| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-24页 |
| ·大麻简介 | 第10-11页 |
| ·微生物多样性 | 第11-14页 |
| ·传统培养法在微生物多样性研究中的应用 | 第11-12页 |
| ·分子生物学方法在微生物多样性研究中的应用 | 第12-14页 |
| ·基于分子杂交技术的分子标记 | 第13-14页 |
| ·基于PCR 的分子标记技术 | 第14页 |
| ·变性梯度凝胶电泳 | 第14-19页 |
| ·DGGE 技术的基本原理 | 第15-16页 |
| ·变性梯度凝胶电泳的操作流程 | 第16-17页 |
| ·DGGE 图谱的系统优化 | 第17-19页 |
| ·DGGE 技术应用的局限性 | 第19页 |
| ·PCR-DGGE 技术在微生物多样性研究中的应用 | 第19-22页 |
| ·PCR-DGGE 的原理和特点 | 第19-20页 |
| ·PCR-DGGE 技术在微生物多样性中的应用范畴 | 第20-22页 |
| ·研究微生物类群的多样性 | 第20-21页 |
| ·用于环境中微生物变化的动态监测 | 第21页 |
| ·有助于发现新的微生物 | 第21页 |
| ·揭示环境中的群落构成以及种群相互间的进化关系 | 第21-22页 |
| ·PCR-DGGE 技术在沤麻系统中的应用 | 第22页 |
| ·课题研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-43页 |
| ·试验材料 | 第24-31页 |
| ·供试材料 | 第24页 |
| ·供试菌种及质粒 | 第24页 |
| ·扩增引物 | 第24-25页 |
| ·主要生化及分子生物学试剂 | 第25-29页 |
| ·DGGE 制胶所用试剂 | 第25-26页 |
| ·银染所用试剂 | 第26-27页 |
| ·细菌鉴定所用试剂 | 第27-28页 |
| ·利用165 rDNA 方法鉴定时所需试剂 | 第28-29页 |
| ·培养基及试剂盒 | 第29-30页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·试剂盒 | 第30页 |
| ·实验仪器 | 第30-31页 |
| ·大麻取样 | 第31-32页 |
| ·沤麻过程中的采样时间及方法 | 第31页 |
| ·沤麻液中菌种分离 | 第31-32页 |
| ·形态特征鉴定和生理生化试验 | 第32页 |
| ·DGGE 电泳 | 第32-42页 |
| ·总基因组的提取 | 第32-33页 |
| ·PCR 扩增过程 | 第33-34页 |
| ·引物设计 | 第33页 |
| ·DNA 片段扩增 | 第33-34页 |
| ·PCR 扩增结果的检测 | 第34页 |
| ·PCR 产物的回收 | 第34-35页 |
| ·165 rDNA 序列系统发育分析 | 第35-37页 |
| ·克隆片段的连接与转化 | 第35-37页 |
| ·克隆结果的快速检测 | 第37页 |
| ·测序结果分析 | 第37页 |
| ·DGGE 条件优化 | 第37-38页 |
| ·凝胶变性梯度范围和电压的确定 | 第37页 |
| ·DGGE 上样样品的确定 | 第37-38页 |
| ·丙烯酰胺浓度的确定 | 第38页 |
| ·DGGE 时间的确定 | 第38页 |
| ·DGGE 方法检测 | 第38-41页 |
| ·胶的准备与灌制 | 第38-39页 |
| ·胶板电泳前的准备 | 第39-40页 |
| ·电泳 | 第40页 |
| ·银染方法检测 | 第40-41页 |
| ·多样性的研究方法 | 第41-42页 |
| ·条带的测序 | 第42-43页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶的回收 | 第42页 |
| ·回收片段的克隆与纯化 | 第42页 |
| ·克隆片段的连接与转化 | 第42页 |
| ·克隆结果的快速检测 | 第42-43页 |
| 第3章 结果与分析 | 第43-66页 |
| ·细菌形态多样性统计分析 | 第43-48页 |
| ·传统可培养法分离大麻沤麻液中菌株 | 第43-45页 |
| ·不同时段沤麻液的菌群种类与数量的初步统计 | 第45-47页 |
| ·生理生化试验结果 | 第47-48页 |
| ·16S rDNA 的PCR 扩增产物分析 | 第48-54页 |
| ·果胶酶产生菌、甘露聚糖酶产生菌、牛肉膏培养基生长菌基因组DNA提取 | 第48-50页 |
| ·16S rDNA 的PCR 扩增产物分析 | 第50-51页 |
| ·克隆片段的连接转化及克隆结果的快速检测 | 第51页 |
| ·系统发育分析 | 第51-54页 |
| ·细菌菌群结构分析 | 第54-66页 |
| ·总基因组DNA 的提取 | 第54页 |
| ·16S rDNA V3 区PCR 扩增及纯化 | 第54-55页 |
| ·DGGE 条件优化 | 第55-57页 |
| ·凝胶变性梯度范围和电压的确定 | 第55-56页 |
| ·DGGE 上样样品的确定 | 第56-57页 |
| ·丙烯酰胺浓度的确定 | 第57页 |
| ·DGGE 时间的确定 | 第57页 |
| ·DGGE 条带序列分析 | 第57-60页 |
| ·DGGE 条带的回收与扩增 | 第57-58页 |
| ·克隆结果检测与单一条带验证 | 第58-59页 |
| ·测序结果分析 | 第59-60页 |
| ·DGGE 图谱分析 | 第60-66页 |
| ·DGGE 图谱的丰度与相似度 | 第60-62页 |
| ·DGGE 图谱条带的吸光度 | 第62-63页 |
| ·DGGE 图谱条带的优势度 | 第63-65页 |
| ·DGGE 图谱条带的多样性指数 | 第65-66页 |
| 第4章 讨论 | 第66-72页 |
| ·课题背景 | 第66页 |
| ·传统可培养法的细菌鉴定 | 第66-67页 |
| ·变性梯度凝胶电泳技术 | 第67-72页 |
| ·PCR-DGGE 分析 | 第67-68页 |
| ·DGGE 凝胶的制备 | 第68-69页 |
| ·DGGE 条件优化及银染 | 第69-70页 |
| ·DGGE 条带序列分析 | 第70-71页 |
| ·DGGE 图谱分析 | 第71-72页 |
| 第5章 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第84页 |
