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中国卤虫orthodenticle和Hunchback基因的序列分析及在不同发育时期的表达

中文摘要第1-5页
Abstract第5-8页
1. 前言第8-19页
   ·卤虫的生物学特征、分类地位和分布第8-10页
   ·卤虫生物学研究进展第10-18页
     ·卤虫胚胎发育相关基因研究进展第10-13页
     ·orthodenticle 基因和Hunchback 基因相关研究工作第13-17页
       ·orthodenticle 基因相关研究工作第13-14页
       ·Hunchback 基因相关研究工作第14-17页
     ·卤虫分子生物学研究进展第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18-19页
2. 材料与方法第19-35页
   ·材料第19-22页
     ·卤虫孵化及培养条件第19-20页
     ·主要试剂第20-22页
       ·总RNA 提取及纯化试剂第20页
       ·反转录及PCR 相关试剂第20页
       ·核酸电泳试剂第20页
       ·PCR 产物纯化试剂第20-21页
       ·克隆用试剂第21页
       ·整体免疫组化试剂所需药品试剂第21页
       ·pH 调节用试剂第21-22页
       ·仪器与设备第22页
   ·方法第22-34页
     ·实验器材的处理第22页
     ·卤虫各时期总RNA 的提取第22-23页
     ·总RNA 模板的纯化第23-24页
       ·反转录第23-24页
     ·RT-PCR第24-26页
         ·orthodenticle 基因引物序列设计第24-25页
         ·H unchback 基因引物序列设计第25-26页
     ·3’RACE第26-27页
       ·orthodenticle 基因引物序列设计第26页
       ·Hunchback 基因引物序列设计第26-27页
     ·5’RACE第27-29页
       ·orthodenticle 基因5’RACE 引物设计和合成第27-28页
       ·Hunchback 基因5′RACE 引物设计和合成第28-29页
     ·PCR 产物的检测第29页
     ·目的片段回收第29-30页
     ·目的片段的克隆第30-31页
     ·整体免疫组化第31-32页
       ·卤虫胚胎卵及无节幼体和成虫制备以及免疫组织化学染色第31-32页
       ·检测第32页
     ·半定量PCR第32-34页
   ·生物信息学分析第34-35页
     ·序列同源性分析及多序列比对第34页
     ·蛋白质基本性质分析第34页
     ·功能位点分析第34页
     ·系统进化树分析第34-35页
3. 结果第35-58页
   ·总RNA 的质量第35页
   ·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因 PCR 扩增结果及序列分析第35-37页
     ·orthodenticle 基因PCR 扩增结果第35-36页
     ·orthodenticle 基因3’RACE 扩增结果第36-37页
     ·orthodenticle 基因5’RACE 扩增结果第37页
   ·Hunchback 基因 PCR 扩增结果及序列分析第37-40页
     ·Hunchback 基因PCR 扩增结果第37-38页
     ·Hunchback 基因3’RACE 扩增结果第38-39页
     ·Hunchback 基因5’RACE 扩增结果第39-40页
   ·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因序列生物信息学分析第40-49页
     ·orthodenticle 基因序列生物信息学分析第40-44页
     ·Hunchback 基因序列生物信息学分析第44-49页
   ·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因整体免疫组化第49-55页
     ·整体免疫组化条件第49-50页
     ·卤虫胚胎处理第50页
     ·对照组实验结果第50-52页
     ·orthodenticle 基因整体免疫组化结果第52-53页
     ·Hunchback 基因整体免疫组化结果第53-55页
   ·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因半定量 PCR第55-57页
     ·actin 基因半定量 PCR 结果第55页
     ·orthodenticle 基因半定量 PCR 结果第55-56页
     ·Hunchback 基因半定量PCR 结果第56-57页
   ·orthodenticle 基因和 Hunchback 基因表达趋势第57-58页
4. 讨论第58-63页
   ·中国卤虫 orthodenticle 基因和 Hunchback 基因的序列分析第58-59页
     ·中国卤虫orthodenticle 基因序列分析第58-59页
     ·中国卤虫Hunchback 基因的序列分析第59页
   ·中国卤虫 orthodenticle 基因和 Hunchback 基因的表达第59-61页
     ·中国卤虫orthodenticle 基因在不同发育时期的表达第59-60页
     ·中国卤虫Hunchback 基因在不同发育时期的表达第60-61页
   ·中国卤虫 orthodenticle 基因和 Hunchback 基因之间相互作用第61-62页
   ·实验条件的优化第62-63页
     ·总 RNA 的质量、引物的设计和 RT-PCR 条件的优化第62页
     ·整体免疫组化条件优化第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69页

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