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HBx调控EZH2启动子活性的机制研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
第一章 文献综述第10-17页
   ·HBx 基因及其编码产物第10-11页
     ·HBV 与HBx 基因第10-11页
     ·HBx 蛋白结构特点第11页
   ·HBx 的生物学功能第11-14页
     ·HBx 的反式激活作用第11-13页
     ·HBx 在HCC 发生过程中的其他作用第13-14页
   ·EZH2 的结构及其与癌症的关系第14-16页
     ·EZH2 的结构特点及生物学功能第14-15页
     ·EZH2 与癌症的关系第15-16页
   ·本研究的目的和意义第16-17页
第二章 材料与方法第17-34页
   ·材料第17-22页
     ·引物第17页
     ·载体第17页
     ·菌株、细胞第17页
     ·工具酶、试剂第17-18页
     ·主要耗材和仪器第18-20页
     ·主要溶液的配置第20-21页
     ·实验用生物学软件和数据库第21-22页
   ·方法第22-34页
     ·技术路线第22页
     ·细胞培养与转染第22-23页
     ·SDS-PAGE 与蛋白免疫印迹第23-24页
     ·基因组DNA 和总RNA 提取第24-25页
     ·载体构建第25-31页
     ·GST 融合蛋白的诱导表达及纯化第31页
     ·激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的细胞定位第31-32页
     ·萤光素酶检测系统检测mEZH2 启动子活性第32页
     ·Real-time PCR 检测E2F1 的表达第32-34页
第三章 结果第34-52页
   ·HBx 在AML12 细胞中上调m EZH2 的表达第34页
   ·HBx 能够反式激活mEZH2 启动子的活性第34-42页
     ·胞内表达的HBx 可激活mEZH2 启动子的活性第35-37页
     ·转导肽TLM 介导的HBx 可激活mEZH2 启动子的活性第37-42页
   ·HBx 通过E2F1 反式激活mEZH2 启动子活性第42-52页
     ·HBx 通过-486/-214 和-50/+1 区域调控mEZH2 启动子活性.第42-44页
     ·HBx 通过转录因子E2F1 上调mEZH2 启动子活性第44-52页
第四章 讨论与研究总结第52-55页
   ·讨论第52-54页
   ·研究总结第54-55页
参考文献第55-61页
附录1: mEZH2 启动子序列及酶切图谱第61-63页
附录2: 荧光素酶检测实验数据第63-66页
附录3: HBx-EGFP-TLM 和EGFP-TLM 融合蛋白表达载体的构建第66-71页
英文缩略词表第71-73页
致谢第73-75页
作者简介第75页

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