| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-17页 |
| ·日本七鳃鳗 | 第12-13页 |
| ·七鳃鳗概况 | 第12页 |
| ·七鳃鳗的研究价值 | 第12-13页 |
| ·翻译控制肿瘤蛋白（TCTP） | 第13-17页 |
| ·TCTP 背景 | 第13页 |
| ·TCTP 的空间结构 | 第13-14页 |
| ·分泌途径 | 第14页 |
| ·TCTP 的生物学功能 | 第14-16页 |
| ·组胺释放因子功能 | 第14-15页 |
| ·微管结合蛋白功能 | 第15页 |
| ·钙结合蛋白功能 | 第15页 |
| ·抗凋亡作用 | 第15-16页 |
| ·结语 | 第16-17页 |
| 2 日本七鳃鳗口腔腺分泌RLJ-TCTP 蛋白的基因克隆、表达及纯化 | 第17-27页 |
| ·日本七鳃鳗口腔腺分泌RLJ-TCTP 蛋白的基因克隆 | 第17-21页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-19页 |
| ·引物设计 | 第17页 |
| ·总RNA 的提取 | 第17-18页 |
| ·逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR） | 第18-19页 |
| ·目的片段与载体相连并进行筛选 | 第19页 |
| ·结果 | 第19-21页 |
| ·RT-PCR 结果 | 第19-20页 |
| ·阳性转化子筛选和双酶切鉴定 | 第20-21页 |
| ·RLJ-TCTP 蛋白的诱导表达、鉴定与纯化 | 第21-27页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| ·从克隆菌DH5α中提取含有目的蛋白的重组质粒 | 第22页 |
| ·重组质粒pET236- rLj-TCTP 转化入表达菌E.coli BL21 中 | 第22页 |
| ·对重组表达菌的鉴定 | 第22页 |
| ·对阳性重组子IPTG 诱导表达 | 第22页 |
| ·诱导蛋白的提取及鉴定 | 第22-23页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定 | 第23页 |
| ·rLj-TCTP 蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| ·纯化蛋白的浓度测定 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-26页 |
| ·对重组菌进行低温过夜 IPTG 诱导表达 | 第25页 |
| ·蛋白质亲和层析纯化 | 第25-26页 |
| ·蛋白标准曲线的绘制 | 第26页 |
| ·纯化蛋白的浓度 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| 3 RLJ-TCTP 在日本七鳃鳗各个组织中的特异性表达情况 | 第27-32页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·引物设计 | 第27页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第27-28页 |
| ·逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR） | 第28-30页 |
| ·将PCR 扩增结果进行琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30页 |
| ·结果 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 4 RLJ-TCTP 的生物信息学分析 | 第32-41页 |
| ·对RLJ-TCTP 蛋白系统演化关系进行分析 | 第32-33页 |
| ·对rLj-TCTP 氨基酸序列的同源性分析 | 第32页 |
| ·对rLj-TCTP 的氨基酸的分子进化分析 | 第32-33页 |
| ·对RLJ-TCTP 蛋白的理化性质进行预测 | 第33-34页 |
| ·对RLJ-TCTP 蛋白的结构特征预测 | 第34-40页 |
| ·对rLj-TCTP 氨基酸序列功能域分析 | 第34页 |
| ·rLj-TCTP 蛋白二级结构预测 | 第34-40页 |
| ·溶液可及性预测 | 第34-35页 |
| ·rLj-TCTP 蛋白分泌途径和亚细胞定位预测 | 第35-36页 |
| ·跨膜区域预测 | 第36-37页 |
| ·疏水性预测 | 第37-38页 |
| ·平均柔曲性分布预测 | 第38-39页 |
| ·rLj-TCTP 蛋白的翻译后修饰位点预测 | 第39-40页 |
| ·对RLJ-TCTP 蛋白的三级结构预测 | 第40-41页 |
| 5 RLJ-TCTP 蛋白刺激大鼠腹腔肥大细胞释放组胺 | 第41-45页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| 6 RLJ-TCTP 对HUVEC、HELA 细胞增殖及其凋亡的影响 | 第45-56页 |
| ·材料 | 第45页 |
| ·方法 | 第45-49页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·细胞增殖实验 | 第45-46页 |
| ·DNA ladder 检测 | 第46-47页 |
| ·Annexin V-FITC 细胞凋亡检测 | 第47-48页 |
| ·Hoechst 染色 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-53页 |
| ·HUEVC 细胞的CCK-8 检测结果 | 第49页 |
| ·HUEVC 细胞的DNA ladder 检测结果 | 第49-50页 |
| ·Annexin V-FITC 对HUEVC 细胞凋亡检测结果 | 第50-52页 |
| ·Hela 细胞的DNA ladder 检测结果 | 第52页 |
| ·Hoechst 对Hela 细胞的染色结果 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-56页 |
| 7 结论 | 第56-58页 |
| ·主要结论 | 第56-57页 |
| ·发现了存在于日本七鳃鳗口腔腺中的 TCTP 模体蛋白新基因，并将其命名为rLj-TCTP | 第56页 |
| ·研究了rLj-TCTP 在日本七鳃鳗各个组织中的特异性表达情况 | 第56页 |
| ·对rLj-TCTP 进行了的生物信息学分析 | 第56页 |
| ·rLj-TCTP 蛋白刺激大鼠腹腔肥大细胞释放组胺 | 第56-57页 |
| ·rLj-TCTP 对HUVEC、Hela 细胞增殖及其凋亡的影响 | 第57页 |
| ·创新点 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
