摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 杆状病毒的分子生物学及其应用的研究进展 | 第13-24页 |
·杆状病毒的分类 | 第13页 |
·杆状病毒的基因组结构及复制与表达 | 第13-17页 |
·杆状病毒的基因组 | 第13-14页 |
·杆状病毒的变异 | 第14-15页 |
·杆状病毒的感染循环和基因表达 | 第15-16页 |
·杆状病毒的主要基因及其功能 | 第16-17页 |
·杆状病毒在生物科学研究中的应用 | 第17-24页 |
·杆状病毒表达系统的发展 | 第17页 |
·杆状病毒在昆虫细胞中表达异源蛋白 | 第17-19页 |
·杆状病毒展示技术 | 第19-20页 |
·杆状病毒介导基因在哺乳细胞中表达 | 第20-22页 |
·杆状病毒载体在疫苗开发中的应用 | 第22-24页 |
第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒及其疫苗的研究进展 | 第24-31页 |
·病毒分类及理化特性 | 第24-25页 |
·病毒的培养 | 第25页 |
·病毒的基因组结构及编码蛋白 | 第25-26页 |
·病毒的致病机理 | 第26页 |
·病毒的变异 | 第26-27页 |
·病毒在猪体内的持续性感染 | 第27页 |
·PRRSV 疫苗的研究进展 | 第27-31页 |
·灭活疫苗 | 第27-28页 |
·弱毒活疫苗 | 第28-29页 |
·新型疫苗的开发 | 第29-31页 |
第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒重组杆状病毒的构建 | 第31-47页 |
·材料与方法 | 第32-41页 |
·材料 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32页 |
·引物 | 第32-33页 |
·重组供体质粒的构建 | 第33-35页 |
·重组BACMID 的筛选 | 第35-36页 |
·重组杆状病毒的获得与鉴定 | 第36-37页 |
·重组杆状病毒在SF9 细胞上的稳定性 | 第37-38页 |
·ACAPRRS 与ACLACZ 在 SF9 细胞上的生长曲线 | 第38-39页 |
·IFA | 第39页 |
·NORTHERN BLOT | 第39-41页 |
·结果 | 第41-45页 |
·供体质粒PBACAPS | 第41页 |
·重组杆状病毒ACAPRRS | 第41-42页 |
·ACAPRRS 的稳定性 | 第42-43页 |
·ACAPRRS 的生长曲线 | 第43-44页 |
·PRRSV 基因在 SF9 细胞中的表达 | 第44-45页 |
·SF9 细胞中 PRRSV 亚基因组的转录 | 第45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第四章 重组杆状 ACAPRRS 产生子代PRRSV 的特性研究 | 第47-60页 |
·材料与方法 | 第48-54页 |
·材料 | 第48页 |
·主要仪器 | 第48页 |
·引物 | 第48-49页 |
·IFA | 第49页 |
·ACAPRRS 转导 MARC-145 细胞后子代 PRRSV 病毒的产生 | 第49-50页 |
·5’-RACE 和3’-RACE | 第50-53页 |
·SF9 细胞上清转导MARC-145 细胞 | 第53-54页 |
·空斑试验 | 第54页 |
·一步生长曲线 | 第54页 |
·结果 | 第54-58页 |
·ACAPRRS 转导MARC-145 细胞后N 蛋白的表达 | 第54-55页 |
·子代 PRRSV 的检测 | 第55-56页 |
·VASM 的末端序列 | 第56页 |
·SF9 细胞上清对 MARC-145 细胞转导的变化 | 第56-57页 |
·VASM 病毒的生长特性分析 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第五章 重组杆状病毒 ACAPRRS 转导 PRRSV 非敏感细胞系的研究 | 第60-67页 |
·材料与方法 | 第61-62页 |
·材料 | 第61页 |
·主要仪器 | 第61页 |
·ACAPRRS 转导BHK-21 细胞后PRRSV N 蛋白的表达 | 第61页 |
·ACAPRRS 转导BHK-21 细胞产生感染性PRRSV 的检测 | 第61页 |
·ACAPRRS 转导VERO 细胞后 PRRSV N 蛋白的表达 | 第61-62页 |
·ACAPRRS 转导VERO 细胞产生感染性PRRSV 的检测 | 第62页 |
·ACAPRRS 转导BHK-21 细胞和 VERO 细胞后产生PRRSV 的动力曲线 | 第62页 |
·结果 | 第62-65页 |
·PRRSV N 蛋白在 BHK-21 细胞中的表达 | 第62-63页 |
·BHK-21 细胞中感染性PRRSV 颗粒的产生 | 第63页 |
·ACAPRRS 转导VERO 细胞后PRRSV N 蛋白的表达 | 第63-64页 |
·VERO 细胞中感染性 PRRSV 颗粒的产生 | 第64页 |
·BHK-21 细胞和 VERO 细胞上 PRRSV 的生产曲线 | 第64-65页 |
·讨论 | 第65-67页 |
第六章 全文结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
作者简历 | 第81-82页 |
附录Ⅰ 重组杆状 AcAPRRS 中 PRRSV 克隆序列 5’与杆状病毒载体序列嵌合处序列 | 第82-83页 |
附录Ⅱ重组杆状 AcAPRRS 中 PRRSV 克隆序列 3’与杆状病毒载体序列嵌合处序列 | 第83-84页 |
附录Ⅲ vASM F1 5’末端序列 | 第84-85页 |
附录Ⅳ vASM F1 3’末端序列 | 第85-86页 |
附录Ⅴ vASM F2 5’末端序列 | 第86-87页 |
附录Ⅵ vASM F2 3’末端序列 | 第87-88页 |
附录Ⅶ 文中免疫荧光照片 | 第88-90页 |