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低于抑制浓度的抗生素对铜绿假单胞菌基因表达的调节

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
图目录第10-11页
表目录第11-12页
缩写对比表第12-13页
第一部分 前言第13-27页
   ·铜绿假单胞菌概述第13-21页
     ·铜绿假单胞菌的基本特征第13-14页
     ·铜绿假单胞菌的致病机理第14-17页
     ·铜绿假单胞菌中的“细胞感应数”(Quorum-sensing)系统第17-19页
     ·细胞信号系统对铜绿假单胞菌毒力因子的调控第19-21页
   ·抗生素的分类及特性第21-25页
     ·抗生素及其分类第21-22页
     ·抗生素对基因表达的调节作用第22-25页
   ·研究内容第25-27页
第二部分 实验材料和方法第27-50页
   ·实验材料第27-30页
     ·菌株和质粒第27-28页
     ·培养基第28-29页
     ·试剂第29-30页
     ·仪器第30页
   ·基本实验方法第30-35页
     ·质粒的小量提取第30-31页
     ·细菌基因组DNA的提取第31-32页
     ·大肠杆菌10B感受态细胞的制备第32页
     ·铜绿假单胞菌感受态细胞的快速制备第32-33页
     ·电转化第33页
     ·双亲株杂交试验第33页
     ·三亲株杂交试验第33-34页
     ·质粒或 DNA片断的酶切和连接第34-35页
   ·低于抑制浓度的抗生素对铜绿假单胞菌中13个分泌型毒性因子的调节第35-41页
     ·基因克隆技术构建载体第35-37页
     ·测定抗生素的最小抑制浓度第37-38页
     ·低于抑制浓度的抗生素在转录水平对毒性因子基因表达的调节第38-39页
     ·鼠李糖脂的测定第39-40页
     ·绿脓菌素的测定第40页
     ·rhlAB基因表达产物相关的细胞丛动(swarming)现象的研究第40页
     ·低于抑制浓度的抗生素对 QS系统相关基因表达的影响第40-41页
   ·低于抑制浓度的抗生素对铜绿假单胞菌启动子的调节第41-45页
     ·铜绿假单胞菌随机启动子库的构建第41页
     ·低于抑制浓度的抗生素对启动子库的影响第41-42页
     ·启动子域的PCR扩增和序列分析第42-43页
     ·受低于抑制浓度抗生素调节的基因启动子的固体平板检测第43页
     ·小型化合物库的检测和启动子—报道子的整合第43-45页
   ·PA5283基因功能研究第45-50页
     ·基因敲除实验第45-49页
     ·突变体中基因表达变化的测定第49-50页
第三部分 结果第50-74页
   ·低于抑制浓度的抗生素对铜绿假单胞菌中13个分泌型毒性因子表达的调节第50-57页
     ·研究体系的构建第50页
     ·抗生素最小抑制浓度的测定第50-51页
     ·低于抑制浓度的抗生素对铜绿假单胞菌中13个毒性因子基因表达的调节第51-53页
     ·低于抑制浓度的抗生素对rhlAB和phzA1产物的调控第53-55页
     ·细胞泳动与丛动受低于抑制浓度万古霉素的调节第55-56页
     ·低于抑制浓度的抗生素对 QS系统相关基因表达的调节第56-57页
   ·低于抑制浓度的抗生素对铜绿假单胞菌启动子表达的调节第57-69页
     ·低于抑制浓度的抗生素对启动子表达的调节第57-61页
     ·启动子域的PCR扩增及序列分析第61-65页
     ·受低于抑制浓度抗生素调节的基因启动子的固体平板检测第65-67页
     ·32种化学样品的平板检测第67-68页
     ·受调节基因启动子—报道子的整合第68-69页
   ·PA5283基因功能研究第69-74页
     ·基因敲除实验结果第70-71页
     ·突变体中基因表达的变化情况第71-74页
第四部分 讨论第74-78页
参考文献第78-83页
附录第83-89页
致谢第89页

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