摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 文献综述 | 第8-24页 |
1.1 植物响应干旱胁迫机制研究现状 | 第8-13页 |
1.1.1 干旱胁迫对植物的影响 | 第8-9页 |
1.1.2 植物响应干旱胁迫的调控机制研究 | 第9-13页 |
1.2 植物泛素连接酶E3介导的植物干旱胁迫响应 | 第13-19页 |
1.2.1 泛素化过程 | 第13-15页 |
1.2.2 参与干旱胁迫调控的植物泛素连接酶E3 | 第15-19页 |
1.3 植物SAP蛋白家族基因研究进展 | 第19-22页 |
1.3.1 SAP蛋白家族基因的结构与分类 | 第19-20页 |
1.3.2 SAP蛋白家族基因参与非生物胁迫响应 | 第20-22页 |
1.4 立论依据、研究目标及研究内容 | 第22-24页 |
第二章 超表达TaSAP5提高植物的抗旱性 | 第24-39页 |
2.1 材料和方法 | 第24-32页 |
2.1.1 材料与种植条件 | 第24页 |
2.1.2 干旱胁迫下TaSAP5基因A、B、D特异表达鉴定 | 第24-26页 |
2.1.3 超表达小麦、拟南芥TaSAP5基因载体的构建 | 第26-30页 |
2.1.4 小麦、拟南芥的遗传转化 | 第30-32页 |
2.1.5 超表达TaSAP5转基因小麦、拟南芥的抗旱鉴定 | 第32页 |
2.2 结果 | 第32-37页 |
2.2.1 TaSAP5响应干旱胁迫表达分析 | 第32-34页 |
2.2.2 TaSAP5超表达转基因拟南芥抗旱鉴定 | 第34-35页 |
2.2.3 TaSAP5超表达转基因小麦抗旱鉴定 | 第35-37页 |
2.3 讨论 | 第37-39页 |
第三章 TaSAP5参与植物干旱胁迫响应的机制研究 | 第39-60页 |
3.1 材料和方法 | 第39-50页 |
3.1.1 小麦转录组测序与分析 | 第39-40页 |
3.1.2 拟南芥DREB2A下游基因的表达鉴定 | 第40页 |
3.1.3 拟南芥35S:MYC-AtDREB2A载体构建 | 第40-41页 |
3.1.4 免疫印迹实验(western blot) | 第41-43页 |
3.1.5 35S:TaSAP5-GFP亚细胞定位载体的构建 | 第43页 |
3.1.6 大提质粒 | 第43-44页 |
3.1.7 小麦原生质体的提取与转化 | 第44-45页 |
3.1.8 亚细胞定位 | 第45页 |
3.1.9 35S:GST-TaSAP5原核表达载体构建 | 第45-46页 |
3.1.10 蛋白原核表达与纯化 | 第46页 |
3.1.11 体外泛素化实验 | 第46页 |
3.1.12 AtDRIP1-HA表达载体构建 | 第46-48页 |
3.1.13 AtDRIP1、AtDRIP2、TaDRIP、TaNAC-9MYC表达载体构建 | 第48页 |
3.1.14 农杆菌介导的烟草瞬时表达 | 第48-49页 |
3.1.15 烟草体内Co-IP | 第49页 |
3.1.16 烟草体内泛素化实验 | 第49页 |
3.1.17 烟草体内降解实验 | 第49-50页 |
3.1.18 拟南芥、小麦体内降解实验 | 第50页 |
3.2 结果 | 第50-58页 |
3.2.1 超表达TaSAP5转基因小麦与WT基因差异表达分析 | 第50-51页 |
3.2.2 超表达TaSAP5转基因小麦和拟南芥中DREB2A下游基因表达鉴定 | 第51-52页 |
3.2.3 超表达TaSAP5转基因拟南芥提高DREB2A蛋白的表达 | 第52-53页 |
3.2.4 TaSAP5是定位于细胞核和细胞质的E3泛素连接酶 | 第53页 |
3.2.5 TaSAP5与DREB2A INTEACTING PROTEIN (DRIP)蛋白互作 | 第53-55页 |
3.2.6 TaSAP5对DRIP的体内泛素化分析 | 第55页 |
3.2.7 TaSAP5能够促进小麦和拟南芥DRIP的降解 | 第55-58页 |
3.3 讨论 | 第58-60页 |
第四章 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
作者简历 | 第72页 |