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小麦E3泛素连接酶TaSAP5的功能鉴定及调控途径解析

摘要第4-5页
Abstract第5页
第一章 文献综述第8-24页
    1.1 植物响应干旱胁迫机制研究现状第8-13页
        1.1.1 干旱胁迫对植物的影响第8-9页
        1.1.2 植物响应干旱胁迫的调控机制研究第9-13页
    1.2 植物泛素连接酶E3介导的植物干旱胁迫响应第13-19页
        1.2.1 泛素化过程第13-15页
        1.2.2 参与干旱胁迫调控的植物泛素连接酶E3第15-19页
    1.3 植物SAP蛋白家族基因研究进展第19-22页
        1.3.1 SAP蛋白家族基因的结构与分类第19-20页
        1.3.2 SAP蛋白家族基因参与非生物胁迫响应第20-22页
    1.4 立论依据、研究目标及研究内容第22-24页
第二章 超表达TaSAP5提高植物的抗旱性第24-39页
    2.1 材料和方法第24-32页
        2.1.1 材料与种植条件第24页
        2.1.2 干旱胁迫下TaSAP5基因A、B、D特异表达鉴定第24-26页
        2.1.3 超表达小麦、拟南芥TaSAP5基因载体的构建第26-30页
        2.1.4 小麦、拟南芥的遗传转化第30-32页
        2.1.5 超表达TaSAP5转基因小麦、拟南芥的抗旱鉴定第32页
    2.2 结果第32-37页
        2.2.1 TaSAP5响应干旱胁迫表达分析第32-34页
        2.2.2 TaSAP5超表达转基因拟南芥抗旱鉴定第34-35页
        2.2.3 TaSAP5超表达转基因小麦抗旱鉴定第35-37页
    2.3 讨论第37-39页
第三章 TaSAP5参与植物干旱胁迫响应的机制研究第39-60页
    3.1 材料和方法第39-50页
        3.1.1 小麦转录组测序与分析第39-40页
        3.1.2 拟南芥DREB2A下游基因的表达鉴定第40页
        3.1.3 拟南芥35S:MYC-AtDREB2A载体构建第40-41页
        3.1.4 免疫印迹实验(western blot)第41-43页
        3.1.5 35S:TaSAP5-GFP亚细胞定位载体的构建第43页
        3.1.6 大提质粒第43-44页
        3.1.7 小麦原生质体的提取与转化第44-45页
        3.1.8 亚细胞定位第45页
        3.1.9 35S:GST-TaSAP5原核表达载体构建第45-46页
        3.1.10 蛋白原核表达与纯化第46页
        3.1.11 体外泛素化实验第46页
        3.1.12 AtDRIP1-HA表达载体构建第46-48页
        3.1.13 AtDRIP1、AtDRIP2、TaDRIP、TaNAC-9MYC表达载体构建第48页
        3.1.14 农杆菌介导的烟草瞬时表达第48-49页
        3.1.15 烟草体内Co-IP第49页
        3.1.16 烟草体内泛素化实验第49页
        3.1.17 烟草体内降解实验第49-50页
        3.1.18 拟南芥、小麦体内降解实验第50页
    3.2 结果第50-58页
        3.2.1 超表达TaSAP5转基因小麦与WT基因差异表达分析第50-51页
        3.2.2 超表达TaSAP5转基因小麦和拟南芥中DREB2A下游基因表达鉴定第51-52页
        3.2.3 超表达TaSAP5转基因拟南芥提高DREB2A蛋白的表达第52-53页
        3.2.4 TaSAP5是定位于细胞核和细胞质的E3泛素连接酶第53页
        3.2.5 TaSAP5与DREB2A INTEACTING PROTEIN (DRIP)蛋白互作第53-55页
        3.2.6 TaSAP5对DRIP的体内泛素化分析第55页
        3.2.7 TaSAP5能够促进小麦和拟南芥DRIP的降解第55-58页
    3.3 讨论第58-60页
第四章 结论第60-61页
参考文献第61-71页
致谢第71-72页
作者简历第72页

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