| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-25页 |
| ·植物无融合生殖 | 第11-12页 |
| ·甜菜M14 品系无融合生殖材料及其研究进展 | 第12-13页 |
| ·植物 MADS-box 基因 | 第13-16页 |
| ·MADS-box 基因概述 | 第13-14页 |
| ·植物MADS-box 基因的主要功能 | 第14-16页 |
| ·植物MADS-box 基因的表达调控 | 第16页 |
| ·高等植物启动子的研究进展 | 第16-23页 |
| ·启动子的结构特征 | 第17-18页 |
| ·转录起始位点 | 第17页 |
| ·TATA-box | 第17页 |
| ·一般上游启动子元件 | 第17-18页 |
| ·植物启动子的基本类型及其应用研究 | 第18-20页 |
| ·组成型启动子 | 第18-19页 |
| ·组织特异型启动子 | 第19页 |
| ·诱导型启动子 | 第19-20页 |
| ·植物启动子的克隆方法 | 第20-23页 |
| ·利用启动子探针质粒载体筛选启动子 | 第20-21页 |
| ·利用PCR 技术克隆启动子 | 第21-23页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第23页 |
| ·本研究的技术路线 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-40页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备及试剂 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-40页 |
| ·甜菜M14 品系基因组DNA 的提取 | 第26页 |
| ·基因BvM14-MADSbox 5′端序列的扩增、转化与重组体的筛选 | 第26-28页 |
| ·目的片段5′序列的扩增 | 第26-27页 |
| ·目的片段的纯化 | 第27页 |
| ·目的片段与TA 克隆载体pMD 18-T 的连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28页 |
| ·阳性克隆子的PCR 鉴定 | 第28页 |
| ·甜菜BvM14-MADSbox 基因启动子序列的克隆 | 第28-30页 |
| ·甜菜M14 基因组DNA 的酶切 | 第28-29页 |
| ·酶切后基因组DNA 与接头连接 | 第29页 |
| ·PCR 扩增BvM14-MADSbox 基因启动子 | 第29-30页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子序列的Southern 印迹检测 | 第30-32页 |
| ·BvM14-MADSbox 基因启动子序列的测定与分析 | 第32-33页 |
| ·BvM14-MADSbox 基因启动子5′缺失表达载体的构建 | 第33-37页 |
| ·PCR 扩增BvM14-MADSbox 启动子5′缺失序列 | 第34-35页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子5′缺失序列的酶切反应 | 第35页 |
| ·质粒载体pBI121 的制备 | 第35-36页 |
| ·质粒表达载体pBI121 的双酶切 | 第36页 |
| ·pBI121 与BvM14-MADSbox 启动子5′缺失序列连接 | 第36-37页 |
| ·大肠杆菌DH5α阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌（DH5α）感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37页 |
| ·大肠杆菌阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第37-38页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子5′缺失表达载体导入根癌农杆菌 | 第38页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备（EHA105） | 第38页 |
| ·电击法转化农杆菌EHA105 | 第38页 |
| ·农杆菌阳性克隆子的筛选与鉴定 | 第38页 |
| ·根癌农杆菌叶盘法转化烟草植株 | 第38-39页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子5′缺失序列驱动GUS 基因在叶片表达的组织化学检测结果 | 第39-40页 |
| 第3章 结果与分析 | 第40-55页 |
| ·甜菜M14 品系基因组总DNA 的提取 | 第40页 |
| ·基因 BvM14-MADSbox 5′端序列的扩增结果 | 第40-41页 |
| ·BvM14-MADSbox 基因启动子序列克隆结果 | 第41-43页 |
| ·甜菜M14 基因组DNA 酶切 | 第41-42页 |
| ·PCR 扩增BvM14-MADSbox 启动子序列结果 | 第42-43页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子序列的Southern 印迹检测结果 | 第43页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子序列的转化与测序 | 第43-44页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子序列转化与重组体筛选 | 第43-44页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子序列的测序 | 第44页 |
| ·甜菜 BvM14-MADSbox 基因启动子序列的分析 | 第44-46页 |
| ·BvM14-MADSbox 基因启动子 5′缺失表达载体的构建 | 第46-48页 |
| ·启动子缺失片段的获得 | 第46-47页 |
| ·启动子缺失片段的酶切反应 | 第47页 |
| ·质粒载体pBI121 的制备 | 第47-48页 |
| ·质粒载体pBI121 的酶切反应 | 第48页 |
| ·大肠杆菌 DH5α 阳性克隆子的筛选与鉴定结果 | 第48-51页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子 5′缺失表达载体导入根癌农杆菌 | 第51-53页 |
| ·BvM14-MADSbox 启动子 5′缺失序列瞬时表达检测 | 第53-55页 |
| 第4章 讨论 | 第55-58页 |
| ·加接头的染色体步移技术的条件优化 | 第55页 |
| ·BvM14-MADSbox 基因启动子顺式作用元件分析 | 第55-56页 |
| ·BvM14-MADSbox 基因启动子序列功能鉴定 | 第56-57页 |
| ·后续研究思路 | 第57-58页 |
| 第5章 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 附录 | 第66-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第72页 |
