| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-29页 |
| ·荞麦籽粒成分 | 第10-14页 |
| ·荞麦籽粒蛋白质成分 | 第10页 |
| ·荞麦蛋白质氨基酸组成 | 第10页 |
| ·荞麦中的特殊蛋白质 | 第10-12页 |
| ·荞麦蛋白质的生理功能 | 第12页 |
| ·荞麦籽粒中的生物类黄酮 | 第12-14页 |
| ·其他营养素 | 第14页 |
| ·cDNA 文库 | 第14-17页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第15-16页 |
| ·新型cDNA 文库 | 第16页 |
| ·cDNA 全长文库 | 第16-17页 |
| ·cDNA 文库分析与评价 | 第17页 |
| ·cDNA 文库克隆基因 | 第17页 |
| ·RACE 法 | 第17页 |
| ·SMART 技术构建全长cDNA 文库 | 第17-23页 |
| ·引物设计 | 第23-24页 |
| ·表达序列标签(EST) | 第24-26页 |
| ·基因识别及发现新基因 | 第24-25页 |
| ·以EST 分析基因表达丰度 | 第25页 |
| ·EST 与基因遗传图谱的绘制 | 第25页 |
| ·利用EST 数据库进行电子克隆 | 第25页 |
| ·基因组功能注释 | 第25-26页 |
| ·通过EST 寻找SSR 和SNP 分子标记 | 第26页 |
| ·EST 分析 | 第26-27页 |
| ·EST 数据预处理 | 第26-27页 |
| ·基因的注释和功能分类 | 第27页 |
| ·研究的目的和意义 | 第27-29页 |
| 第二章 苦荞籽粒发育期cDNA 文库的构建及部分测序 | 第29-38页 |
| ·材料与试剂 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29页 |
| ·主要溶液 | 第29页 |
| ·所用主要仪器 | 第29-30页 |
| ·RNA 的提取、纯化与检测 | 第30-31页 |
| ·Trizol 提取总RNA 及检测 | 第30页 |
| ·Concert~(TM) plant RNA Reagent 提取总RNA 与检测 | 第30-31页 |
| ·RNA 样品的DNase 处理 | 第31页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第31-36页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第31-32页 |
| ·cDNA 的LD-PCR(long distance PCR)扩增 | 第32页 |
| ·蛋白酶K 消化 | 第32-33页 |
| ·sfi I 消化 | 第33页 |
| ·CHROMA SPIN-400 Column 分级分离cDNA | 第33-34页 |
| ·cDNA 与λTriplEx2 载体的连接 | 第34页 |
| ·包装反应 | 第34页 |
| ·文库滴度的测定 | 第34-35页 |
| ·文库重组率的鉴定 | 第35-36页 |
| ·插入片段的检测及分析 | 第36-38页 |
| ·λ噬菌体文库的质粒化 | 第36页 |
| ·质粒提取 | 第36页 |
| ·质粒插入片段的PCR 检测 | 第36-37页 |
| ·插入片段的测序 | 第37-38页 |
| 第三章 结果及分析 | 第38-54页 |
| ·总RNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·LD- PCR 扩增 | 第39-40页 |
| ·CHROMA SPIN-400 Column 分级分离cDNA | 第40页 |
| ·cDNA 文库的滴度 | 第40-41页 |
| ·cDNA 文库的重组率检测 | 第41页 |
| ·噬菌体质粒化以及插入片段的PCR 检测 | 第41-43页 |
| ·噬菌体质粒化 | 第41-42页 |
| ·质粒中插入片段的PCR 扩增 | 第42-43页 |
| ·插入片段长度统计 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| ·RNA 提取方法 | 第43-44页 |
| ·RNA 电泳检测 | 第44页 |
| ·DNase 处理RNA | 第44页 |
| ·LD- PCR 扩增 | 第44页 |
| ·CHROMA SPIN-400 Column 分级分离cDNA | 第44页 |
| ·cDNA 与λTriplEx2 载体的连接 | 第44-45页 |
| ·文库滴度的鉴定 | 第45页 |
| ·EST 生物信息学分析 | 第45-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 附录 1:缩略词 | 第58-59页 |
| 附录 2:引物序列 | 第59-60页 |
| 附录 3:EST 登陆号 | 第60-61页 |
| 附录 4:总 RNA 提取 | 第61-62页 |
| 附录 5:质粒提取及 PCR 扩增 | 第62-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 作者简介 | 第70页 |
