素抗性试验 | 第54页 |
| ·NAD依赖性试验 | 第54页 |
| ·溶血活性鉴定 | 第54页 |
| ·PCR鉴定 | 第54-56页 |
| ·突变株的细胞毒性鉴定 | 第56-57页 |
| ·突变株对小白鼠的致死性试验 | 第57-58页 |
| 4 突变株的生物学特性 | 第58-61页 |
| ·突变株的生长特性试验 | 第58页 |
| ·突变株的遗传稳定性试验 | 第58-61页 |
| 5 突变株的免疫保护效力研究 | 第61-63页 |
| ·攻毒菌株的致死剂量测定 | 第61-62页 |
| ·突变株的免疫保护率测定 | 第62-63页 |
| 讨论 | 第63-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 附录Ⅰ | 第78-89页 |
| 附录Ⅱ | 第89-90页 |