| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-21页 |
| 1、鱼类生长激素的分子生物学研究进展 | 第8-10页 |
| ·鱼类生长激素基本结构的研究进展 | 第9页 |
| ·鱼类生长激素基因的分离、克隆、与序列分析 | 第9-10页 |
| ·鱼类GH基因的调控机制 | 第10页 |
| 2、鱼类生长激素的生理功能的研究进展 | 第10-13页 |
| ·促生长作用 | 第11-12页 |
| ·渗透调节作用 | 第12页 |
| ·参与应激反应 | 第12页 |
| ·与其它激素的相互作用 | 第12-13页 |
| ·其它作用 | 第13页 |
| 3、外源生长激素引入鱼体的途径和方法研究进展 | 第13-16页 |
| ·GH引入鱼体的途径和方法 | 第13-14页 |
| ·消化道对GH的吸收 | 第14-16页 |
| ·硬骨鱼类小肠吸收GH的能力 | 第14页 |
| ·外源GH到达肠内吸收位点并进入血液的主要障碍 | 第14-15页 |
| ·GH保护剂的研制 | 第15-16页 |
| ·前景 | 第16页 |
| 4、鱼类生长激素在水产养殖中的应用 | 第16-21页 |
| ·优化养殖的环境因子与营养条件,有利于鱼类GH的正常分泌 | 第17页 |
| ·转基因鱼的研究进展 | 第17-19页 |
| ·生长激素基因工程研究进展 | 第19-21页 |
| 第二章 齐口裂腹鱼生长激素基因的克隆 | 第21-31页 |
| 1 材料 | 第21-23页 |
| ·实验动物 | 第21-22页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·溶液配制 | 第22-23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23页 |
| 2 方法 | 第23-27页 |
| ·齐口裂腹鱼脑垂体的分离和总RNA的提取 | 第23页 |
| ·齐口裂腹鱼生长激素基因的克隆 | 第23-27页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第24页 |
| ·RT-PCR产物的回收 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌DH_(5α)感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体连接与转化 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第26页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的序列测定 | 第27页 |
| ·齐口裂腹鱼生长激素基因生物信息学分析 | 第27页 |
| ·齐口裂腹鱼生长激素基因的系统进化树分析 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-29页 |
| ·齐口裂腹鱼生长激素基因的克隆 | 第27页 |
| ·重组质粒PCR鉴定 | 第27-28页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第28页 |
| ·序列测定 | 第28页 |
| ·齐口裂腹鱼生长激素基因生物信息学分析 | 第28-29页 |
| ·生长激素基因的系统进化树分析 | 第29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 齐口裂腹鱼生长激素基因成熟蛋白的原核表达 | 第31-45页 |
| 1 材料 | 第31-33页 |
| ·菌株和质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·溶液配制 | 第31-33页 |
| 2 方法 | 第33-37页 |
| ·齐口裂腹鱼GH成熟蛋白基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·成熟蛋白基因重组表达质粒的构建 | 第34页 |
| ·成熟蛋白基因重组表达质粒的诱导表达 | 第34-35页 |
| ·SDS-PAGE | 第34页 |
| ·IPTG诱导浓度的优化 | 第34-35页 |
| ·诱导时间的优化 | 第35页 |
| ·重组成熟蛋白诱导表达 | 第35页 |
| ·重组成熟蛋白的可溶性检测 | 第35页 |
| ·重组成熟蛋白的纯化回收 | 第35-36页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第36页 |
| ·GH重组成熟蛋白的Western-blot鉴定 | 第36-37页 |
| ·蛋白质样品制备 | 第36页 |
| ·湿法转移电泳 | 第36页 |
| ·免疫学反应 | 第36-37页 |
| ·NC膜的显色 | 第37页 |
| ·NC膜照相保存 | 第37页 |
| ·饲喂实验 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-42页 |
| ·齐口裂腹鱼GH成熟蛋白基因的克隆 | 第37-38页 |
| ·酶切鉴定 | 第38页 |
| ·诱导表达和可溶性检测 | 第38-39页 |
| ·原核表达条件的优化 | 第39-40页 |
| ·IPTG浓度对齐口裂腹鱼GH重组成熟蛋白诱导表达的影响 | 第39页 |
| ·诱导表达时间对齐口裂腹鱼GH重组成熟蛋白表达的影响 | 第39-40页 |
| ·Western-blot鉴定 | 第40-41页 |
| ·齐口裂腹鱼GH重组成熟蛋白的纯化回收 | 第41页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第41页 |
| ·饲喂实验 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| ·齐口裂腹鱼GH重组成熟蛋白表达载体的选择 | 第42-43页 |
| ·齐口裂腹鱼GH重组成熟蛋白表达条件的优化 | 第43页 |
| ·齐口裂腹鱼GH重组成熟蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| ·生长激素的饲喂 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 附录 | 第52页 |
