摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
·HBx 基因及其编码产物 | 第10-11页 |
·HBV 与HBx 基因 | 第10-11页 |
·HBx 蛋白结构特点 | 第11页 |
·HBx 的生物学功能 | 第11-14页 |
·HBx 的反式激活作用 | 第11-13页 |
·HBx 在HCC 发生过程中的其他作用 | 第13-14页 |
·EZH2 的结构及其与癌症的关系 | 第14-16页 |
·EZH2 的结构特点及生物学功能 | 第14-15页 |
·EZH2 与癌症的关系 | 第15-16页 |
·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-34页 |
·材料 | 第17-22页 |
·引物 | 第17页 |
·载体 | 第17页 |
·菌株、细胞 | 第17页 |
·工具酶、试剂 | 第17-18页 |
·主要耗材和仪器 | 第18-20页 |
·主要溶液的配置 | 第20-21页 |
·实验用生物学软件和数据库 | 第21-22页 |
·方法 | 第22-34页 |
·技术路线 | 第22页 |
·细胞培养与转染 | 第22-23页 |
·SDS-PAGE 与蛋白免疫印迹 | 第23-24页 |
·基因组DNA 和总RNA 提取 | 第24-25页 |
·载体构建 | 第25-31页 |
·GST 融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第31页 |
·激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的细胞定位 | 第31-32页 |
·萤光素酶检测系统检测mEZH2 启动子活性 | 第32页 |
·Real-time PCR 检测E2F1 的表达 | 第32-34页 |
第三章 结果 | 第34-52页 |
·HBx 在AML12 细胞中上调m EZH2 的表达 | 第34页 |
·HBx 能够反式激活mEZH2 启动子的活性 | 第34-42页 |
·胞内表达的HBx 可激活mEZH2 启动子的活性 | 第35-37页 |
·转导肽TLM 介导的HBx 可激活mEZH2 启动子的活性 | 第37-42页 |
·HBx 通过E2F1 反式激活mEZH2 启动子活性 | 第42-52页 |
·HBx 通过-486/-214 和-50/+1 区域调控mEZH2 启动子活性. | 第42-44页 |
·HBx 通过转录因子E2F1 上调mEZH2 启动子活性 | 第44-52页 |
第四章 讨论与研究总结 | 第52-55页 |
·讨论 | 第52-54页 |
·研究总结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
附录1: mEZH2 启动子序列及酶切图谱 | 第61-63页 |
附录2: 荧光素酶检测实验数据 | 第63-66页 |
附录3: HBx-EGFP-TLM 和EGFP-TLM 融合蛋白表达载体的构建 | 第66-71页 |
英文缩略词表 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
作者简介 | 第75页 |