| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 文献综述 | 第12-25页 |
| 第一章 肾小管上皮细胞的体外分离培养及其应用 | 第12-19页 |
| ·肾小管和肾小球的发育 | 第12页 |
| ·肾小管上皮细胞的成熟过程 | 第12-13页 |
| ·未分化期 | 第13页 |
| ·分化期 | 第13页 |
| ·成熟期 | 第13页 |
| ·肾小管上皮细胞的功能 | 第13-14页 |
| ·物质重吸收作用 | 第13页 |
| ·药物肾毒性研究的靶作用位点 | 第13页 |
| ·参与疾病的发生 | 第13-14页 |
| ·肾小管上皮细胞培养的研究近况 | 第14-15页 |
| ·人肾小管上皮细胞培养的进展 | 第14-15页 |
| ·其他动物肾小管上皮细胞的培养 | 第15页 |
| ·肾小管上皮细胞的分离及纯化 | 第15-17页 |
| ·组织块培养法 | 第15-16页 |
| ·胶原酶消化分离肾小管上皮细胞 | 第16页 |
| ·其他酶学消化分离肾小管上皮细胞 | 第16-17页 |
| ·肾小管上皮细胞的纯化 | 第17页 |
| ·体外培养肾小管上皮细胞的培养条件 | 第17-19页 |
| ·血清 | 第17页 |
| ·其他营养因子 | 第17-19页 |
| 第二章 端粒、端粒酶与细胞永生化 | 第19-25页 |
| ·端粒与细胞衰老 | 第19-21页 |
| ·衰老 | 第19页 |
| ·端粒 | 第19-20页 |
| ·端粒与细胞衰老 | 第20-21页 |
| ·细胞的永生化 | 第21-25页 |
| ·转染病毒 | 第21-22页 |
| ·原癌基因转染 | 第22页 |
| ·放射性因素 | 第22页 |
| ·4 端粒酶 | 第22-25页 |
| 试验研究 | 第25-50页 |
| 第三章 新生山羊肾小管上皮细胞的原代培养及鉴定 | 第25-34页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·动物和组织来源 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·血清 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26页 |
| ·方法 | 第26-28页 |
| ·培养液的配制 | 第26页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的分离 | 第26-27页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的原代培养 | 第27页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的传代培养 | 第27页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的纯化与培养 | 第27页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的观察与鉴定 | 第27-28页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞生长曲线的绘制 | 第28页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞增殖周期和细胞凋亡的测定 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·胶原酶Ⅰ和Ⅳ对新生山羊肾小管上皮细胞分离培养效果的比较 | 第28-29页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的鉴定 | 第29-30页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞生长曲线的测定 | 第30-31页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的增殖周期和细胞凋亡率分析 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的原代培养及纯化 | 第32页 |
| ·新生山羊肾小管上皮细胞的周期与凋亡 | 第32-33页 |
| ·新生肾小管上皮细胞的鉴定 | 第33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第四章 hTERT 基因转染新生山羊肾小管上皮细胞 | 第34-41页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| ·方法与步骤 | 第35-37页 |
| ·溶液配制 | 第35页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒转化、扩增与鉴定 | 第35页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒转染山羊肾小管上皮细胞 | 第35-37页 |
| ·结果 | 第37-38页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒提取与酶切鉴定 | 第37页 |
| ·pCI-neo-hTERT 质粒浓度与纯度的确定 | 第37页 |
| ·新霉素（G418）对新生山羊肾小管上皮细胞最佳筛选浓度的确定 | 第37页 |
| ·pCI-neo-hTERT 转染后阳性克隆细胞的获得 | 第37页 |
| ·pCI-neo-hTERT 转染后细胞形态和特征 | 第37-38页 |
| ·阳性克隆细胞的纯化 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·人端粒酶逆转录酶（hTERT）基因介导的细胞永生化 | 第38-39页 |
| ·脂质体转染应用的优越性 | 第39页 |
| ·pCI-neo-hTERT 的转染及抗性克隆的筛选 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第五章 转染hTERT 基因的新生山羊肾小管上皮细胞生长特性的鉴定 | 第41-50页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·工具酶与试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器与设备 | 第41页 |
| ·方法与步骤 | 第41-45页 |
| ·溶液配制 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR 检测转染细胞中外源性hTERT 的表达 | 第42-43页 |
| ·Western blot 检测转染细胞中外源性hTERT 蛋白的表达 | 第43-44页 |
| ·转染山羊肾小管上皮细胞的角蛋白与碱性磷酸酶染色鉴定 | 第44页 |
| ·转染山羊肾小管上皮细胞生长曲线的测定 | 第44-45页 |
| ·转染山羊肾小管上皮细胞增殖周期与凋亡的测定 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-48页 |
| ·转染外源性hTERT 基因细胞的RT-PCR 检测 | 第45页 |
| ·Western blot 检测转染细胞中外源性hTERT 蛋白的表达 | 第45-46页 |
| ·角蛋白18 间接免疫荧光检测 | 第46页 |
| ·转染hTERT 基因的肾小管上皮细胞生长曲线 | 第46-47页 |
| ·细胞周期与凋亡检测 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-58页 |
| 个人简介 | 第58页 |
