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利用杆状病毒表达感染性猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 杆状病毒的分子生物学及其应用的研究进展第13-24页
   ·杆状病毒的分类第13页
   ·杆状病毒的基因组结构及复制与表达第13-17页
     ·杆状病毒的基因组第13-14页
     ·杆状病毒的变异第14-15页
     ·杆状病毒的感染循环和基因表达第15-16页
     ·杆状病毒的主要基因及其功能第16-17页
   ·杆状病毒在生物科学研究中的应用第17-24页
     ·杆状病毒表达系统的发展第17页
     ·杆状病毒在昆虫细胞中表达异源蛋白第17-19页
     ·杆状病毒展示技术第19-20页
     ·杆状病毒介导基因在哺乳细胞中表达第20-22页
     ·杆状病毒载体在疫苗开发中的应用第22-24页
第二章 猪繁殖与呼吸综合征病毒及其疫苗的研究进展第24-31页
   ·病毒分类及理化特性第24-25页
   ·病毒的培养第25页
   ·病毒的基因组结构及编码蛋白第25-26页
   ·病毒的致病机理第26页
   ·病毒的变异第26-27页
   ·病毒在猪体内的持续性感染第27页
   ·PRRSV 疫苗的研究进展第27-31页
     ·灭活疫苗第27-28页
     ·弱毒活疫苗第28-29页
     ·新型疫苗的开发第29-31页
第三章 猪繁殖与呼吸综合征病毒重组杆状病毒的构建第31-47页
   ·材料与方法第32-41页
     ·材料第32页
     ·主要仪器第32页
     ·引物第32-33页
     ·重组供体质粒的构建第33-35页
     ·重组BACMID 的筛选第35-36页
     ·重组杆状病毒的获得与鉴定第36-37页
     ·重组杆状病毒在SF9 细胞上的稳定性第37-38页
     ·ACAPRRS 与ACLACZ 在 SF9 细胞上的生长曲线第38-39页
     ·IFA第39页
     ·NORTHERN BLOT第39-41页
   ·结果第41-45页
     ·供体质粒PBACAPS第41页
     ·重组杆状病毒ACAPRRS第41-42页
     ·ACAPRRS 的稳定性第42-43页
     ·ACAPRRS 的生长曲线第43-44页
     ·PRRSV 基因在 SF9 细胞中的表达第44-45页
     ·SF9 细胞中 PRRSV 亚基因组的转录第45页
   ·讨论第45-47页
第四章 重组杆状 ACAPRRS 产生子代PRRSV 的特性研究第47-60页
   ·材料与方法第48-54页
     ·材料第48页
     ·主要仪器第48页
     ·引物第48-49页
     ·IFA第49页
     ·ACAPRRS 转导 MARC-145 细胞后子代 PRRSV 病毒的产生第49-50页
     ·5’-RACE 和3’-RACE第50-53页
     ·SF9 细胞上清转导MARC-145 细胞第53-54页
     ·空斑试验第54页
     ·一步生长曲线第54页
   ·结果第54-58页
     ·ACAPRRS 转导MARC-145 细胞后N 蛋白的表达第54-55页
     ·子代 PRRSV 的检测第55-56页
     ·VASM 的末端序列第56页
     ·SF9 细胞上清对 MARC-145 细胞转导的变化第56-57页
     ·VASM 病毒的生长特性分析第57-58页
   ·讨论第58-60页
第五章 重组杆状病毒 ACAPRRS 转导 PRRSV 非敏感细胞系的研究第60-67页
   ·材料与方法第61-62页
     ·材料第61页
     ·主要仪器第61页
     ·ACAPRRS 转导BHK-21 细胞后PRRSV N 蛋白的表达第61页
     ·ACAPRRS 转导BHK-21 细胞产生感染性PRRSV 的检测第61页
     ·ACAPRRS 转导VERO 细胞后 PRRSV N 蛋白的表达第61-62页
     ·ACAPRRS 转导VERO 细胞产生感染性PRRSV 的检测第62页
     ·ACAPRRS 转导BHK-21 细胞和 VERO 细胞后产生PRRSV 的动力曲线第62页
   ·结果第62-65页
     ·PRRSV N 蛋白在 BHK-21 细胞中的表达第62-63页
     ·BHK-21 细胞中感染性PRRSV 颗粒的产生第63页
     ·ACAPRRS 转导VERO 细胞后PRRSV N 蛋白的表达第63-64页
     ·VERO 细胞中感染性 PRRSV 颗粒的产生第64页
     ·BHK-21 细胞和 VERO 细胞上 PRRSV 的生产曲线第64-65页
   ·讨论第65-67页
第六章 全文结论第67-68页
参考文献第68-80页
致谢第80-81页
作者简历第81-82页
 附录Ⅰ 重组杆状 AcAPRRS 中 PRRSV 克隆序列 5’与杆状病毒载体序列嵌合处序列第82-83页
 附录Ⅱ重组杆状 AcAPRRS 中 PRRSV 克隆序列 3’与杆状病毒载体序列嵌合处序列第83-84页
附录Ⅲ vASM F1 5’末端序列第84-85页
附录Ⅳ vASM F1 3’末端序列第85-86页
附录Ⅴ vASM F2 5’末端序列第86-87页
附录Ⅵ vASM F2 3’末端序列第87-88页
附录Ⅶ 文中免疫荧光照片第88-90页

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