| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 第一章 山羊痘病毒及重组病毒载体的研究进展 | 第11-28页 |
| ·羊痘概况 | 第11-16页 |
| ·病原学 | 第11-12页 |
| ·流行病现状及其地理分布 | 第12-13页 |
| ·病毒基因组研究进展 | 第13-14页 |
| ·病毒的复制过程 | 第14-15页 |
| ·防治及免疫 | 第15-16页 |
| ·重组羊痘病毒载体的研究 | 第16-24页 |
| ·GTPV 载体研究情况 | 第16-17页 |
| ·GTPV 外源基因插入区的选择 | 第17-19页 |
| ·外源基因的插入方式 | 第19-20页 |
| ·重组病毒的筛选方法 | 第20-22页 |
| ·重组病毒启动子的选择 | 第22-23页 |
| ·山羊痘重组载体的优越性 | 第23-24页 |
| ·EEV 概述 | 第24-27页 |
| ·结语 | 第27-28页 |
| 第二章 山羊痘病毒“GTPV_GP024”基因的克隆及序列分析 | 第28-39页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·山羊痘病毒 | 第28页 |
| ·载体与菌株 | 第28页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-33页 |
| ·设计引物 | 第28-29页 |
| ·山羊痘病毒DNA 的提取 | 第29页 |
| ·PCR 扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第30页 |
| ·DH5α感受细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·PCR 产物的连接与转化 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第32-33页 |
| ·核苷酸和氨基酸序列分析 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-37页 |
| ·DNA 模板及PCR 电泳结果 | 第33-34页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·测序结果分析 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 表达LACZ-GPT 的山羊痘病毒GP024 蛋白缺失载体的构建及重组病毒检测 | 第39-51页 |
| ·材料 | 第39-40页 |
| ·细胞与毒株 | 第39页 |
| ·载体与菌株 | 第39页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39-40页 |
| ·试验方法 | 第40-46页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| ·PCR 方法扩增左右同源臂 | 第40-41页 |
| ·左右同源臂与T 载体的克隆 | 第41页 |
| ·表达盒的构建 | 第41-43页 |
| ·重组载体的构建 | 第43-44页 |
| ·重组载体的纯化 | 第44页 |
| ·转移载体的转染 | 第44-45页 |
| ·重组病毒筛选 | 第45-46页 |
| ·结果 | 第46-49页 |
| ·左右同源臂PCR、克隆、测序结果 | 第46-47页 |
| ·表达盒的鉴定 | 第47页 |
| ·转移载体的鉴定 | 第47-48页 |
| ·重组病毒的筛选 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 表达EGFP-GPT 的山羊痘病毒GP024 蛋白缺失载体的构建及重组病毒检测 | 第51-59页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·细胞与毒株 | 第51页 |
| ·载体与菌株 | 第51页 |
| ·生化试剂及试剂盒 | 第51页 |
| ·实验仪器 | 第51-52页 |
| ·试验方法 | 第52-54页 |
| ·引物设计 | 第52页 |
| ·病毒DNA 的提取及纯化 | 第52页 |
| ·同源臂基因片段的克隆与测序 | 第52-53页 |
| ·转移载体的构建及鉴定 | 第53页 |
| ·共转染重组病毒的筛选及鉴定 | 第53-54页 |
| ·重组毒接种LT 细胞的TCID50 测定 | 第54页 |
| ·结果 | 第54-57页 |
| ·同源臂基因片段的克隆与测序 | 第54-55页 |
| ·EGFP-P11-P7.5-GPT 表达盒基因片段的酶切 | 第55页 |
| ·转移质粒的酶切和测序鉴定 | 第55-56页 |
| ·第7 代重组病毒的鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组毒的TCID50 | 第57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 全文结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简历 | 第67页 |
