中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
1. 前言 | 第8-19页 |
·卤虫的生物学特征、分类地位和分布 | 第8-10页 |
·卤虫生物学研究进展 | 第10-18页 |
·卤虫胚胎发育相关基因研究进展 | 第10-13页 |
·orthodenticle 基因和Hunchback 基因相关研究工作 | 第13-17页 |
·orthodenticle 基因相关研究工作 | 第13-14页 |
·Hunchback 基因相关研究工作 | 第14-17页 |
·卤虫分子生物学研究进展 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2. 材料与方法 | 第19-35页 |
·材料 | 第19-22页 |
·卤虫孵化及培养条件 | 第19-20页 |
·主要试剂 | 第20-22页 |
·总RNA 提取及纯化试剂 | 第20页 |
·反转录及PCR 相关试剂 | 第20页 |
·核酸电泳试剂 | 第20页 |
·PCR 产物纯化试剂 | 第20-21页 |
·克隆用试剂 | 第21页 |
·整体免疫组化试剂所需药品试剂 | 第21页 |
·pH 调节用试剂 | 第21-22页 |
·仪器与设备 | 第22页 |
·方法 | 第22-34页 |
·实验器材的处理 | 第22页 |
·卤虫各时期总RNA 的提取 | 第22-23页 |
·总RNA 模板的纯化 | 第23-24页 |
·反转录 | 第23-24页 |
·RT-PCR | 第24-26页 |
·orthodenticle 基因引物序列设计 | 第24-25页 |
·H unchback 基因引物序列设计 | 第25-26页 |
·3’RACE | 第26-27页 |
·orthodenticle 基因引物序列设计 | 第26页 |
·Hunchback 基因引物序列设计 | 第26-27页 |
·5’RACE | 第27-29页 |
·orthodenticle 基因5’RACE 引物设计和合成 | 第27-28页 |
·Hunchback 基因5′RACE 引物设计和合成 | 第28-29页 |
·PCR 产物的检测 | 第29页 |
·目的片段回收 | 第29-30页 |
·目的片段的克隆 | 第30-31页 |
·整体免疫组化 | 第31-32页 |
·卤虫胚胎卵及无节幼体和成虫制备以及免疫组织化学染色 | 第31-32页 |
·检测 | 第32页 |
·半定量PCR | 第32-34页 |
·生物信息学分析 | 第34-35页 |
·序列同源性分析及多序列比对 | 第34页 |
·蛋白质基本性质分析 | 第34页 |
·功能位点分析 | 第34页 |
·系统进化树分析 | 第34-35页 |
3. 结果 | 第35-58页 |
·总RNA 的质量 | 第35页 |
·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因 PCR 扩增结果及序列分析 | 第35-37页 |
·orthodenticle 基因PCR 扩增结果 | 第35-36页 |
·orthodenticle 基因3’RACE 扩增结果 | 第36-37页 |
·orthodenticle 基因5’RACE 扩增结果 | 第37页 |
·Hunchback 基因 PCR 扩增结果及序列分析 | 第37-40页 |
·Hunchback 基因PCR 扩增结果 | 第37-38页 |
·Hunchback 基因3’RACE 扩增结果 | 第38-39页 |
·Hunchback 基因5’RACE 扩增结果 | 第39-40页 |
·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因序列生物信息学分析 | 第40-49页 |
·orthodenticle 基因序列生物信息学分析 | 第40-44页 |
·Hunchback 基因序列生物信息学分析 | 第44-49页 |
·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因整体免疫组化 | 第49-55页 |
·整体免疫组化条件 | 第49-50页 |
·卤虫胚胎处理 | 第50页 |
·对照组实验结果 | 第50-52页 |
·orthodenticle 基因整体免疫组化结果 | 第52-53页 |
·Hunchback 基因整体免疫组化结果 | 第53-55页 |
·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因半定量 PCR | 第55-57页 |
·actin 基因半定量 PCR 结果 | 第55页 |
·orthodenticle 基因半定量 PCR 结果 | 第55-56页 |
·Hunchback 基因半定量PCR 结果 | 第56-57页 |
·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因表达趋势 | 第57-58页 |
4. 讨论 | 第58-63页 |
·中国卤虫 orthodenticle 基因和 Hunchback 基因的序列分析 | 第58-59页 |
·中国卤虫orthodenticle 基因序列分析 | 第58-59页 |
·中国卤虫Hunchback 基因的序列分析 | 第59页 |
·中国卤虫 orthodenticle 基因和 Hunchback 基因的表达 | 第59-61页 |
·中国卤虫orthodenticle 基因在不同发育时期的表达 | 第59-60页 |
·中国卤虫Hunchback 基因在不同发育时期的表达 | 第60-61页 |
·中国卤虫 orthodenticle 基因和 Hunchback 基因之间相互作用 | 第61-62页 |
·实验条件的优化 | 第62-63页 |
·总 RNA 的质量、引物的设计和 RT-PCR 条件的优化 | 第62页 |
·整体免疫组化条件优化 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
致谢 | 第69页 |